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禽流感病毒神经氨酸酶的分离纯化及其糖链谱研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-8页
缩略词第8-12页
第一章 文献综述第12-26页
   ·流感病毒概述第12-17页
     ·流感病毒遗传特性及分子结构第13-16页
     ·流感病毒感染机理第16-17页
     ·禽流感病毒致病性研究进展第17页
   ·流感病毒神经氨酸酶的研究现状第17-20页
     ·神经氨酸酶概述第17-18页
     ·神经氨酸酶各部分功能第18-19页
     ·神经氨酸酶糖基化研究进展第19-20页
   ·糖蛋白糖链相关研究现状第20-24页
     ·糖蛋白概述第20-21页
       ·糖蛋白糖链的解析技术第21-24页
   ·本课题研究的目的及意义第24-26页
第二章 基于4-氨基苯草氨酸功能化磁粒分离纯化禽流感病毒神经氨酸酶第26-42页
   ·引言第26-27页
   ·实验仪器及材料第27-29页
     ·主要试剂与材料第27-28页
     ·主要实验仪器第28-29页
     ·主要溶液配制第29页
   ·实验方法第29-35页
     ·对氨基苯草氨酸功能化磁性微粒的制备第29-31页
     ·功能化磁粒分离纯化NA方法的建立第31-33页
     ·提取NA样品的SDS-PAGE鉴定第33-34页
     ·纯化NA的MALDI-TOF-MS一级质谱鉴定第34页
     ·8种禽流感病毒NA的分离纯化及定量第34-35页
   ·实验结果与分析第35-39页
     ·磁粒用量的确定第35页
     ·结合时间的选择第35-36页
     ·洗脱时间的选择第36-37页
     ·方法特异性验证第37页
     ·提取NA样品的鉴定结果第37-39页
     ·8种病毒样本洗脱NA浓度测定第39页
   ·本章小结第39-42页
第三章 基于凝集素芯片技术对流感病毒神经氨酸酶糖链谱的研究第42-58页
   ·引言第42-44页
   ·实验材料与仪器第44-46页
     ·实验试剂与材料第44-45页
     ·主要实验仪器第45页
     ·主要溶液配置第45-46页
   ·实验方法第46-52页
     ·环氧化片基的制备第46页
     ·凝集素芯片的设计与点制第46-51页
     ·NA样品的荧光标记与定量第51页
     ·凝集素芯片的封闭第51页
     ·凝集素芯片与样本的孵育第51页
     ·结果扫描与数据分析第51-52页
   ·实验结果第52-57页
     ·Cy3荧光标记后NA蛋白浓度第52页
     ·芯片扫描结果第52-53页
     ·中值归一化分析第53-55页
     ·聚类分析结果第55-56页
     ·Ratio值及显著性分析第56页
     ·NA糖链类型与病毒亚型、源性及致病性关联性分析第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第四章 基于质谱技术对流感病毒神经氨酸酶糖链结构的研究第58-70页
   ·引言第58-61页
   ·实验材料与仪器第61页
     ·试剂与材料第61页
     ·主要实验仪器第61页
   ·实验方法第61-63页
     ·NA蛋白clean-up处理第61-62页
     ·滤膜辅助法分离血清全糖蛋白N-连接糖链第62页
     ·糖链clean-up处理第62页
     ·MALDI-TOF/TOF-MS解析糖链第62-63页
     ·糖链质谱结构分析第63页
   ·实验结果与分析第63-69页
     ·神经氨酸酶N-连接糖链MALDI-TOF-MS一级图谱第63-64页
     ·神经氨酸酶N-连接糖链结构的串联质谱解析第64-66页
     ·神经氨酸酶糖链结构图谱的绘制第66-69页
   ·讨论与小结第69-70页
全文总结第70-72页
参考文献第72-80页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第80-82页
致谢第82页

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