| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-9页 |
| 前言 | 第9-16页 |
| 实验材料 | 第16-28页 |
| 一、基本材料 | 第16-24页 |
| 1 主要化学试剂及部分耗材 | 第16页 |
| 2 生物学试剂 | 第16-19页 |
| 3 引物 | 第19-21页 |
| 4 合成肽 | 第21页 |
| 5 质粒载体 | 第21-24页 |
| 6 菌株 | 第24页 |
| 7 阳性钉螺 | 第24页 |
| 8 实验动物 | 第24页 |
| 9 血清 | 第24页 |
| 二、主要仪器设备 | 第24-25页 |
| 三、分析软件 | 第25-26页 |
| 四、主要溶液配制 | 第26-28页 |
| 实验方法 | 第28-69页 |
| 1 常用的分子生物学方法 | 第28-38页 |
| 2 表位基因DNA人工合成及克隆 | 第38-40页 |
| 3 多表位基因的随机重组表达文库的构建 | 第40页 |
| 4 多肽合成 | 第40-41页 |
| 5 RT-PCR | 第41-44页 |
| 6 日本血吸虫尾蚴、肺期童虫、成虫及虫卵的分离收集 | 第44-46页 |
| 7 日本血吸虫尾蚴、肺期童虫、成虫及虫卵膜蛋白抽提与分离 | 第46-48页 |
| 8 SWAP(Soluble worm antigen preparation)制备 | 第48页 |
| 9 重组蛋白表达以及纯化前的细菌处理 | 第48-51页 |
| 10 蛋白质去内毒素 | 第51-52页 |
| 11 蛋白质浓度的检测 | 第52-53页 |
| 12 多克隆抗血清的制备和纯化 | 第53-54页 |
| 13 普通SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第54-56页 |
| 14 Western Blot | 第56-59页 |
| 15 酶联免疫吸附测定 | 第59-61页 |
| 16 间接免疫荧光分析 | 第61-63页 |
| 17 细胞生物学方法 | 第63-66页 |
| 18 酶联免疫斑点(ELISPOT) | 第66-68页 |
| 19 免疫及保护性评估 | 第68-69页 |
| 实验结果 | 第69-134页 |
| 第一部分:日本血吸虫随机重组多表位抗原文库构建及保护性评估 | 第69-92页 |
| 1 单表位基因的选择、设计及克隆 | 第70-72页 |
| 2 表达B表位-乙肝核心抗原重组蛋白进行表位抗原性分析 | 第72-74页 |
| 3 利用人工合成多肽分析B表位抗原性 | 第74-78页 |
| 4 多表位基因的随机组装 | 第78-81页 |
| 5 多表位基因真核表达文库的构建 | 第81-82页 |
| 6 多表位基因文库的免疫原性 | 第82-84页 |
| 7 多表位基因文库的保护性 | 第84-85页 |
| 讨论 | 第85-91页 |
| 小结 | 第91-92页 |
| 第二部分:日本血吸虫新型表膜蛋白TSP-2鉴定、表征及评估 | 第92-134页 |
| 1 日本血吸虫Sj-tsp-2分子的克隆和序列分析 | 第93-110页 |
| 2 单个成虫Sj-tsp-2亚类转录谱分析 | 第110-111页 |
| 3 Sj-tsp-2分期转录 | 第111-112页 |
| 4 Trx-TSP-2亚类重组蛋白的表达和纯化 | 第112-113页 |
| 5 多克隆抗体制备 | 第113-114页 |
| 6 各期表膜蛋白制备及Western Blot | 第114页 |
| 7 Sj-TSP-2在肺期童虫和成虫中的定位 | 第114-117页 |
| 8 免疫学评价 | 第117-122页 |
| 9 保护性评价 | 第122-124页 |
| 讨论 | 第124-133页 |
| 小结 | 第133-134页 |
| 参考文献 | 第134-144页 |
| 文献综述一:血吸虫候选抗原表位鉴定 | 第144-156页 |
| 文献综述二:四次跨膜蛋白分子相互作用及其功能研究进展 | 第156-171页 |
| 附录Ⅰ:本论文所用的英文缩略语 | 第171-173页 |
| 附录Ⅱ:硕博连读期间发表的文章和参加的会议 | 第173-174页 |
| 致谢 | 第174页 |
