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猪伪狂犬病毒gB基因主要抗原区的原核表达及其单克隆抗体的制备

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
符号说明第10-12页
第1章 绪论第12-21页
   ·伪狂犬病的研究进展第12-13页
     ·伪狂犬病的流行病学研究第12-13页
     ·猪伪狂犬病临床症状第13页
     ·猪伪狂犬病的防治现状第13页
   ·猪伪狂犬病的检测方法第13-16页
     ·病毒的分离鉴定第13-14页
     ·动物接种试验第14页
     ·免疫学诊断方法第14-15页
     ·分子生物学诊断方法第15-16页
   ·猪伪狂犬病毒的研究现状第16-18页
     ·猪伪狂犬病毒的结构第16页
     ·猪伪狂犬病毒的理化特性第16-17页
     ·猪伪狂犬病毒的主要糖蛋白第17-18页
   ·单克隆抗体的研究进展第18-20页
     ·单克隆抗体技术第18-19页
     ·单克隆抗体的特点第19页
     ·单克隆抗体的应用第19-20页
   ·研究目的及意义第20-21页
第2章 猪伪狂犬病毒gB蛋白抗原表位区的克隆、表达及纯化第21-40页
   ·材料与仪器第21-22页
     ·菌株、载体和病毒株第21页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·试验方法第22-30页
     ·猪伪狂犬病毒的培养第22-23页
     ·目的基因的获得及扩增第23-25页
     ·重组克隆载体的构建第25-27页
     ·重组表达载体的构建第27-28页
     ·表达产物的鉴定第28-29页
     ·重组gB蛋白的诱导表达第29-30页
     ·重组gB蛋白的纯化第30页
   ·试验结果与分析第30-38页
     ·PRV 在鸡胚成纤维细胞的增殖第30-31页
     ·增殖病毒的鉴定第31页
     ·PRV gB 蛋白目的片段的扩增第31-32页
     ·目的片段的测定与分析第32-33页
     ·重组表达载体 pET-gB 的构建第33-34页
     ·表达蛋白的鉴定第34-36页
     ·表达蛋白诱导条件的确定第36-37页
     ·表达蛋白的纯化第37-38页
   ·本章小结第38-40页
第3章 猪伪狂犬病毒单克隆抗体的制备第40-49页
   ·材料与仪器第40-41页
     ·毒株、细胞与实验动物第40页
     ·主要试剂与药品第40页
     ·主要仪器与设备第40-41页
   ·病毒的纯化第41页
   ·动物免疫第41页
   ·间接ELISA方法的建立第41-42页
   ·SP2/0细胞的制备第42-43页
   ·饲养层细胞的制备第43页
   ·脾淋巴细胞的制备第43页
   ·细胞融合第43-44页
   ·阳性杂交瘤细胞的筛选第44页
   ·阳性杂交瘤细胞的克隆第44页
   ·杂交瘤细胞的冻存和复苏第44-45页
   ·试验结果与分析第45-47页
     ·间接ELISA最佳工作条件的确定第45-46页
     ·单克隆抗体的筛选第46-47页
   ·本章小结第47-49页
第4章 猪伪狂犬病毒重组gB蛋白单克隆抗体的活性分析第49-58页
   ·材料与仪器第49-50页
     ·细胞与动物第49页
     ·主要试剂与药品第49页
     ·主要仪器与设备第49-50页
   ·单克隆抗体亚型的鉴定第50页
   ·杂交瘤细胞染色体的计数分析第50-51页
   ·单克隆抗体特异性的鉴定第51页
   ·单克隆抗体稳定性的检测第51页
   ·单克隆抗体腹水的制备第51页
   ·腹水效价的测定第51-52页
   ·PRV 在 PK-15 的扩增第52页
   ·猪伪狂犬病毒的鉴定第52页
     ·猪伪狂犬病毒 DNA 的提取第52页
     ·猪伪狂犬病毒的 PCR 鉴定第52页
   ·间接免疫荧光试验第52页
   ·试验结果与分析第52-57页
     ·单克隆抗体的亚型鉴定第52-53页
     ·杂交瘤细胞染色体的计数分析第53页
     ·单克隆抗体特异性的鉴定第53-54页
     ·单克隆抗体稳定性的检测第54-55页
     ·单克隆抗体腹水效价的测定第55页
     ·PRV 在 PK-15 的扩增第55-56页
     ·猪伪狂犬病毒的鉴定第56页
     ·间接免疫荧光试验第56-57页
   ·本章小结第57-58页
第5章 结论第58-59页
   ·PRVgB蛋白主要抗原表位的表达第58页
   ·猪伪狂犬病毒单克隆抗体的制备第58-59页
参考文献第59-68页
攻读硕士学位期间的学术成果第68-69页
致谢第69页

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