| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| ·RNA 沉默抑制子及其功能 | 第13-15页 |
| ·RNA 沉默现象 | 第13页 |
| ·RNA 沉默抑制子 | 第13页 |
| ·RNA 沉默抑制子结构与功能 | 第13-15页 |
| ·植物中 RNA 介导的抗病毒基因工程 | 第15-17页 |
| ·利用病毒起源的基因介导的抗性策略 | 第15页 |
| ·RNA 沉默介导的病毒抗性 | 第15-17页 |
| ·RNA 沉默抑制子与植物病毒症状形成的关系 | 第17页 |
| ·植物感病后生理指标的变化 | 第17-18页 |
| ·植物叶片衰老生理生化指标的变化 | 第18-19页 |
| ·miRNA 的形成途径和结构功能 | 第19-24页 |
| ·miRNA 途径和 siRNA 途径存在部分重叠 | 第19-20页 |
| ·miRNA 的结构和功能 | 第20-21页 |
| ·植物 miRNA 对生长发育的影响 | 第21-24页 |
| ·本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 2.材料与方法 | 第25-39页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·植物材料 | 第25页 |
| ·病毒 | 第25页 |
| ·PCR 引物 | 第25-26页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-39页 |
| ·转基因烟草的 PCR 鉴定 | 第26-27页 |
| ·转基因烟草的 ELISA 检测 | 第27页 |
| ·转基因烟草 Western blot 检测 | 第27-29页 |
| ·抗血清制备 | 第29-30页 |
| ·光合速率及相关参数测定 | 第30页 |
| ·叶绿素含量的测定 | 第30页 |
| ·超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定 | 第30-31页 |
| ·过氧化物酶（POD）活性的测定 | 第31页 |
| ·TRIOL 提取烟草总 RNA | 第31-32页 |
| ·热酚法提取植物小分子 RNA | 第32-33页 |
| ·miRNA 的 qRT-PCR 检测 | 第33-34页 |
| ·烟草常规杂交育种 | 第34页 |
| ·烟草组培扩繁 | 第34-35页 |
| ·Northern blot | 第35-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-51页 |
| ·P25 蛋白对 PVYNCP 转基因烟草抗性的影响 | 第39-46页 |
| ·PVX P25 转基因烟草的筛选 | 第39-40页 |
| ·PVYNCP 转基因烟草的鉴定 | 第40-43页 |
| ·双转基因烟草（P25×CP）的获得及鉴定 | 第43-44页 |
| ·双转基因烟草的 Northern blot 分析 | 第44-45页 |
| ·双转基因烟草的抗病性分析 | 第45-46页 |
| ·P25 蛋白对烟草表型的影响 | 第46-49页 |
| ·P25 蛋白烟草叶绿素含量的影响 | 第47页 |
| ·P25 蛋白对烟草抗氧化酶活性的影响 | 第47-48页 |
| ·P25 蛋白对烟草叶片光合作用的影响 | 第48-49页 |
| ·P25 蛋白对烟草 miRNA 表达水平的影响 | 第49-51页 |
| ·miRNA 的分离提取 | 第49页 |
| ·生长发育相关的 miRNA 的 qRT-PCR | 第49-50页 |
| ·miRNA 的相对表达量分析 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| ·PVX P25 蛋白影响 RNA 介导的病毒抗性 | 第51-52页 |
| ·PVX P25 蛋白对烟草表型的影响 | 第52页 |
| ·PVX P25 蛋白对烟草 miRNA 表达水平的影响 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61页 |
