中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-8页 |
缩略词 | 第8-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-26页 |
·流感病毒概述 | 第12-17页 |
·流感病毒遗传特性及分子结构 | 第13-16页 |
·流感病毒感染机理 | 第16-17页 |
·禽流感病毒致病性研究进展 | 第17页 |
·流感病毒神经氨酸酶的研究现状 | 第17-20页 |
·神经氨酸酶概述 | 第17-18页 |
·神经氨酸酶各部分功能 | 第18-19页 |
·神经氨酸酶糖基化研究进展 | 第19-20页 |
·糖蛋白糖链相关研究现状 | 第20-24页 |
·糖蛋白概述 | 第20-21页 |
·糖蛋白糖链的解析技术 | 第21-24页 |
·本课题研究的目的及意义 | 第24-26页 |
第二章 基于4-氨基苯草氨酸功能化磁粒分离纯化禽流感病毒神经氨酸酶 | 第26-42页 |
·引言 | 第26-27页 |
·实验仪器及材料 | 第27-29页 |
·主要试剂与材料 | 第27-28页 |
·主要实验仪器 | 第28-29页 |
·主要溶液配制 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-35页 |
·对氨基苯草氨酸功能化磁性微粒的制备 | 第29-31页 |
·功能化磁粒分离纯化NA方法的建立 | 第31-33页 |
·提取NA样品的SDS-PAGE鉴定 | 第33-34页 |
·纯化NA的MALDI-TOF-MS一级质谱鉴定 | 第34页 |
·8种禽流感病毒NA的分离纯化及定量 | 第34-35页 |
·实验结果与分析 | 第35-39页 |
·磁粒用量的确定 | 第35页 |
·结合时间的选择 | 第35-36页 |
·洗脱时间的选择 | 第36-37页 |
·方法特异性验证 | 第37页 |
·提取NA样品的鉴定结果 | 第37-39页 |
·8种病毒样本洗脱NA浓度测定 | 第39页 |
·本章小结 | 第39-42页 |
第三章 基于凝集素芯片技术对流感病毒神经氨酸酶糖链谱的研究 | 第42-58页 |
·引言 | 第42-44页 |
·实验材料与仪器 | 第44-46页 |
·实验试剂与材料 | 第44-45页 |
·主要实验仪器 | 第45页 |
·主要溶液配置 | 第45-46页 |
·实验方法 | 第46-52页 |
·环氧化片基的制备 | 第46页 |
·凝集素芯片的设计与点制 | 第46-51页 |
·NA样品的荧光标记与定量 | 第51页 |
·凝集素芯片的封闭 | 第51页 |
·凝集素芯片与样本的孵育 | 第51页 |
·结果扫描与数据分析 | 第51-52页 |
·实验结果 | 第52-57页 |
·Cy3荧光标记后NA蛋白浓度 | 第52页 |
·芯片扫描结果 | 第52-53页 |
·中值归一化分析 | 第53-55页 |
·聚类分析结果 | 第55-56页 |
·Ratio值及显著性分析 | 第56页 |
·NA糖链类型与病毒亚型、源性及致病性关联性分析 | 第56-57页 |
·本章小结 | 第57-58页 |
第四章 基于质谱技术对流感病毒神经氨酸酶糖链结构的研究 | 第58-70页 |
·引言 | 第58-61页 |
·实验材料与仪器 | 第61页 |
·试剂与材料 | 第61页 |
·主要实验仪器 | 第61页 |
·实验方法 | 第61-63页 |
·NA蛋白clean-up处理 | 第61-62页 |
·滤膜辅助法分离血清全糖蛋白N-连接糖链 | 第62页 |
·糖链clean-up处理 | 第62页 |
·MALDI-TOF/TOF-MS解析糖链 | 第62-63页 |
·糖链质谱结构分析 | 第63页 |
·实验结果与分析 | 第63-69页 |
·神经氨酸酶N-连接糖链MALDI-TOF-MS一级图谱 | 第63-64页 |
·神经氨酸酶N-连接糖链结构的串联质谱解析 | 第64-66页 |
·神经氨酸酶糖链结构图谱的绘制 | 第66-69页 |
·讨论与小结 | 第69-70页 |
全文总结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第80-82页 |
致谢 | 第82页 |