中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
绪言 | 第10-12页 |
第一章:文献综述 | 第12-31页 |
1 植物的耐盐机理 | 第12-14页 |
·渗透调节 | 第12-13页 |
·离子均衡 | 第13页 |
·自由基的清除及转录因子的调节 | 第13-14页 |
2 提高植物耐盐性的转基因工程研究 | 第14-24页 |
·功能性蛋白及其与植物耐盐性的关系 | 第14-15页 |
·调节性蛋白-Na~+/H~+ 逆向转运蛋白及其与植物耐盐性的关系 | 第15-23页 |
·调节性蛋白-转录因子与植物耐盐性的关系 | 第23-24页 |
3 启动子对基因表达的调节作用 | 第24-27页 |
·组织特异性启动子对基因表达的调节作用 | 第25-26页 |
·诱导型启动子对基因表达的调节作用 | 第26-27页 |
4 耐盐转基因研究中存在的问题及拟采取的措施 | 第27-29页 |
5 本项目的提出 | 第29-31页 |
第二章:松树根特异表达启动子的功能研究 | 第31-49页 |
1 材料和方法 | 第31-42页 |
·植物材料 | 第31页 |
·载体与菌种 | 第31页 |
·5’-deletion 研究所用启动子 | 第31页 |
·酶及化学试剂 | 第31-32页 |
·培养基 | 第32页 |
·质粒提取液 | 第32页 |
·主要仪器设备 | 第32-33页 |
·PR 基因启动子的5’-deletion 技术 | 第33-35页 |
·PCR 产物的纯化回收 | 第35页 |
·PCR 回收产物与T-载体的连接 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第35-36页 |
·质粒的提取 | 第36-37页 |
·PCR 及酶切验证 | 第37页 |
·序列测定 | 第37页 |
·特异启动子::GUS 融合表达载体的构建 | 第37-38页 |
·农杆菌质粒的提取与鉴定 | 第38页 |
·烟草无菌苗的培养 | 第38页 |
·烟草的遗传转化与再生 | 第38-39页 |
·转基因烟草的 PCR 检测 | 第39-40页 |
·转基因烟草的 GUS 检测 | 第40-41页 |
·荧光法测定GUS 活性 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-47页 |
·美洲东部白松启动子和乔松启动子的5’-deletion | 第42-43页 |
·不同长度片段 PmPs(PmPg)::GUS 融合表达载体的构建 | 第43页 |
·转基因烟草的PCR 检测 | 第43-45页 |
·转基因烟草的GUS 组织化学染色 | 第45-46页 |
·PmPs(800)::GUS 转基因烟草GUS 活性检测 | 第46-47页 |
3 小结 | 第47-49页 |
第三章:植物表达载体的构建及水稻耐盐转基因研究 | 第49-58页 |
1 材料与方法 | 第49-53页 |
·植物材料 | 第49页 |
·载体与菌种 | 第49页 |
·水稻转化所用启动子、耐盐相关基因 | 第49页 |
·松树根特异表达启动子全长序列驱动的 Na~+/H~+逆向转运蛋白植物表达载体的构建 | 第49-50页 |
·水稻的转化 | 第50-51页 |
·转基因水稻的筛选 | 第51页 |
·转基因水稻外源TaNHX2 基因的PCR 检测 | 第51-52页 |
·转基因水稻 Southern 鉴定 | 第52-53页 |
2 结果与分析 | 第53-57页 |
·PmPs(PmPg)::TaNHX2 嵌合表达载体的构建 | 第53-54页 |
·转基因水稻的PCR 鉴定 | 第54-56页 |
·转基因水稻的Southern 鉴定 | 第56-57页 |
3 小结 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-67页 |
附录 | 第67-77页 |
附录一、小麦Na+/H+ 逆向转运蛋白序列 | 第67-70页 |
附录二、常用贮存液的配制 | 第70-74页 |
附录三、缩略词表 | 第74-75页 |
附录四、所用载体与 Marker | 第75-77页 |
作者在学习期间发表的论文清单 | 第77页 |