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小麦ramosa2的克隆、表达及转基因初步研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
第一章 文献综述第13-24页
   ·小麦穗形态发育模式及变异类型研究现状第13-15页
   ·玉米ramosa 基因通路研究第15-16页
   ·小麦基因克隆研究第16-18页
     ·同源克隆第17页
     ·图位克隆第17页
     ·抑制差减杂交第17-18页
     ·mRNA 差异显示第18页
   ·LBD 基因家族在高等植物中的研究第18-20页
     ·LBD 基因的结构域特征第19页
     ·LBD 基因的功能第19-20页
   ·转基因沉默技术研究第20-21页
     ·转基因沉默第20-21页
     ·RNA 干涉第21页
   ·小麦转基因研究方法第21-23页
     ·基因枪法第21-22页
     ·农杆菌介导法第22-23页
     ·花粉管通道法第23页
   ·本研究的目的和意义第23-24页
第二章 TtRa2 的同源克隆第24-32页
   ·材料第24页
     ·植物材料第24页
     ·宿主菌、克隆载体及分子生物学试剂第24页
     ·主要培养基及试剂第24页
   ·方法第24-26页
     ·DNA 与RNA 的提取第24页
     ·TtRa2 的克隆第24-25页
     ·TtRa2 的组织特异性分析第25-26页
   ·结果与分析第26-31页
     ·TtRa2 的扩增及组织特异性分析第26-27页
     ·TtRA2 序列和结构域分析第27-29页
     ·TtRA2 的进化分析第29-31页
   ·讨论第31-32页
第三章 TtRa2 的原核表达及其重组蛋白的DNA 特异结合分析第32-40页
   ·材料第32-35页
     ·目的基因第32页
     ·宿主菌、表达载体及分子生物学试剂第32页
     ·主要试剂第32-34页
     ·主要仪器第34-35页
   ·实验方法第35-36页
     ·重组表达载体的构建与鉴定第35页
     ·TtRa2 诱导表达及亲和纯化第35页
     ·凝胶迁移阻滞试验第35-36页
   ·结果与分析第36-39页
     ·重组表达载体的鉴定第36-37页
     ·TtRA2 的表达纯化分析第37页
     ·TtRA2 与特异DNA 序列结合能力的测定第37-39页
   ·讨论第39-40页
第四章 小麦成熟胚、幼胚离体再生培养体系优化及筛选体系建立第40-46页
   ·材料和方法第40-41页
     ·材料第40页
     ·组织培养所用培养基第40页
     ·小麦外植体培养第40-41页
       ·小麦幼胚培养第40页
       ·小麦成熟胚培养第40-41页
     ·结果统计计算第41页
   ·结果与分析第41-44页
     ·幼胚愈伤组织诱导及分化第41-42页
     ·成熟胚愈伤组织诱导及分化第42-44页
     ·不同浓度NAA 对再生植株生根状况的影响第44页
   ·讨论第44-46页
第五章 ramosa2 和ramosa3 基因RNAi 载体的转化第46-53页
   ·材料和方法第46-48页
     ·材料第46页
       ·供试小麦品种第46页
       ·培养基第46页
     ·方法第46-48页
       ·RNAi 表达载体pAHC-ra2 及pAHC-ra3 的构建第46-47页
       ·愈伤组织准备及基因枪转化第47-48页
       ·受体材料对除草剂敏感性实验第48页
       ·转化后愈伤组织分化成苗第48页
   ·结果与分析第48-51页
     ·愈伤组织的转化及再生第48-49页
     ·不同浓度Basta 对小麦离体培养的影响第49-50页
     ·转基因再生植株表型第50-51页
   ·讨论第51-53页
第六章 结论第53-54页
参考文献第54-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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