摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-14页 |
符号与缩略语 | 第14-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一篇 文献综述 | 第17-57页 |
第一章 猪圆环病毒2型(PCV2)研究概况 | 第17-35页 |
1. PCV2的生物学特性 | 第17页 |
2. PCV2的易感动物 | 第17-18页 |
3. PCV2的流行病学 | 第18页 |
4. PCV2的传播途径 | 第18-19页 |
5. PCV2感染的血清学动态变化 | 第19页 |
6. PCV2感染的临床表现及猪圆环病毒病 | 第19-21页 |
7. 影响猪圆环病毒病发生的因素 | 第21-23页 |
8. 猪圆环病毒病的诊断 | 第23页 |
9. 猪圆环病毒病的预防与控制 | 第23-25页 |
参考文献 | 第25-35页 |
第二章 硒与硒蛋白及其对病毒感染的影响 | 第35-57页 |
1. 硒的理化性质与自然分布 | 第35-36页 |
2. 硒在动物体内的分布及代谢 | 第36-39页 |
3. 硒的抗氧化作用 | 第39-40页 |
4. 硒蛋白与活性氧自由基 | 第40-42页 |
5. 硒抗病毒研究 | 第42-45页 |
6. 硒对机体免疫的作用 | 第45-48页 |
参考文献 | 第48-57页 |
第二篇 试验研究 | 第57-145页 |
第三章 PCV2的感染和复制与宿主细胞氧化还原状态之间的相互作用研究 | 第57-69页 |
摘要 | 第57-58页 |
1. 材料与方法 | 第58-60页 |
·细胞培养与病毒传代 | 第58页 |
·试剂材料 | 第58页 |
·还原型谷胱甘肽GSH、超氧化物歧化酶SOD、丙二醛MDA的测定 | 第58-59页 |
·实时荧光定量PCR测定猪圆环病毒2型DNA拷贝数 | 第59页 |
·细胞免疫荧光检测PCV2感染阳性细胞 | 第59页 |
·统计分析 | 第59-60页 |
2. 试验结果 | 第60-65页 |
·PCV2感染对宿主细胞氧化还原状态的影响 | 第60-62页 |
·升高细胞内GSH浓度对PCV2复制的影响 | 第62-63页 |
·降低细胞内GSH浓度对PCV2复制的影响 | 第63-65页 |
3. 讨论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-69页 |
第四章 活性氧(ROS)通过NF-κB信号途径调节猪圆环病毒2型(PCV2)的复制 | 第69-91页 |
摘要 | 第69-70页 |
1. 材料与方法 | 第70-73页 |
·试验试剂 | 第70页 |
·细胞培养与病毒传代 | 第70-71页 |
·实时荧光定量PCR测定猪圆环病毒2型DNA拷贝数 | 第71页 |
·细胞免疫荧光检测PCV2感染阳性细胞 | 第71-72页 |
·活性氧检测试剂盒测定ROS水平 | 第72页 |
·报告基因质粒检测NF-κB转录活性水平 | 第72页 |
·统计分析 | 第72-73页 |
2. 试验结果 | 第73-85页 |
·PCV2感染导致PK15细胞内ROS水平上升 | 第73-74页 |
·NAC诱导的ROS降低抑制了PCV2的复制 | 第74-77页 |
·BSO诱导的ROS升高促进了PCV2的复制 | 第77-80页 |
·ROS和PCV2感染对细胞NF-κB信号通路的影响 | 第80-83页 |
·抑制NF-κB信号通路影响BSO对PCV2复制的促进作用 | 第83-85页 |
3. 讨论 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-91页 |
第五章 硒通过提高GPX1的表达阻断氧化应激对PCV2复制的促进作用 | 第91-115页 |
摘要 | 第91-92页 |
1. 材料与方法 | 第92-96页 |
·细胞培养与病毒传代 | 第92页 |
·MTT法测定细胞毒性 | 第92页 |
·细胞内还原型谷胱甘肽GSH的测定 | 第92-93页 |
·活性氧检测试剂盒测定ROS水平 | 第93页 |
·实时荧光定量PCR测定猪圆环病毒2型DNA拷贝数 | 第93-94页 |
·细胞免疫荧光检测PCV2阳性感染细胞 | 第94页 |
·荧光定量PCR测定硒蛋白mRNA水平 | 第94-95页 |
·GPX1活性测定 | 第95页 |
·RNA干扰 | 第95-96页 |
·统计分析 | 第96页 |
2. 试验结果 | 第96-108页 |
·不同浓度的亚硒酸钠、硒蛋氨酸和过氧化氢对PK15细胞的毒性作用 | 第96-97页 |
·过氧化氢诱导的氧化应激可促进PCV2的复制 | 第97-99页 |
·硒蛋氨酸阻断氧化应激对PCV2复制的促进作用 | 第99-100页 |
·硒蛋氨酸对硒蛋白表达和抗氧化能力的影响 | 第100-102页 |
·PCV2感染对硒蛋白的影响 | 第102-103页 |
·GPX1干扰后对PK15细胞GPX1和氧化应激的影响 | 第103-105页 |
·GPX1干扰后对硒蛋氨酸阻断氧化应激促进PCV2复制的影响 | 第105-106页 |
·GPX1干扰后加硒蛋氨酸对硒蛋白表达和抗氧化能力的影响 | 第106-108页 |
3. 讨论 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-115页 |
第六章 日粮中添加硒对PCV2感染阳性猪场断奶仔猪生长、抗氧化性能及PCV2感染的影响 | 第115-135页 |
摘要 | 第115-116页 |
1. 材料与方法 | 第116-121页 |
·硒源 | 第116页 |
·试验动物及其处理 | 第116页 |
·饲养管理 | 第116-117页 |
·样品采集 | 第117-118页 |
·基础日粮的硒含量 | 第118页 |
·仔猪生长性能指标测定 | 第118页 |
·血液中GPX活性及硒蛋白酶GPx1、GPx4和TR1 mRNA水平的测定 | 第118-119页 |
·仔猪抗氧化性能指标SOD及MDA的测定 | 第119-120页 |
·PCV2的检测 | 第120-121页 |
·数据处理 | 第121页 |
2. 试验结果 | 第121-130页 |
·基础日粮硒含量 | 第121-122页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪生长性能的影响 | 第122-124页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪抗氧化性能的影响 | 第124-125页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪全血中GPX活性的影响 | 第125-126页 |
·日粮中添加硒对仔猪全血中GPx1 mRNA水平的影响 | 第126-127页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪全血中GPx4 mRNA水平的影响 | 第127-128页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪全血中TR1 mRNA水平的影响 | 第128-129页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪血液中病毒DNA拷贝数的影响 | 第129-130页 |
3. 讨论 | 第130-131页 |
参考文献 | 第131-135页 |
第七章 日粮中添加硒对PCV2感染阳性猪场断奶仔猪免疫机能的影响 | 第135-145页 |
摘要 | 第135-136页 |
1. 材料与方法 | 第136-138页 |
·硒源 | 第136页 |
·试验动物及其处理 | 第136页 |
·饲养管理 | 第136-137页 |
·采样 | 第137-138页 |
·血清细胞因子IL-2和TNF-α含量的测定 | 第138页 |
·MTT法测定植物凝集素ConA非特异性刺激T淋巴细胞增殖 | 第138页 |
·数据处理 | 第138页 |
2. 试验结果 | 第138-141页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪血清细胞因子IL-2含量的影响 | 第138-139页 |
·日粮中添加硒对断奶仔猪血清细胞因子TNF-α含量的影响 | 第139-140页 |
·日粮中添加硒对PCV2感染仔猪外周血液淋巴细胞增殖的影响 | 第140-141页 |
3. 讨论 | 第141-142页 |
参考文献 | 第142-145页 |
全文结论 | 第145-147页 |
本文创新点 | 第147-149页 |
致谢 | 第149-151页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第151页 |