| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| ·农杆菌转化法 | 第11-12页 |
| ·农杆菌 | 第11页 |
| ·农杆菌转化法的原理 | 第11-12页 |
| ·T-DNA整合进入植物基因组的意义 | 第12页 |
| ·T-DNA整合机理及其特征的研究现状 | 第12-17页 |
| ·T-DNA整合模型 | 第12-16页 |
| ·T-DNA整合特征 | 第16-17页 |
| ·T-DNA整合的拷贝数 | 第17页 |
| ·T-DNA在植物基因组中的分布 | 第17页 |
| ·外源基因侧翼序列的克隆及测定 | 第17-24页 |
| ·利用捆绑的方法扩增侧翼序列 | 第18-21页 |
| ·反向PCR法(I-PCR) | 第18-19页 |
| ·锅柄PCR法 | 第19-21页 |
| ·利用引物的方法扩增侧翼序列 | 第21-24页 |
| ·热不对称交错PCR法 | 第21-23页 |
| ·SON-PCR法(single oligonucleotide nested PCR) | 第23-24页 |
| ·本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-33页 |
| ·植物材料 | 第25-27页 |
| ·愈伤组织 | 第25页 |
| ·载体 | 第25-27页 |
| ·DNA提取以及目的片段的检测 | 第27-28页 |
| ·玉米基因组DNA提取 | 第27-28页 |
| ·培育黄化苗 | 第27页 |
| ·CTAB法提取基因组DNA | 第27-28页 |
| ·目的片段检测 | 第28页 |
| ·改进TAIL-PCR获得侧翼序列 | 第28-32页 |
| ·改进TAIL-PCR程序并扩增侧翼序列 | 第28-30页 |
| ·普通PCR检测 | 第30页 |
| ·连接PMD18-T载体以及感受态细胞的制作 | 第30-31页 |
| ·连接PMD18-T载体 | 第30-31页 |
| ·感受态细胞的制作 | 第31页 |
| ·转化感受态细胞以及挑取单克隆测序 | 第31-32页 |
| ·转化感受态细胞与平板涂布 | 第31页 |
| ·挑取单克隆与检测 | 第31-32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·侧翼序列与玉米基因组比对 | 第32页 |
| ·侧翼序列与表达载体序列比对 | 第32页 |
| ·填充序列分析 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-43页 |
| ·改进TAIL-PCR方法扩增特异性片段 | 第33-37页 |
| ·测得序列比对 | 第37-39页 |
| ·与玉米基因组比对 | 第37-38页 |
| ·与表达载体比对 | 第38-39页 |
| ·T-DNA整合玉米基因组分布规律 | 第39-40页 |
| ·T-DNA在玉米10条染色体的插入分布规律 | 第39页 |
| ·T-DNA各条染色体上插入位置规律 | 第39-40页 |
| ·T-DNA插入位点碱基规律 | 第40页 |
| ·T-DNA整合玉米基因组整合规律 | 第40-43页 |
| ·T-DNA断裂规律 | 第40-41页 |
| ·T-DNA插入规律 | 第41-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| ·改进TAIL-PCR技术的扩增效率 | 第43-44页 |
| ·T-DNA整合进入玉米基因组的随机排布 | 第44-45页 |
| ·T-DNA整合的分子特征 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 攻读学位期间发表的相关论文 | 第59页 |