| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-17页 |
| ·引言 | 第7页 |
| ·亲和层析原理 | 第7-10页 |
| ·生物亲和层析 | 第8页 |
| ·金属离子亲和层析 | 第8-9页 |
| ·拟生物亲和层析 | 第9页 |
| ·免疫亲和层析 | 第9-10页 |
| ·抗体分离亲和层析 | 第10-12页 |
| ·特异抗原和二抗配基 | 第10页 |
| ·固定化金属亲和层析 | 第10-11页 |
| ·组氨酸配基 | 第11页 |
| ·亲硫和疏水性电荷诱导层析 | 第11页 |
| ·细菌蛋白类亲和配基 | 第11-12页 |
| ·蛋白 A 研究进展 | 第12-15页 |
| ·理化性质 | 第12页 |
| ·结构特征 | 第12-13页 |
| ·免疫学特性 | 第13-14页 |
| ·应用研究 | 第14-15页 |
| ·本论文立题意义及研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-26页 |
| ·材料与设备 | 第17-18页 |
| ·试剂 | 第17页 |
| ·酶和菌株 | 第17页 |
| ·实验仪器 | 第17-18页 |
| ·重组菌的构建 | 第18-22页 |
| ·引物设计 | 第18-19页 |
| ·重组质粒 pMD18-T-z1的构建 | 第19-20页 |
| ·重组质粒 pET-28a-z5的构建 | 第20-22页 |
| ·重组蛋白 A 表达与纯化 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白 A 的表达与验证 | 第22页 |
| ·重组蛋白 A 的分离纯化 | 第22-23页 |
| ·重组蛋白 A 亲和层析填料的制备 | 第23-24页 |
| ·烯丙基缩水甘油醚活化琼脂糖 4 FF | 第23页 |
| ·琼脂糖 4 FF 的 NHS 基团修饰 | 第23页 |
| ·琼脂糖基质偶联重组蛋白 A | 第23页 |
| ·活化和偶联效率的检测 | 第23-24页 |
| ·自制亲和层析填料的性能评价 | 第24-26页 |
| ·亲和对象 IgG 的处理 | 第24-25页 |
| ·洗脱 pH 考查 | 第25页 |
| ·上样量的确定 | 第25页 |
| ·上样流速的确定 | 第25页 |
| ·耐碱性能考查 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-50页 |
| ·重组菌的构建 | 第26-35页 |
| ·z 序列的制备 | 第26-31页 |
| ·重组质粒 pMD18-T-z5的构建 | 第31-33页 |
| ·表达菌 E.coli BL21(DE3)/pET28a-z5的构建与表达 | 第33-34页 |
| ·小结 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白 A 的亲和纯化 | 第35-36页 |
| ·IgG Sepharose 6 FF 纯化重组蛋白 A | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·亲和吸附剂的制备 | 第36-39页 |
| ·烯丙基缩水甘油醚的活化 | 第37页 |
| ·NHS 的偶联 | 第37-39页 |
| ·重组蛋白 A 的偶联 | 第39页 |
| ·小结 | 第39页 |
| ·自制重组蛋白 A 亲和层析填料性能评价 | 第39-50页 |
| ·自制重组蛋白 A 亲和填料纯化 IgG | 第39-41页 |
| ·不同 pH 洗脱 | 第41-44页 |
| ·上样量优化 | 第44-45页 |
| ·上样流速 | 第45-46页 |
| ·耐碱稳定性 | 第46-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 结论与展望 | 第50-52页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 展望 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间主要研究成果 | 第59页 |