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RNA干扰抑制新城疫病毒复制的研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-14页
前言第14-30页
 1. 新城疫病毒研究进展第14-20页
   ·新城疫概述第14-15页
   ·新城疫病毒分子生物学特点第15-17页
   ·NDV 的复制第17-18页
   ·NDV 的防治第18-20页
 2 RNAI 及其抗病毒研究进展第20-29页
   ·RNAi 现象的发现第20页
   ·RNAi 的分子机制第20-21页
   ·miRNA第21-23页
   ·哺乳动物特殊的RNAi 现象第23页
   ·RNAi 的优点第23页
   ·siRNA 的制备第23-25页
   ·RNAi 抗病毒作用第25-28页
   ·RNAi 的局限性第28-29页
   ·结论第29页
 3 本研究的目的和意义第29-30页
实验一:载体表达SHRNA 抑制新城疫病毒复制第30-44页
 1 材料第30-31页
   ·病毒、载体、菌株和SPF 鸡胚第30页
   ·主要试剂第30-31页
   ·主要仪器设备第31页
 2 方法第31-34页
   ·shRNA 设计与表达载体的构建第31-32页
   ·CEF 细胞的制备和培养第32页
   ·转染第32-33页
   ·病毒接种第33页
   ·Real-time PCR第33-34页
   ·间接免疫荧光第34页
 3 结果第34-42页
   ·RNAi 靶位点的选择和表达载体的构建第34页
   ·Real-time PCR 标准曲线的建立第34页
   ·L 基因(功能区)特异性的shRNA 对NDV 的抑制作用第34-37页
   ·L 基因保守区特异性的shRNA 对NDV 的抑制作用第37-39页
   ·P 基因特异性的shRNA 对NDV 的抑制作用第39-40页
   ·NP 基因特异性的shRNA 对NDV 的抑制作用第40-42页
 4 讨论第42-44页
实验二:MIRNA 表达载体的构建及其在鸡胚中对NDV 的抑制作用第44-54页
 1 材料第44-45页
   ·病毒、载体、菌株和SPF 鸡胚第44页
   ·主要试剂第44页
   ·主要仪器设备第44-45页
 2 方法第45-49页
   ·miRNA 设计与表达载体的构建第45-48页
   ·鸡胚的转染第48页
   ·miRNA 对NDV 抑制作用的检测第48-49页
 3 结果第49-52页
   ·miRNA 的设计、合成第49页
   ·重组质粒的酶切鉴定第49页
   ·重组质粒的测序鉴定第49-51页
   ·miRNA 对NDV 抑制作用的检测第51-52页
 4 讨论第52-54页
结论第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61-62页
作者简介第62页

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