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卵巢癌不同淋巴结转移潜能细胞分泌蛋白差异分析及淋巴管微环境诱导其上皮间质转化的研究

目录第1-7页
英文缩略词表第7-9页
摘要第9-13页
ABSTRACT第13-18页
第一章 卵巢癌不同淋巴结转移潜能细胞分泌蛋白差异分析第18-65页
 第一部分 双向凝胶电泳技术筛选鉴定卵巢癌不同淋巴结转移潜能细胞分泌蛋白差异第19-37页
  1 主要材料与器材第19-25页
   ·细胞株第19页
   ·主要的材料和试剂第19-21页
   ·实验主要设备仪器第21-22页
   ·主要试剂的配制第22-25页
  2 实验方法第25-31页
   ·细胞培养的方法第25-26页
   ·分泌蛋白的收集及定量第26-27页
   ·蛋白质双向电泳第27-28页
   ·蛋白质银染第28页
   ·凝胶扫描图像分析第28-29页
   ·MS+MS/MS质谱鉴定第29页
   ·蛋白质印迹法第29-30页
   ·结果判定标准以及数据分析第30-31页
   ·统计学方法第31页
  3 结果第31-34页
   ·二维凝胶电泳第31-32页
   ·质谱分析和蛋白质鉴定结果第32页
   ·蛋白质印迹法检测(WB)第32-34页
  4 讨论第34-37页
 第二部分 iTRAQ技术分析鉴定淋巴管内皮细胞对卵巢癌细胞分泌蛋白的影响第37-60页
  1 主要材料与器材第37-39页
   ·细胞株第37页
   ·主要的材料和试剂第37页
   ·实验主要设备仪器第37-38页
   ·主要试剂的配制第38-39页
  2 实验方法第39-43页
   ·细胞培养的方法第39页
   ·分泌蛋白的酶解第39-40页
   ·分泌蛋白酶解肽段iTRAQ标记第40页
   ·一维液相色谱分离(SCX)第40-41页
   ·第二相反相色谱分离(RPLC)第41-42页
   ·质谱检测标记样品第42页
   ·蛋白表达的差异分析第42页
   ·差异蛋白生物信息学分析第42-43页
  3 结果第43-53页
   ·分泌蛋白酶解结果第43-44页
   ·分泌蛋白标记结果第44-45页
   ·分泌蛋白SCX分离结果第45-46页
   ·分泌蛋白RPLC分离结果第46页
   ·差异蛋白质谱鉴定结果第46-48页
   ·差异蛋白聚类分析结果第48-49页
   ·差异蛋白网络互作分析结果第49-51页
   ·节点蛋白与卵巢癌淋巴结转移的关系第51-53页
  4 讨论第53-60页
 参考文献第60-65页
第二章 淋巴管内皮细胞微环境对卵巢癌细胞上皮-间质转化的影响第65-80页
 1 主要材料与器材第66-67页
   ·细胞株第66页
   ·主要的材料和试剂第66-67页
   ·实验主要设备仪器第67页
 2 实验方法第67-69页
   ·细胞培养的方法第67页
   ·条件培养体系的建立第67-68页
   ·共培养体系的建立第68页
   ·免疫组化检测细胞E-cadherin、TGF-β1、vimentin的表达第68页
   ·统计学方法第68-69页
 3 结果第69-73页
   ·卵巢癌SKOV3细胞上皮间质化改变特征第69-71页
   ·卵巢癌淋巴结定向高转移细胞SKOV3-PM4细胞上皮-间质转化的特征第71-73页
 4 讨论第73-77页
 参考文献第77-80页
第三章 淋巴微环境对肿瘤淋巴转移的影响研究进展第80-107页
 1 分泌蛋白、微环境和淋巴转移第80-91页
   ·肿瘤微环境的定义和功能第80-84页
   ·分泌蛋白的定义、功能和提取方法第84-90页
   ·肿瘤微环境中的分泌蛋白第90-91页
 2 肿瘤微环境对肿瘤淋巴转移的影响第91-99页
   ·肿瘤微环境与淋巴转移第91-93页
   ·微环境中差异蛋白的分析及意义第93-97页
   ·肿瘤的预防、治疗中存在的问题第97-99页
 参考文献第99-107页
全文小结第107-108页
攻读学位期间参与的课题及发表的论文第108-109页
致谢第109-110页

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