DNA免疫制备猪传染性胃肠炎病毒S基因单克隆抗体和特性分析
| 摘要 | 第1-17页 |
| Abstract | 第17-21页 |
| 1 前言 | 第21-51页 |
| ·猪传染性胃肠炎（TGE） | 第21-23页 |
| ·流行病学 | 第21-22页 |
| ·临床症状 | 第22-23页 |
| ·TGEV 的病原学特性与生物学研究进展 | 第23-35页 |
| ·TGEV 形态学特性 | 第23-24页 |
| ·TGEV 组织嗜性和变异性 | 第24-27页 |
| ·TGEV 基因组结构 | 第27-28页 |
| ·TGEV 蛋白结构与功能分析 | 第28-35页 |
| ·TGEV 的疫苗研究 | 第35-36页 |
| ·TGEV 的诊断及其研究进展 | 第36-46页 |
| ·病毒分离与鉴定 | 第37-38页 |
| ·病毒抗原血清学检测 | 第38-39页 |
| ·酶联免疫吸附实验 | 第39-40页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第40-46页 |
| ·TGEV 单克隆抗体研究进展 | 第46-48页 |
| ·实验的目的和意义 | 第48-51页 |
| 2 材料与方法 | 第51-79页 |
| ·实验材料 | 第51-57页 |
| ·细胞株、病毒、载体及质粒 | 第51页 |
| ·实验动物 | 第51页 |
| ·主要工具酶、抗体及分子生物学试剂盒 | 第51-52页 |
| ·主要生化试剂 | 第52页 |
| ·主要试剂的配制和贮存 | 第52-56页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-79页 |
| ·PVAX-TGEV-S 质粒的大量提取 | 第57-61页 |
| ·实验动物的免疫 | 第61页 |
| ·筛选抗原的制备 | 第61-62页 |
| ·间接 ELISA 检测方法的建立 | 第62-64页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第64-70页 |
| ·单克隆抗体及杂交瘤细胞的特性分析 | 第70-75页 |
| ·间接竞争 ELISA 方法的初步应用 | 第75-78页 |
| ·数据统计 | 第78-79页 |
| 3 结果 | 第79-90页 |
| ·PVAX-TGEV-S 重组质粒的鉴定 | 第79页 |
| ·PVAX-TGEV-S 重组质粒的免疫效果检测 | 第79-80页 |
| ·筛选抗原选择与检测方法的建立 | 第80-82页 |
| ·TGEV 的繁殖与 TCID50 的测定 | 第80页 |
| ·ELISA 筛选方法的建立 | 第80-82页 |
| ·杂交瘤细胞系的建立及部分特性鉴定结果 | 第82-90页 |
| ·细胞的融合率 | 第82页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立和分泌抗体稳定性 | 第82页 |
| ·杂交瘤染色体计数结果 | 第82-83页 |
| ·单抗的特异性鉴定结果 | 第83-84页 |
| ·Western blot 分析 | 第84页 |
| ·单抗 Dot-ELISA 检测结果 | 第84-85页 |
| ·间接免疫荧光鉴定结果 | 第85页 |
| ·抗体亚类鉴定结果 | 第85-86页 |
| ·单抗中和活性鉴定 | 第86-87页 |
| ·单抗对膜内外抗原位点识别的初步鉴定 | 第87页 |
| ·ELISA 阴阳性判断标准确定结果 | 第87-88页 |
| ·特异性试验结果 | 第88页 |
| ·与传统的 RT-PCR 方法的比较试验 | 第88-89页 |
| ·重复性试验结果 | 第89-90页 |
| 4 讨论 | 第90-98页 |
| ·单抗免疫原和筛选抗原的选择 | 第90-93页 |
| ·单克隆抗体的融合、筛选和生物学鉴定 | 第93-96页 |
| ·间接竞争 ELISA 在临床应用中的作用 | 第96-98页 |
| 5 结论 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-117页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第117页 |
