中文摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
英文缩略表 | 第11-12页 |
第一部分 文献综述 | 第12-25页 |
一.水稻黑条矮缩病的研究进展 | 第12-18页 |
1. 水稻黑条矮缩病 | 第12-14页 |
·水稻黑条矮缩病毒概况 | 第12-14页 |
·水稻黑条矮缩病概况 | 第14页 |
2. 抗病相关物质的研究 | 第14-18页 |
·植物激素在抗病过程中的研究应用 | 第14-18页 |
·病程相关蛋白在植物抗病中的作用 | 第18页 |
二.水稻黑条矮缩病的防治 | 第18-20页 |
1. 水稻黑条矮缩病毒检测方法 | 第18-19页 |
2. 水稻黑条矮缩病防治措施 | 第19-20页 |
三 植物抗病研究中部分相关技术及其应用 | 第20-24页 |
1.高通量测序技术及其在植物抗病中的应用 | 第20-21页 |
2.植物 RNA 干扰技术 | 第21-24页 |
·RNA 干扰的发现 | 第21-22页 |
·RNA 干扰技术在植物抗病品种培育中的应用 | 第22-24页 |
四、本研究的目的意义 | 第24-25页 |
第二部分 实验论文 | 第25-85页 |
第一章 水稻黑条矮缩病感病及抗病机理研究 | 第25-43页 |
1 实验材料 | 第25-26页 |
·植物材料 | 第25页 |
·实验试剂 | 第25页 |
·大型实验仪器 | 第25-26页 |
2 实验方法 | 第26-31页 |
·RT-PCR 法检测水稻黑条矮缩病毒 | 第26-27页 |
·对正常及感染黑条矮缩病水稻的不同组织的石蜡切片及显微观察 | 第27-29页 |
·正常及感染黑条矮缩病水稻中几丁质酶活性测定 | 第29-30页 |
·酶联免疫吸附测定(ELISA)法对感染黑条矮缩病水稻中不同内源激素含量的测定 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-38页 |
·RT-PCR 对感病水稻中黑条矮缩病病毒的鉴定 | 第31-33页 |
·感染黑条矮缩病水稻的组织细胞观察 | 第33-34页 |
·几丁质酶活性变化 | 第34-36页 |
·感染黑条矮缩病水稻中部分激素含量的测定 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-42页 |
·RT-PCR 鉴定水稻黑条矮缩病毒的可行性 | 第38-39页 |
·水稻黑条矮缩病细胞病理学研究意义 | 第39-40页 |
·植物几丁质酶在抗病研究中的重要性 | 第40-41页 |
·水稻黑条矮缩病感病症状及机制与不同激素的相关性 | 第41-42页 |
5 本章小结 | 第42-43页 |
第二章 高通量测序技术对感染黑条矮缩病水稻中基因表达谱分析 | 第43-68页 |
1 实验材料 | 第43页 |
2 实验方法 | 第43-45页 |
·RT-PCR 法对感染黑条矮缩病水稻材料的鉴定 | 第43页 |
·数字基因表达谱测序(DGE)数据的获得 | 第43-45页 |
3 实验结果 | 第45-63页 |
·测序饱和度分析 | 第45页 |
·Tag 测序数据统计 | 第45-46页 |
·Gene Ontology 功能显著性富集分析 | 第46-53页 |
·Pathway 显著性富集分析 | 第53-54页 |
·差异表达基因(Differentially expressed genes,DEGs)分析 | 第54-63页 |
4、讨论 | 第63-67页 |
·次生代谢物在植物抵抗环境胁迫中的作用 | 第63-65页 |
·细胞色素 P450s 在植物体中的作用 | 第65-66页 |
·生长发育相关基因表达水平的变化与水稻黑条矮缩病症状的相关性 | 第66-67页 |
5 本章小结 | 第67-68页 |
第三章 抗黑条矮缩病水稻的培育 | 第68-85页 |
1 实验材料 | 第68-69页 |
·植物材料 | 第68页 |
·质粒和菌株 | 第68页 |
·重要的实验试剂 | 第68-69页 |
·植物培养材料 | 第69页 |
·主要仪器设备 | 第69页 |
2 实验方法 | 第69-75页 |
·试剂配置 | 第69-70页 |
·感染 RBSDV 水稻叶片总 RNA 的提取及第一链 cDNA 的合成 | 第70-71页 |
·RBSDV 特异性引物的设计 | 第71页 |
·水稻黑条矮缩病毒干扰片段的获得 | 第71-72页 |
·RNA 干扰载体的构建 | 第72-73页 |
·干扰片段表达载体的构建 | 第73-74页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第74页 |
·水稻转化 | 第74页 |
·转基因苗的检测、鉴定 | 第74-75页 |
3. 结果与分析 | 第75-80页 |
·RBSDV 系列干扰片段的获得及酶切鉴定 | 第75-76页 |
·pUC19-RNAi-RBSDV 系列干扰载体的构建 | 第76页 |
·pCA1300-Ubi-RNAi-RBSDV 系列植物双元表达载体的构建 | 第76-77页 |
·农杆菌介导的水稻转化 | 第77-79页 |
·转基因植株的鉴定 | 第79-80页 |
4 讨论 | 第80-83页 |
5 本章小结 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-93页 |
附录一 | 第93-94页 |
附录二 | 第94-99页 |
附录三 | 第99-103页 |
硕士期间发表的文章 | 第103-105页 |
致谢 | 第105页 |