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赤霞珠葡萄叶片中以白藜芦醇为底物的代谢酶的研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 前言第10-25页
 1 白藜芦醇概述第10-15页
   ·白藜芦醇简述第10-11页
   ·Res诱导及生物合成第11-13页
     ·影响Res合成的内在因素第11-12页
     ·影响Res合成的外部因素第12-13页
   ·Res的生物活性第13-15页
     ·抗癌作用第13页
     ·抗菌、抗病毒作用第13-14页
     ·抗心血管疾病第14页
     ·消炎第14-15页
     ·免疫作用第15页
     ·雌激素样作用第15页
 2 Res衍生物的研究进展第15-22页
   ·Res衍生物的基本结构第16-18页
     ·Res聚合体第16页
     ·羟基类似物第16-17页
     ·甲基化衍生物第17页
     ·酯类衍生物第17-18页
     ·其他第18页
   ·Res衍生物生物活性第18-21页
     ·Res聚合体的生物活性第18-19页
     ·Res羟基衍生物的生物活性第19页
     ·Res甲基化衍生物的生物活性第19-20页
     ·Res酯类衍生物的生物活性第20页
     ·其他第20-21页
   ·Res及其衍生物的检测分析第21-22页
     ·定性检测第21页
     ·定量检测第21-22页
 3 Res及其衍生物的合成代谢研究进展第22-24页
   ·Res及其衍生物的合成途径第22-23页
   ·Res代谢酶的推测第23-24页
 4 研究目的及意义第24-25页
第二章 白藜芦醇及其衍生物检测方法与提取方法的建立第25-37页
 1 材料与方法第25-28页
   ·材料、试剂及仪器第25-26页
     ·实验材料第25页
     ·实验仪器第25-26页
     ·实验标样及试剂第26页
   ·实验方法第26-28页
     ·葡萄叶片的紫外处理第26页
     ·Res及其衍生物的提取第26页
     ·色谱条件第26-27页
     ·Res二聚体(δ-viniferin)的制备第27页
     ·Res及其衍生物标准溶液的制备第27-28页
 2 结果与分析第28-34页
   ·Res及其衍生物分析方法的建立第28-33页
     ·色谱条件的优化第28-30页
     ·提取条件的优化第30-31页
     ·线性分析、检出限与回收率第31-33页
   ·Res聚合体(δ-viniferin)标准样品的制备第33-34页
   ·样品的检测与分析第34页
 3 紫外诱导后不同避光时间对Res及其衍生物的影响第34-35页
 4 本章小结第35-37页
第三章 代谢白藜芦醇的多酚氧化酶的纯化研究第37-50页
 1 材料与方法第37-42页
   ·材料、仪器及试剂第37-38页
     ·实验材料第37页
     ·实验仪器第37页
     ·实验试剂第37-38页
   ·实验方法第38-42页
     ·提取粗酶第38页
     ·透析第38页
     ·离子交换柱(Q-Sepharose FF)层析第38-39页
     ·疏水亲和柱(Butyl-Sepharose FF)层析第39页
     ·酶反应第39页
     ·蛋白浓度检测第39-40页
     ·Res及其衍生物的检测(HPLC)第40页
     ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第40-41页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第41-42页
 2 结果与分析第42-49页
   ·酶反应体系中Res及其衍生物的检测分析第42-45页
   ·离子交换柱(Q-Sepharose FF)层析第45-46页
   ·疏水亲和柱(Butyl-Sepharose FF)层析第46-47页
   ·酶的纯度鉴定第47-48页
   ·多酚氧化酶的纯度鉴定第48-49页
 3 讨论第49页
 4 本章小结第49-50页
第四章 过氧化物酶代谢白藜芦醇的机制研究第50-67页
 1 材料与方法第50-54页
   ·材料、试剂及仪器第50-51页
     ·实验材料第50-51页
     ·实验仪器第51页
     ·实验试剂第51页
   ·实验方法第51-54页
     ·材料的处理第51页
     ·葡萄叶片中过氧化物酶粗酶的提取、总酶活及其蛋白的测定第51-52页
     ·葡萄叶片中可溶性过氧化物酶和结合态过氧化物酶的提取及蛋白的测定第52页
     ·酶反应及其反应体系中白藜芦醇及其衍生物HPLC检测第52页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第52-53页
     ·抑制剂材料的处理第53页
     ·过氧化氢含量的测定第53-54页
     ·白藜芦醇及其衍生物的提取与检测第54页
 2 结果与分析第54-64页
   ·紫外处理后不同避光时间对过氧化物酶总酶活的影响第54页
   ·可溶性过氧化物酶和结合态过氧化物酶反应体系中白藜芦醇及其衍生物的分析第54-58页
   ·可溶性过氧化物酶和结合态过氧化物酶同功酶电泳分析第58-60页
   ·紫外处理对H_2O_2的影响第60-61页
   ·不同抑制剂处理对H_2O_2含量和过氧化物酶活性的影响第61-62页
   ·不同抑制处理对Res及其二聚体(ε-viniferin、δ-viniferin)含量的影响第62-63页
   ·H_2O_2清除剂对白藜芦醇及其二聚体(ε-viniferin、δ-viniferin)含量的影响第63-64页
 3 讨论第64-66页
 4 本章小结第66-67页
结语第67-69页
 1 结论与创新第67页
 2 研究中尚未解决的问题第67-68页
 3 展望第68-69页
参考文献第69-78页
缩写词说明第78-79页
附录1:实验仪器第79-80页
附录2:实验试剂与标准样品第80-81页
个人简历第81页
在读期间发表论文及论著情况第81-82页
致谢第82页

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