目录 | 第1-7页 |
英文缩略词表 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-13页 |
ABSTRACT | 第13-18页 |
第一章 卵巢癌不同淋巴结转移潜能细胞分泌蛋白差异分析 | 第18-65页 |
第一部分 双向凝胶电泳技术筛选鉴定卵巢癌不同淋巴结转移潜能细胞分泌蛋白差异 | 第19-37页 |
1 主要材料与器材 | 第19-25页 |
·细胞株 | 第19页 |
·主要的材料和试剂 | 第19-21页 |
·实验主要设备仪器 | 第21-22页 |
·主要试剂的配制 | 第22-25页 |
2 实验方法 | 第25-31页 |
·细胞培养的方法 | 第25-26页 |
·分泌蛋白的收集及定量 | 第26-27页 |
·蛋白质双向电泳 | 第27-28页 |
·蛋白质银染 | 第28页 |
·凝胶扫描图像分析 | 第28-29页 |
·MS+MS/MS质谱鉴定 | 第29页 |
·蛋白质印迹法 | 第29-30页 |
·结果判定标准以及数据分析 | 第30-31页 |
·统计学方法 | 第31页 |
3 结果 | 第31-34页 |
·二维凝胶电泳 | 第31-32页 |
·质谱分析和蛋白质鉴定结果 | 第32页 |
·蛋白质印迹法检测(WB) | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
第二部分 iTRAQ技术分析鉴定淋巴管内皮细胞对卵巢癌细胞分泌蛋白的影响 | 第37-60页 |
1 主要材料与器材 | 第37-39页 |
·细胞株 | 第37页 |
·主要的材料和试剂 | 第37页 |
·实验主要设备仪器 | 第37-38页 |
·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
2 实验方法 | 第39-43页 |
·细胞培养的方法 | 第39页 |
·分泌蛋白的酶解 | 第39-40页 |
·分泌蛋白酶解肽段iTRAQ标记 | 第40页 |
·一维液相色谱分离(SCX) | 第40-41页 |
·第二相反相色谱分离(RPLC) | 第41-42页 |
·质谱检测标记样品 | 第42页 |
·蛋白表达的差异分析 | 第42页 |
·差异蛋白生物信息学分析 | 第42-43页 |
3 结果 | 第43-53页 |
·分泌蛋白酶解结果 | 第43-44页 |
·分泌蛋白标记结果 | 第44-45页 |
·分泌蛋白SCX分离结果 | 第45-46页 |
·分泌蛋白RPLC分离结果 | 第46页 |
·差异蛋白质谱鉴定结果 | 第46-48页 |
·差异蛋白聚类分析结果 | 第48-49页 |
·差异蛋白网络互作分析结果 | 第49-51页 |
·节点蛋白与卵巢癌淋巴结转移的关系 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
第二章 淋巴管内皮细胞微环境对卵巢癌细胞上皮-间质转化的影响 | 第65-80页 |
1 主要材料与器材 | 第66-67页 |
·细胞株 | 第66页 |
·主要的材料和试剂 | 第66-67页 |
·实验主要设备仪器 | 第67页 |
2 实验方法 | 第67-69页 |
·细胞培养的方法 | 第67页 |
·条件培养体系的建立 | 第67-68页 |
·共培养体系的建立 | 第68页 |
·免疫组化检测细胞E-cadherin、TGF-β1、vimentin的表达 | 第68页 |
·统计学方法 | 第68-69页 |
3 结果 | 第69-73页 |
·卵巢癌SKOV3细胞上皮间质化改变特征 | 第69-71页 |
·卵巢癌淋巴结定向高转移细胞SKOV3-PM4细胞上皮-间质转化的特征 | 第71-73页 |
4 讨论 | 第73-77页 |
参考文献 | 第77-80页 |
第三章 淋巴微环境对肿瘤淋巴转移的影响研究进展 | 第80-107页 |
1 分泌蛋白、微环境和淋巴转移 | 第80-91页 |
·肿瘤微环境的定义和功能 | 第80-84页 |
·分泌蛋白的定义、功能和提取方法 | 第84-90页 |
·肿瘤微环境中的分泌蛋白 | 第90-91页 |
2 肿瘤微环境对肿瘤淋巴转移的影响 | 第91-99页 |
·肿瘤微环境与淋巴转移 | 第91-93页 |
·微环境中差异蛋白的分析及意义 | 第93-97页 |
·肿瘤的预防、治疗中存在的问题 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-107页 |
全文小结 | 第107-108页 |
攻读学位期间参与的课题及发表的论文 | 第108-109页 |
致谢 | 第109-110页 |