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Ⅰ.小金海棠MxIRT1的离子转运、细胞定位与降解途径研究 Ⅱ.水稻OsNAT7的底物转运功能研究

摘要第1-8页
Abstract第8-13页
图表索引第13-14页
缩写词第14-15页
第1章 植物铁吸收和调控机理第15-30页
   ·引言第15页
   ·铁在植物中的生理功能第15-16页
   ·酿酒酵母的铁吸收与调控第16-19页
     ·酵母对铁的吸收第16-17页
     ·酵母胞内铁的转运第17页
     ·酵母铁吸收的调控第17-19页
   ·植物的铁吸收机理第19-24页
     ·机理Ⅰ与机理Ⅱ第19-20页
     ·机理Ⅰ植物对铁的吸收第20-22页
     ·机理Ⅱ植物对铁的吸收第22-24页
   ·植物对铁的转运、储存与再分配第24-27页
     ·根对铁的吸收与木质部的运输第24-25页
     ·韧皮部铁的运输与再分配第25-26页
     ·铁在细胞内的储存与区室化第26-27页
   ·植物缺铁适应性反应信号转导与基因表达调控第27-28页
     ·植物缺铁适应性调节部位与器官间的信号传递第27页
     ·植物铁吸收的信号转导与基因表达调控第27-28页
   ·提高籽实含铁量是植物铁营养研究的热点问题第28-30页
第2章 材料与方法第30-47页
   ·材料和试剂第30-38页
     ·菌株第30-31页
     ·载体第31页
     ·引物合成及测序第31-32页
     ·酶、抗生素、各类试剂及试剂盒第32-33页
     ·培养基第33-37页
     ·常用溶液和特殊药品配制第37页
     ·主要实验仪器第37-38页
   ·实验方法第38-47页
     ·质粒的小量提取法及质粒的中量提取法第38页
     ·PCR扩增与琼脂糖凝胶电泳检测第38页
     ·回收、连接、转化、筛选、阳性克隆质粒的提取、鉴定与酶切第38-39页
     ·载体构建与流程第39-40页
     ·重组质粒的酵母转化与筛选第40-42页
     ·酵母细胞的金属离子含量测定第42页
     ·酵母细胞的荧光定位培养、染色、观察方法第42-43页
     ·原生质体的制备与瞬时表达载体的转化第43页
     ·植物表达载体的农杆菌转化第43-44页
     ·洋葱表皮细胞的农杆菌侵染第44页
     ·烟草悬浮系BY-2的转化第44页
     ·水稻的转化第44-45页
     ·酵母蛋白的提取及蛋白印迹第45-46页
     ·水稻总RNA提取及反转录PCR第46页
     ·水稻种子金属含量的测定第46-47页
第3章 MxIRT1的离子转运、细胞定位与降解途径研究第47-70页
   ·引言第47-50页
     ·IRT研究进展第47-49页
     ·MxIRT1的已有研究工作与本研究目的和意义第49-50页
   ·实验结果与分析第50-63页
     ·MxIRT1编码一ZIP家族的膜蛋白第50-52页
     ·MxIRT1可转运铁、镉两种金属元素第52-53页
     ·信号肽和富含组氨酸结构基序对Fe、Cd转运有不同的作用第53-54页
     ·MxIRT1::GFP定位于酵母细胞质膜和胞内的膜(囊)泡内第54-55页
     ·不同铁浓度处理酵母细胞中MxIRT1::GFP的荧光强度发生变化第55-56页
     ·诱导表达MxIRT1::GFP后的酵母细胞液泡中观察到绿色荧光第56-58页
     ·外源铁促进MxIRT1蛋白的降解第58-59页
     ·诱导表达MxIRT1::GFP的end4和pep4突变体液泡观察到荧光第59页
     ·MxIRT1在植物细胞中定位于质膜和内膜系统第59-60页
     ·MxIRT1的转基因水稻T_1代种子中的金属含量未表现明显差异第60-63页
   ·讨论第63-68页
     ·MxIRT1的离子吸收功能与关键氨基酸分析第63-64页
     ·分泌途径对于功能性的MxIRT1蛋白起重要作用第64-65页
     ·缺铁状态下的酵母细胞中MxIRT1的膜泡增多第65页
     ·MxIRT1的降解途径与内吞作用第65-67页
     ·MxIRT1在植物细胞中的定位第67页
     ·MxIRT1的转基因水稻的研究第67-68页
   ·小结与展望第68-70页
第4章 水稻OsNAT7的底物转运功能研究第70-84页
   ·植物NAT家族概述第70-75页
     ·植物核酸代谢第70-72页
     ·植物与核酸转运相关的基因家族第72-73页
     ·植物抗坏血酸代谢与转运第73-74页
     ·植物NAT家族第74-75页
   ·结果与分析第75-82页
     ·OsNAT7基因在水稻缺铁胁迫下转录水平发生变化第75-76页
     ·OsNAT7蛋白位于进化树的第Ⅲ进化枝第76-78页
     ·酵母中的异源互补未鉴定出OsNAT7的底物第78-81页
     ·OsNAT7蛋白主要定位于的细胞质膜和胞内的膜结构第81-82页
   ·讨论第82-83页
   ·小结与展望第83-84页
参考文献第84-94页
附录第94-96页
致谢第96-98页
在读期间发表文章第98页

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