| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-13页 |
| ·肺癌的现状 | 第10页 |
| ·microRNA简介 | 第10-12页 |
| ·microRNA的发现与命名 | 第10页 |
| ·microRNA的生物合成和功能 | 第10-12页 |
| ·microRNA与肺癌发生、发展 | 第12-13页 |
| ·癌基因或抑癌基因机制 | 第12页 |
| ·靶分子识别机制 | 第12页 |
| ·含有miRNA染色体片段缺失或突变 | 第12-13页 |
| ·microRNA在肺癌诊断中的应用 | 第13页 |
| ·microRNA 205简介 | 第13页 |
| 第二章 肺癌组织标本收集 | 第13-20页 |
| ·材料与设备 | 第15页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·主要设备 | 第15页 |
| ·方法 | 第15页 |
| ·结果 | 第15-19页 |
| ·小结 | 第19-20页 |
| 第三章 肺癌组织中microRNA的差异性表达 | 第20-29页 |
| ·材料与设备 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| ·提取total RNA | 第21-22页 |
| ·RT-PCR反应 | 第22-24页 |
| ·结果与讨论 | 第24-27页 |
| ·第21号样本在DNA酶消化前后电泳检测图 | 第24页 |
| ·miRNAs和U6熔解曲线图 | 第24-26页 |
| ·肿瘤组织与癌旁组织的miRNA的倍数关系图 | 第26-27页 |
| ·小结 | 第27-29页 |
| 第四章 microRNA-205的启动子甲基化分析 | 第29-49页 |
| ·材料与设备 | 第29-32页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·主要试剂和细胞株 | 第29-30页 |
| ·常用试剂的配制 | 第30-32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-39页 |
| ·miRNA-205启动子区域的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·培养细胞株 | 第33页 |
| ·提取细胞系DNA | 第33-35页 |
| ·重亚硫酸盐处理DNA | 第35-37页 |
| ·人肺鳞癌株HTB-182、人肺腺癌株A549 miRNA-205启动子区域扩增 | 第37页 |
| ·PCR产物清洁回收(AxyPrep PCR清洁试剂盒) | 第37页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第37-39页 |
| ·测序 | 第39页 |
| ·数据收集和分析 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-49页 |
| ·miRNA-205启动子区域的生物信息学结果 | 第39-45页 |
| ·人肺腺癌株A549、人肺鳞癌株HTB-182 miRNA-205启动子区域扩增 | 第45-46页 |
| ·菌落PCR产物的克隆 | 第46-47页 |
| ·人肺腺癌株A549、人肺鳞癌株HTB-182测序结果分析 | 第47-49页 |
| ·小结 | 第49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录 | 第53-62页 |
| 英文缩略词索引 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
