| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 癌症靶向基因病毒治疗概述及氯化锂的研究 | 第10-19页 |
| ·引言 | 第10-14页 |
| ·癌症的现状 | 第10页 |
| ·溶瘤腺病毒概述 | 第10-12页 |
| ·溶瘤腺病毒载体的目前常用构建策略 | 第12-13页 |
| ·癌症的靶向基因-病毒治疗研究 | 第13-14页 |
| ·本实验基因-病毒治疗的特点 | 第14-17页 |
| ·survivin 与癌症靶向 | 第14-15页 |
| ·TRAIL 基因在癌症治疗领域的应用 | 第15-16页 |
| ·Flag 标签系统 | 第16-17页 |
| ·氯化锂的研究机制进展 | 第17-19页 |
| ·本课题的研究目的和意义 | 第19页 |
| 第二章 LiCl 能在溶瘤腺病毒载体中增强 TRAIL 的抗癌作用的研究 | 第19-43页 |
| ·实验材料 | 第19-23页 |
| ·病毒 | 第19页 |
| ·工具酶及试剂 | 第19-20页 |
| ·主要溶液的配制 | 第20-21页 |
| ·细胞株 | 第21-22页 |
| ·实验抗体与引物 | 第22页 |
| ·实验使用仪器 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·病毒的鉴定 | 第23-25页 |
| ·病毒的扩增 | 第25页 |
| ·病毒的小量扩增 | 第25页 |
| ·病毒的大量扩增 | 第25页 |
| ·CsCl 梯度离心纯化病毒 | 第25-26页 |
| ·重组病毒的滴度测定 | 第26-28页 |
| ·重组病毒联合 LiCl 在体外杀伤效果的检测 | 第28-34页 |
| ·细胞培养 | 第28页 |
| ·MTT 检测病毒联合 LiCl 作用对不同细胞系的体外增殖抑制率 | 第28页 |
| ·细胞形态学观察 | 第28-29页 |
| ·Hochest33342 染色观察肿瘤细胞的凋亡 | 第29页 |
| ·结晶紫染色进行细胞毒性的检测 | 第29页 |
| ·Western Blot 实验检测细胞内目的蛋白的表达水平 | 第29-34页 |
| ·Western Blot 检测 Caspase 3, PARP 的剪接 | 第34页 |
| ·实验结果 | 第34-43页 |
| ·靶向基因-病毒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·MTT 法检测联合用药对不同细胞的生长抑制作用 | 第35-37页 |
| ·光学显微镜下观察细胞形态的改变 | 第37-38页 |
| ·Hoechst33342 染色检测到细胞发生凋亡 | 第38-39页 |
| ·结晶紫实验观察病毒联合 LiCl 对细胞的影响 | 第39-41页 |
| ·Western Blot 实验检测癌症细胞内 TRAIL 的表达水平 | 第41-42页 |
| ·Western Blot 检测重组病毒与 LiCl 联合上调 caspase 途径 | 第42-43页 |
| 第三章 LiC1 能在动物体中增强 TRAIL 的抗癌作用的研究 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·肝癌细胞株 7721 的荷瘤裸鼠模型的建立实验及瘤内注射重组腺病毒实验 | 第43页 |
| ·肿瘤抑制曲线和荷瘤裸鼠生存率曲线的绘制 | 第43-44页 |
| ·加药后肿瘤组织的免疫病理学检测 | 第44页 |
| ·加药后肿瘤组织的透射电镜形态学检测 | 第44-45页 |
| ·实验结果 | 第45页 |
| ·肿瘤抑制曲线和荷瘤裸鼠生存率曲线的绘制 | 第45页 |
| ·给药肿瘤组织的免疫病理学检测和肿瘤组织的形态学检测 | 第45页 |
| 4.结论 | 第45-46页 |
| 5.讨论与展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
