目录 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要(Abstract) | 第9-11页 |
缩略词(Abbreviation) | 第11-13页 |
前言 | 第13-38页 |
1 毕赤酵母表达系统 | 第13-24页 |
·系统发展概况 | 第13页 |
·毕赤酵母表达系统的特点 | 第13-15页 |
·毕赤酵母宿主菌株 | 第15-17页 |
·毕赤酵母表达载体 | 第17-18页 |
·基因整合机理 | 第18-20页 |
·外源蛋白高效表达策略 | 第20-24页 |
2 乙型肝炎病毒核心蛋白 | 第24-29页 |
·HBV C基因及其编码蛋白 | 第24-25页 |
·HBcAg结构特点 | 第25-27页 |
·HBcAg生物学功能 | 第27-28页 |
·HBcAg融合蛋白的表达 | 第28页 |
·HBcAg作为免疫载体的研究进展 | 第28-29页 |
3 戊型肝炎和戊型肝炎病毒 | 第29-37页 |
·戊型肝炎的流行 | 第29-31页 |
·HEV的生物学特征 | 第31-34页 |
·HEV的分类 | 第34-35页 |
·HEV衣壳蛋白表位研究进展 | 第35-37页 |
4 本研究的目的与意义 | 第37-38页 |
材料与方法 | 第38-58页 |
1 材料 | 第38-45页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
·主要试剂与材料 | 第39页 |
·常用溶液和培养基 | 第39-45页 |
2 方法 | 第45-58页 |
·分子克隆 | 第45-48页 |
·毕赤酵母相关实验 | 第48-53页 |
·蛋白质性质研究方法 | 第53-56页 |
·计算机辅助分析与设计 | 第56-58页 |
结果与分析 | 第58-79页 |
1 重组蛋 rHBc149-12A10的表达与鉴定 | 第58-65页 |
·引物设计 | 第58页 |
·目的基因的扩增 | 第58-59页 |
·重组质粒的构建 | 第59-61页 |
·酵母转化与转化子筛选 | 第61-62页 |
·重组蛋白的诱导表达 | 第62-63页 |
·酵母免疫荧光 | 第63-65页 |
2 重组菌株表达条件优化与蛋白纯化 | 第65-74页 |
·培养基对重组菌株生长与分泌表达的影响 | 第65-67页 |
·诱导甲醇浓度对重组菌株生长与分泌表达的影响 | 第67-68页 |
·初始诱导pH值对重组菌株的生长与分泌表达的影响 | 第68-69页 |
·诱导温度对重组菌株的生长与分泌表达的影响 | 第69-71页 |
·交试验优化诱导条件 | 第71-72页 |
·重组蛋白rHBc149-12A10的纯化 | 第72-74页 |
3 重组蛋 rHBc-12A10的性质研究 | 第74-79页 |
·CsCl密度梯度离心分析 | 第74-75页 |
·透射电镜观察 | 第75页 |
·重组颗粒rHBc149-12A10的免疫原性 | 第75-76页 |
·免疫阻断实验 | 第76-77页 |
·重组颗粒rHBc149-12A10与p239呈递12A10表位的比较 | 第77-79页 |
讨论 | 第79-84页 |
1 毕赤酵母的分泌表达 | 第79-80页 |
2 毕赤酵母的培养条件 | 第80-82页 |
3 HBcAg作为免疫载体的优势 | 第82-84页 |
小结与展望 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
附录 | 第100页 |