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嵌合HEV表位的HBcAg颗粒在毕赤酵母中的分泌表达

目录第1-7页
中文摘要第7-9页
英文摘要(Abstract)第9-11页
缩略词(Abbreviation)第11-13页
前言第13-38页
 1 毕赤酵母表达系统第13-24页
   ·系统发展概况第13页
   ·毕赤酵母表达系统的特点第13-15页
   ·毕赤酵母宿主菌株第15-17页
   ·毕赤酵母表达载体第17-18页
   ·基因整合机理第18-20页
   ·外源蛋白高效表达策略第20-24页
 2 乙型肝炎病毒核心蛋白第24-29页
   ·HBV C基因及其编码蛋白第24-25页
   ·HBcAg结构特点第25-27页
   ·HBcAg生物学功能第27-28页
   ·HBcAg融合蛋白的表达第28页
   ·HBcAg作为免疫载体的研究进展第28-29页
 3 戊型肝炎和戊型肝炎病毒第29-37页
   ·戊型肝炎的流行第29-31页
   ·HEV的生物学特征第31-34页
   ·HEV的分类第34-35页
   ·HEV衣壳蛋白表位研究进展第35-37页
 4 本研究的目的与意义第37-38页
材料与方法第38-58页
 1 材料第38-45页
   ·主要仪器第38-39页
   ·主要试剂与材料第39页
   ·常用溶液和培养基第39-45页
 2 方法第45-58页
   ·分子克隆第45-48页
   ·毕赤酵母相关实验第48-53页
   ·蛋白质性质研究方法第53-56页
   ·计算机辅助分析与设计第56-58页
结果与分析第58-79页
 1 重组蛋 rHBc149-12A10的表达与鉴定第58-65页
   ·引物设计第58页
   ·目的基因的扩增第58-59页
   ·重组质粒的构建第59-61页
   ·酵母转化与转化子筛选第61-62页
   ·重组蛋白的诱导表达第62-63页
   ·酵母免疫荧光第63-65页
 2 重组菌株表达条件优化与蛋白纯化第65-74页
   ·培养基对重组菌株生长与分泌表达的影响第65-67页
   ·诱导甲醇浓度对重组菌株生长与分泌表达的影响第67-68页
   ·初始诱导pH值对重组菌株的生长与分泌表达的影响第68-69页
   ·诱导温度对重组菌株的生长与分泌表达的影响第69-71页
   ·交试验优化诱导条件第71-72页
   ·重组蛋白rHBc149-12A10的纯化第72-74页
 3 重组蛋 rHBc-12A10的性质研究第74-79页
   ·CsCl密度梯度离心分析第74-75页
   ·透射电镜观察第75页
   ·重组颗粒rHBc149-12A10的免疫原性第75-76页
   ·免疫阻断实验第76-77页
   ·重组颗粒rHBc149-12A10与p239呈递12A10表位的比较第77-79页
讨论第79-84页
 1 毕赤酵母的分泌表达第79-80页
 2 毕赤酵母的培养条件第80-82页
 3 HBcAg作为免疫载体的优势第82-84页
小结与展望第84-85页
参考文献第85-99页
致谢第99-100页
附录第100页

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