| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-23页 |
| ·禽流感病毒的概述 | 第13页 |
| ·禽流感病毒的病原学特征 | 第13-15页 |
| ·形态结构 | 第13页 |
| ·禽流感病毒的蛋白质 | 第13-14页 |
| ·禽流感病毒的理化特性 | 第14-15页 |
| ·禽流感病毒的培养特性 | 第15页 |
| ·禽流感病毒的生物学特性 | 第15-16页 |
| ·病毒的复制与成熟 | 第15页 |
| ·病毒的毒力差异 | 第15-16页 |
| ·禽流感病毒的变异 | 第16页 |
| ·禽流感的流行情况 | 第16-19页 |
| ·禽流感在宿主中的存在及传播方式 | 第16-17页 |
| ·高致病性禽流感的发生情况 | 第17-18页 |
| ·H9N2 禽流感病毒的流行情况 | 第18页 |
| ·禽流感未来的流行趋势 | 第18-19页 |
| ·H9N2 亚型禽流感防治的公共卫生学意义 | 第19-20页 |
| ·禽流感诊断方法的研究进展 | 第20-22页 |
| ·禽流感病毒的分离与鉴定 | 第20页 |
| ·血清学鉴定 | 第20-21页 |
| ·电镜技术 | 第21页 |
| ·免疫荧光技术 | 第21页 |
| ·分子生物学诊断技术 | 第21页 |
| ·胶体金技术 | 第21-22页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第22页 |
| ·研究目的与意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·病毒、血清、细胞和质粒 | 第23-24页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·所用培养基及试剂 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·方法 | 第25-33页 |
| ·pCDNA-NP、PBD-HA 和 PBD-NA 重组质粒的构建 | 第25页 |
| ·pCDNA-NP、PBD-HA 和 PBD-NA 重组质粒的抽提 | 第25-26页 |
| ·抗原的制备 | 第26页 |
| ·ELISA 最佳抗原包被浓度的确定 | 第26页 |
| ·小鼠免疫 | 第26-27页 |
| ·小鼠骨髓瘤细胞的制备 | 第27页 |
| ·小鼠饲养细胞的制备 | 第27页 |
| ·小鼠免疫脾细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·细胞融合 | 第28-29页 |
| ·间接 ELISA 检测方法的建立 | 第29页 |
| ·杂交瘤细胞的抗体检测 | 第29页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆筛选 | 第29-30页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第30页 |
| ·小鼠腹水的制备 | 第30-31页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第31页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性鉴定 | 第31页 |
| ·H9N2 AIV 8 个片段重组质粒的去内毒素提取 | 第31页 |
| ·H9N2 AIV 8 个片段重组质粒的转染 | 第31-32页 |
| ·单克隆抗体的间接免疫荧光试验 | 第32页 |
| ·Western-Blot 鉴定 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-46页 |
| ·pCDNA-NP、PBD-HA 和 PBD-NA 重组质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·小鼠免疫的抗体效价 | 第34-35页 |
| ·抗原最佳包被浓度的确定 | 第35页 |
| ·单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第35-37页 |
| ·杂交瘤细胞株的亚克隆检测 | 第37-38页 |
| ·杂交瘤细胞上清和腹水效价的测定结果 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体的特异性鉴定 | 第39页 |
| ·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性检测 | 第39页 |
| ·与 H9N2 AIV 反应的单克隆抗体间接免疫荧光检测 | 第39-41页 |
| ·与重组质粒反应的单克隆抗体间接免疫荧光检测 | 第41-45页 |
| ·单克隆抗体的 Western-Blot 鉴定 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-51页 |
| ·NP 核蛋白单克隆抗体研制的重要意义 | 第46页 |
| ·抗原的纯化方式、免疫程序及剂量的确定依据 | 第46-47页 |
| ·DNA 免疫方式的特点 | 第47页 |
| ·DNA 免疫的机制与可行性 | 第47-48页 |
| ·单抗检测及鉴定方法的选择 | 第48-49页 |
| ·细胞污染及试剂使用对单抗制备的影响 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第58页 |
