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能源微藻筛选及其基因工程基础研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
符号说明第11-12页
目录第12-16页
第一章 文献综述第16-25页
   ·引言第16页
   ·微藻生物柴油概述第16-19页
     ·微藻作为生物柴油原料的优势第17-18页
     ·微藻生物柴油开发的必要性第18-19页
   ·微藻培养及其优化第19-20页
     ·微藻生物柴油生产的基本流程第19页
     ·高脂质积累能力微藻选育及培养第19-20页
   ·工程微藻研究进展第20-23页
     ·微藻的外源DNA导入方法现状第21页
     ·筛选标记及其启动子研究第21页
     ·基因研究第21-23页
   ·本论文的研究目标和研究内容第23-25页
     ·本论文的研究目标第23-24页
     ·主要研究内容第24页
     ·论文资助与国际合作情况第24-25页
第二章 目的微藻Chlorella sorokiniana CS-01的选育第25-32页
   ·引言第25页
   ·材料与方法第25-27页
     ·藻株的分离与培养第25-26页
     ·形态学观察和生理检验第26页
     ·18S rRNA基因系统发育学鉴定第26-27页
     ·细胞生物量测定和生化成分分析第27页
   ·结果与讨论第27-31页
     ·藻株细胞形态特征第27-28页
     ·系统发育鉴定第28页
     ·生理性状第28-31页
   ·本章小结第31-32页
第三章 Chlorella sorokiniana CS-01以生物燃料为目的的培养优化第32-49页
   ·引言第32-33页
   ·材料与方法第33-34页
     ·培养条件第33页
     ·细胞生物量测定和生化成分分析第33-34页
     ·脂质成分分析第34页
   ·结果第34-44页
     ·兼养对三株微藻生长和脂质含量的影响第34-37页
     ·兼养下三株微藻葡萄糖消耗速率第37-38页
     ·兼养对细胞脂质组成的影响第38-39页
     ·异养对细胞生长和脂质含量的影响第39-40页
     ·异养条件下细胞成分与葡萄糖消耗速率第40-42页
     ·异养条件对细胞脂质组成的影响第42-43页
     ·铁对细胞生长和脂质含量的影响第43-44页
   ·讨论第44-47页
   ·本章小结第47-49页
第四章 基因rbcL,accD,acc1在高低脂质各条件下的表达差异分析第49-60页
   ·引言第49页
   ·材料与方法第49-51页
     ·培养条件第50页
     ·总RNA提取与cDNA文库合成第50页
     ·Real-Time PCR分析第50-51页
   ·结果第51-56页
     ·兼养对3个脂质合成相关基因表达的影响第51-53页
     ·异养对3个脂质合成相关基因表达的影响第53-54页
     ·铁对3个脂质合成相关基因表达的影响第54-56页
   ·讨论第56-59页
   ·本章小结第59-60页
第五章 不同铁浓度下Chlorella sorokinianaCS-01的Genefishing表达图谱第60-66页
   ·引言第60页
   ·材料与方法第60-62页
     ·培养条件第60-61页
     ·总RNA提取第61页
     ·Genefishing分析第61页
     ·Real-Time PCR引物设计第61页
     ·Real-Time PCR分析第61-62页
   ·结果与讨论第62-65页
     ·Genefishing分析第62-64页
     ·Realtime-PCR验证第64-65页
   ·本章小结第65-66页
第六章 Chlorella sorokiniana转录组测序及其脂质合成代谢途径分析第66-101页
   ·引言第66页
   ·材料与方法第66-68页
     ·微藻细胞培养第66页
     ·总RNA提取第66-67页
     ·cDNA文库制备第67页
     ·测序第67页
     ·测序结果装配与分析第67页
     ·序列识别注释和代谢途径构建第67-68页
   ·结果与讨论第68-84页
     ·cDNA文库制备方法改进第68-69页
     ·测序与序列拼接第69-71页
     ·序列的比对和注释第71-73页
     ·从二氧化碳的固定到TAG的合成途径预测第73-78页
     ·脂肪酸的合成、延长和代谢第78-83页
     ·微藻生长与死亡第83-84页
   ·本章小结第84-85页
 第七章 不同培养条件下Chlorella sorokiniana全转录组表达差异第85页
   ·引言第85页
   ·材料与方法第85-86页
     ·微藻细胞培养第85-86页
     ·cDNA文库制备、测序及其装配与分析第86页
     ·基因表达水平分析第86页
   ·结果与讨论第86-100页
     ·测序结果统计第86-90页
     ·全转录库表达差异统计第90-93页
     ·全转录库在对数期与稳定期间表达差异第93-94页
     ·全转录库在不同铁浓度的表达差异第94-95页
     ·全转录库在不同营养方式下的表达差异第95-100页
   ·本章小结第100-101页
第八章 微藻colony-PCR技术第101-108页
   ·引言第101页
   ·材料与方法第101-102页
     ·微藻藻株第101-102页
     ·Colony-PCR缓冲液第102页
     ·Colony-PCR操作流程第102页
     ·引物第102页
   ·结果与讨论第102-107页
   ·本章小结第107-108页
全文结论第108-111页
参考文献第111-118页
致谢第118-120页
攻读学位期间主要的研究成果第120-121页

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