| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-45页 |
| ·免疫系统 | 第14-15页 |
| ·植物的防御策略、信号途径以及PR蛋白家族 | 第15-26页 |
| ·植物对病原菌攻击的防御策略 | 第15-16页 |
| ·植物激素SA、JA、Et以及DELLAs蛋白调控的多信号途径 | 第16-23页 |
| ·SA信号途径 | 第17页 |
| ·JA信号途径 | 第17-19页 |
| ·Et信号途径 | 第19-22页 |
| ·DELLAs蛋白介导的信号途径的相互联系 | 第22-23页 |
| ·PR蛋白家族 | 第23-26页 |
| ·植物-病原菌互作机理 | 第26-32页 |
| ·PAMPs-PRRs与Effector-R protein模型 | 第26-28页 |
| ·效应子、卫兵蛋白、R蛋白分类及其互作机理 | 第28-32页 |
| ·植物-昆虫互作机理 | 第32-37页 |
| ·昆虫取食后植物表达谱变化 | 第32-33页 |
| ·昆虫口腔分泌的"激发子"引发的防御应答 | 第33-34页 |
| ·R基因介导的蚜虫和褐飞虱抗性 | 第34-35页 |
| ·植物对昆虫取食的防御策略 | 第35-36页 |
| ·JA及其衍生物的合成途径 | 第36-37页 |
| ·MAPK信号级联途径 | 第37-40页 |
| ·植物中MAPK信号级联途径功能 | 第37-39页 |
| ·病原菌对宿主MAPKs免疫防御的应对策略 | 第39-40页 |
| ·褐飞虱的生物学特性及其危害 | 第40-44页 |
| ·褐飞虱的生物学特性 | 第40-41页 |
| ·褐飞虱的生物型 | 第41-42页 |
| ·褐飞虱的取食行为及其危害 | 第42-44页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第44-45页 |
| 第二章 材料与方法 | 第45-72页 |
| ·材料的培养、处理及抗虫鉴定相关 | 第45-47页 |
| ·褐飞虱及水稻的培养 | 第45页 |
| ·水稻材料的处理 | 第45页 |
| ·抗虫鉴定相关 | 第45-47页 |
| ·试管中苗期抗虫鉴定 | 第45-46页 |
| ·EPG分析 | 第46页 |
| ·蜜露量法 | 第46-47页 |
| ·Bphi008a超量表达和RNAi转基因构建 | 第47-49页 |
| ·转基因载体构建 | 第47页 |
| ·农杆菌介导的粳稻品种Hejiang 19的遗传转化 | 第47-49页 |
| ·转基因植株的检测 | 第49页 |
| ·DNA的抽提和Southern Blot分析 | 第49-52页 |
| ·CTAB法大量抽提DNA | 第49-50页 |
| ·DNA的限制性酶切,电泳与Southern转膜 | 第50-52页 |
| ·RNA的抽提和Northern Blot分析 | 第52-54页 |
| ·总RNA提取 | 第52-53页 |
| ·RNA电泳 | 第53页 |
| ·RNA转膜 | 第53-54页 |
| ·探针标记、杂交、洗膜、自显影及膜的再生 | 第54页 |
| ·荧光定量PCR引物、第一链cDNA的合成及Real-time PCR检测 | 第54-57页 |
| ·荧光定量PCR引物设计及引物汇总 | 第54-56页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第56-57页 |
| ·Real-time PCR检测及数据分析 | 第57页 |
| ·亚细胞定位以及dapi和FM4-64染色 | 第57页 |
| ·GST融合蛋白的原核表达、纯化及体外磷酸化检测 | 第57-61页 |
| ·GST融合蛋白的载体构建及原核诱导表达 | 第57-58页 |
| ·包涵体的溶解和复性 | 第58页 |
| ·GST融合蛋白的过柱纯化和SDS-PAGE胶检测 | 第58-59页 |
| ·体外磷酸化检测 | 第59-61页 |
| ·Bphi008a与OsMPK5、OsbZIP60和SDRP互作的体内检测 | 第61-65页 |
| ·酵母双杂交 | 第61-62页 |
| ·ONPG法测定β-半乳糖苷酶活性 | 第62-63页 |
| ·拟南芥原生质体制备及BiFC检测 | 第63-64页 |
| ·Bphi008a作为诱饵蛋白的水稻cDNA文库的筛选 | 第64-65页 |
| ·常用的试剂配方及实验protocol | 第65-72页 |
| ·常用的试剂配方 | 第65-68页 |
| ·CTAB法小量抽取水稻DNA | 第68页 |
| ·重组质粒载体的构建 | 第68-69页 |
| ·超级感受态的制备及连接产物的转化 | 第69-70页 |
| ·重组质粒载体洋葱表皮细胞的基因枪转化 | 第70-72页 |
| 第三章 结果与分析 | 第72-102页 |
| ·Bphi008a转基因植株抗虫鉴定分析 | 第72-75页 |
| ·Bphi008a在转基因水稻群体中的Northern、Southern分析 | 第72-73页 |
| ·转基因植株的抗虫分析 | 第73-75页 |
| ·用于Real-time PCR的看家基因的选择和分级 | 第75-80页 |
| ·看家基因的选择 | 第75-77页 |
| ·褐飞虱取食前后看家基因的分级与数据处理 | 第77-80页 |
| ·Bphi008a是水稻乙烯信号途径下游的一个效应基因 | 第80-83页 |
| ·褐飞虱的取食与乙烯合成的关系 | 第80-83页 |
| ·1-MCP处理后对Bphi008a表达的影响 | 第83页 |
| ·Bphi008a蛋白的双向定位以及表达模式 | 第83-86页 |
| ·Bphi008a蛋白的双向定位 | 第83-85页 |
| ·Bphi008a基因在水稻中的表达模式 | 第85-86页 |
| ·Bphi008a和OsMPK5的互作 | 第86-91页 |
| ·Bphi008a在体外能被OsMPK5磷酸化 | 第86-87页 |
| ·Bphi008a与OsMPK5在酵母细胞中互作 | 第87-89页 |
| ·Bphi008a与OsMPK5在拟南芥原生质体细胞核中互作 | 第89-91页 |
| ·Bphi008a与OsMPK5在洋葱表皮细胞核中互作 | 第91页 |
| ·Bphi008a的超量表达和抑制能导致OsMPK5/12/13/17不同的表达模式 | 第91-94页 |
| ·Bphi008a在OE和RNAi群体中的表达分析 | 第91-92页 |
| ·转基因群体中OsMPK5/12/13/17不同的表达模式 | 第92-94页 |
| ·Bphi008a的超量表达能提高AP2/ERF转录因子以及防御基因的表达水平 | 第94-97页 |
| ·AP2/ERF转录因子家族成员OsERF1和OsEREBP1表达模式 | 第94-95页 |
| ·一些蛋白酶抑制剂基因表达模式 | 第95-97页 |
| ·Bphi008a酵母双杂交筛库结果 | 第97-102页 |
| ·Bphi008a诱饵蛋白筛选水稻cDNA文库分析 | 第97-100页 |
| ·Bphi008a与OsbZIP60以及SDRP体内互作验证 | 第100-101页 |
| ·OsbZIP60在WT以及转基因植株中表达分析 | 第101-102页 |
| 第四章 总讨论 | 第102-110页 |
| ·精确的比对标准是正确衡量基因表达变化的基础 | 第102-103页 |
| ·褐飞虱取食引发防御应答的全面性和复杂性 | 第103-106页 |
| ·褐飞虱取食引发SA、JA和Et信号途径的分析 | 第103-105页 |
| ·褐飞虱取食导致一系列下游的PR基因表达变化 | 第105-106页 |
| ·MAPK信号级联途径参与着水稻对褐飞虱的免疫应答 | 第106-107页 |
| ·磷酸化的Bphi008a蛋白在核中调控OsMPKs表达的机理探讨 | 第107-110页 |
| ·Bphi008a蛋白C端的多脯氨酸功能结构域 | 第107-108页 |
| ·Bphi008a与OsbZIP60一起参与内质网应急 | 第108-110页 |
| 参考文献 | 第110-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
