| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-35页 |
| ·马铃薯-青枯菌互作及相关研究进展 | 第15-34页 |
| ·病原 | 第15-21页 |
| ·寄主 | 第21-22页 |
| ·相互作用 | 第22-29页 |
| ·病害管理 | 第29-32页 |
| ·问题与展望 | 第32-34页 |
| ·本论文的研究内容与目的及拟解决的关键问题 | 第34-35页 |
| 第二章 青枯菌诱导的马铃薯防卫相关基因的筛选 | 第35-71页 |
| ·前言 | 第35-37页 |
| ·材料与方法 | 第37-44页 |
| ·植物材料与菌种 | 第37-38页 |
| ·总RNA 抽提 | 第38-39页 |
| ·cDNA 反转录 | 第39页 |
| ·cDNA Rsa I 酶切 | 第39-40页 |
| ·cDNA Rsa I 酶切产物的接头连接 | 第40页 |
| ·第一轮差减杂交 | 第40-41页 |
| ·第二轮差减杂交 | 第41页 |
| ·PCR 扩增反应 | 第41-42页 |
| ·差减文库克隆 | 第42页 |
| ·反向Northern 斑点杂交 | 第42-43页 |
| ·RT-PCR 验证 | 第43页 |
| ·序列分析和功能注释 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-57页 |
| ·青枯菌PO41在马铃薯中的居群动态 | 第44-45页 |
| ·SSH 文库构建 | 第45-49页 |
| ·差异表达片段的RT-PCR 验证 | 第49页 |
| ·序列测定与同源检索及GO 分类 | 第49-57页 |
| ·讨论 | 第57-70页 |
| ·SSH-EST 克隆的有效性和局限性 | 第57页 |
| ·GO 术语注释和分类防卫相关基因功能的准确性 | 第57-59页 |
| ·青枯病防卫反应中部分关键基因的分子功能 | 第59-65页 |
| ·关于青枯菌诱导的防卫相关基因参与的生物学通路 | 第65-66页 |
| ·比较两种细菌性维管束病害中寄主EST揭示了防卫相关基因的异同 | 第66-68页 |
| ·两种不同诱导方法揭示的青枯病防卫相关基因的异同 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第70-71页 |
| 第三章 StLTPa7 基因在马铃薯与青枯菌互作早期的表达模式 | 第71-99页 |
| ·前言 | 第71-73页 |
| ·材料与方法 | 第73-80页 |
| ·植物材料、菌种与接种 | 第73页 |
| ·富集青枯菌诱导表达马铃薯cDNA文库的构建 | 第73-75页 |
| ·化学处理 | 第75页 |
| ·马铃薯非特异性脂质转移蛋白基因StLTPa7cDNA 全长的获得 | 第75-77页 |
| ·序列测定和生物信息学分析 | 第77页 |
| ·Real-Time PCR、RT-PCR 和Northern 杂交 | 第77页 |
| ·环境扫描电子显微镜和EDAX 能谱分析 | 第77页 |
| ·原位杂交 | 第77-80页 |
| ·结果与分析 | 第80-91页 |
| ·富集马铃薯与青枯菌互作早期诱导表达的防卫相关基因的cDNA文库 | 第80-81页 |
| ·StLTPa7 cDNA 的克隆、结构与进化分析 | 第81-84页 |
| ·青枯菌诱导StLTPa7 基因的时空表达 | 第84-87页 |
| ·EDAX 分析和氯化钙诱导的StLTPa7 基因的表达 | 第87-88页 |
| ·非生物激发子对StLTPa7 基因表达的诱导效应 | 第88-90页 |
| ·钌红对StLTPa7 基因表达的抑制效应 | 第90页 |
| ·StLTPa7 基因表达的原位杂交定位 | 第90-91页 |
| ·讨论 | 第91-98页 |
| ·关于马铃薯与青枯菌互作早期诱导表达的防卫相关基因的cDNA文库 | 第91页 |
| ·StLTPa7 基因的结构与抗病性功能 | 第91-92页 |
| ·青枯菌和非生物激发子诱导的StLTPa7 基因上调表达与防卫反应 | 第92页 |
| ·StLTPa7 基因转录的时空特征表明其可能参与系统获得抗性 | 第92-93页 |
| ·StLTPa7 基因可能涉及一种复杂的Ca2+ 相关的基因表达模式 | 第93-95页 |
| ·StLTPa7 作为防卫基因参与马铃薯青枯病抗性的机制探讨 | 第95-98页 |
| ·结论 | 第98-99页 |
| 第四章 StLTPa1 基因在不同抗、感病基因型中的差异表达 | 第99-109页 |
| ·前言 | 第99-100页 |
| ·材料与方法 | 第100-101页 |
| ·植物材料和青枯菌株 | 第100页 |
| ·化学处理 | 第100页 |
| ·RNA/DNA 制备 | 第100页 |
| ·抑制差减杂交和序列分析 | 第100-101页 |
| ·分离全长nsLTP cDNA | 第101页 |
| ·Real-Time PCR、RT-PCR 和Northern 杂交 | 第101页 |
| ·组织原位杂交 | 第101页 |
| ·结果与分析 | 第101-107页 |
| ·克隆和鉴定StLTPa1 基因 | 第101-104页 |
| ·青枯菌诱导StLTPa1 基因在不同抗、感病基因型中的表达模式 | 第104页 |
| ·StLTPa1 基因表达受非生物激发子的影响 | 第104-106页 |
| ·StLTPa1 基因表达的组织定位 | 第106-107页 |
| ·讨论 | 第107-108页 |
| ·StLTPa1 基因结构与进化 | 第107页 |
| ·青枯菌诱导StLTPa1 基因在不同抗、感病基因型中的表达模式 | 第107-108页 |
| ·StLTPa1 基因的表达受非生物因子的影响 | 第108页 |
| ·StLTPa1 基因与StLTPa7 的关系 | 第108页 |
| ·结论 | 第108-109页 |
| 第五章 潜伏感染菌株不能诱导 StLTPa7 和 StLTPa1 基因的表达 | 第109-121页 |
| ·前言 | 第109-110页 |
| ·材料与方法 | 第110-112页 |
| ·青枯菌、植物材料和生长条件 | 第110页 |
| ·SCV 菌株的分离 | 第110-111页 |
| ·生理检测 | 第111页 |
| ·分子鉴定 | 第111页 |
| ·电镜检测 | 第111页 |
| ·致病性检测 | 第111页 |
| ·StLTPa7 和StLTPa1 基因表达检测 | 第111-112页 |
| ·结果与分析 | 第112-117页 |
| ·青枯菌R.solanacearum SCVs的特征 | 第112-113页 |
| ·青枯菌R. solanacearum SCVs的鉴定 | 第113-116页 |
| ·StLTPa7 基因表达的检测 | 第116-117页 |
| ·讨论 | 第117-120页 |
| ·分离的两株低温适应型青枯菌归属于小菌落变异株更为合理 | 第117页 |
| ·SCV 不诱导寄主防卫基因表达是逃避寄主免疫系统的一种表现？ | 第117页 |
| ·小菌落变异株对马铃薯寄主无症状潜伏感染 | 第117-118页 |
| ·小菌落变异株有利于青枯菌种内进化 | 第118-119页 |
| ·关于青枯病的发生和流行 | 第119-120页 |
| ·结论 | 第120-121页 |
| 第六章 其他防卫相关基因cDNA 克隆与序列分析 | 第121-133页 |
| ·前言 | 第121-122页 |
| ·材料与方法 | 第122页 |
| ·青枯菌、植物材料和生长条件 | 第122页 |
| ·马铃薯与青枯菌互作早期受病菌诱导表达基因的SSH cDNA 文库 | 第122页 |
| ·富集马铃薯青枯病防卫早期表达基因cDNA 文库 | 第122页 |
| ·防卫相关基因cDNA 全长的获得 | 第122页 |
| ·结果与讨论 | 第122-132页 |
| ·全长cDNA 的克隆 | 第122-123页 |
| ·五条马铃薯非特异性脂质转移蛋白基因的关系 | 第123-125页 |
| ·马铃薯青枯病防卫反应中的铁蛋白 | 第125-126页 |
| ·马铃薯青枯病防卫反应中的印膜蛋白 | 第126-127页 |
| ·马铃薯青枯病防卫反应中的开心蛋白 | 第127-128页 |
| ·马铃薯青枯病防卫反应中的蛋白酶抑制子 | 第128页 |
| ·马铃薯青枯病防卫反应中的转录因子 | 第128-132页 |
| ·结论 | 第132-133页 |
| 全文结论 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 作者简历 | 第159页 |
