| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-23页 |
| ·乙醇酸氧化酶的概述 | 第11-13页 |
| ·乙醇酸氧化酶的来源及分布 | 第11-12页 |
| ·乙醇酸氧化酶的结构 | 第12-13页 |
| ·乙醇酸氧化酶的作用及机理 | 第13-16页 |
| ·乙醇酸氧化酶的作用 | 第13-15页 |
| ·乙醇酸氧化酶的作用机理 | 第15-16页 |
| ·乙醇酸氧化酶基因的克隆及其表达调控 | 第16-18页 |
| ·乙醇酸氧化酶的酶学特征 | 第18-20页 |
| ·乙醇酸氧化酶的全酶、亚基分子量及亚基数目 | 第18页 |
| ·乙醇酸氧化酶的等电点 | 第18页 |
| ·乙醇酸氧化酶的转运 | 第18-19页 |
| ·乙醇酸氧化酶的同工酶理论 | 第19-20页 |
| ·乙醇酸氧化酶的活性测定 | 第20页 |
| ·植物乙醇酸氧化酶与逆境的关系 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| ·本研究的技术路线 | 第22-23页 |
| 第2章 材料与方法 | 第23-44页 |
| ·试验材料 | 第23-26页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株及载体 | 第23页 |
| ·酶、试剂盒及抗生素等 | 第23页 |
| ·试验中主要溶液配制 | 第23-25页 |
| ·主要试验仪器 | 第25-26页 |
| ·试验所需引物序列 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-44页 |
| ·植物材料的培养及 RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·拟南芥 GO1 基因的克隆 | 第27-33页 |
| ·利用 Gateway 技术进行植物表达载体的构建 | 第33-37页 |
| ·pGWB2-GO1 植物表达载体转化农杆菌 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥的遗传转化 | 第38-39页 |
| ·转基因拟南芥的筛选及纯合株系的鉴定 | 第39-40页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第40页 |
| ·转基因植株中 GO 活性测定及 Glyoxylate 含量测定 | 第40-41页 |
| ·转基因植株的抗逆性分析 | 第41-44页 |
| 第3章 结果与分析 | 第44-64页 |
| ·拟南芥的培养及总 RNA 的提取 | 第44页 |
| ·拟南芥 GO1 基因的克隆 | 第44-46页 |
| ·RT-PCR 扩增 GO1 基因 ORF 片段 | 第44-45页 |
| ·目的基因 GO1 阳性克隆的鉴定 | 第45-46页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第46-48页 |
| ·TOPO 中间载体的构建及阳性克隆的鉴定 | 第46-47页 |
| ·植物表达载体的构建及阳性克隆的鉴定 | 第47-48页 |
| ·植物表达载体 pGWB2-GO1 转化至农杆菌中 | 第48-49页 |
| ·阳性克隆菌落 PCR 鉴定 | 第48-49页 |
| ·阳性克隆的质粒 PCR 鉴定 | 第49页 |
| ·转基因拟南芥的筛选及纯合株系的鉴定 | 第49-51页 |
| ·转基因拟南芥 T0代的筛选 | 第49-50页 |
| ·转基因拟南芥纯合株系 T2代的鉴定 | 第50-51页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第51-52页 |
| ·转基因植株中 GO 酶活测定 | 第52页 |
| ·转基因植株中 Glyoxylate 含量测定 | 第52-53页 |
| ·转基因植株的抗逆性分析 | 第53-64页 |
| ·胁迫处理对转基因植株生长状况的影响 | 第53-59页 |
| ·胁迫处理对转基因植株抗氧化系统的影响 | 第59-64页 |
| 第4章 讨论 | 第64-67页 |
| ·植物表达载体的构建策略 | 第64页 |
| ·pGWB2 转基因品系对照组 | 第64页 |
| ·植物乙醇酸氧化酶与逆境的关系 | 第64-66页 |
| ·未来试验思路 | 第66-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第77页 |
