蝎神经性毒素ANEP、AGAP的原核表达及毒力测定
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 绪论 | 第7-13页 |
| ·课题背景 | 第7-13页 |
| ·蝎神经性毒素的研究进展 | 第7-8页 |
| ·蝎昆虫毒素在生物防治上的研究 | 第8-9页 |
| ·蝎昆虫毒素的作用机理与分类 | 第9-10页 |
| ·表达载体 pJUTRX | 第10页 |
| ·基因表达类型 | 第10-11页 |
| ·基因表达系统 | 第11页 |
| ·抗神经兴奋肽 ANEP | 第11-13页 |
| 2 重组质粒的原核表达 | 第13-28页 |
| ·试验材料 | 第13-14页 |
| ·菌株与质粒 | 第13页 |
| ·细菌 LB 培养基 | 第13页 |
| ·氨苄青霉素(100mg/ml) | 第13-14页 |
| ·主要溶液试剂 | 第14页 |
| ·主要仪器设备 | 第14页 |
| ·技术路线与试验方法 | 第14-21页 |
| ·试验路线 | 第14-15页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第15页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌 BL-21 | 第15页 |
| ·重组质粒的小量制备 | 第15-16页 |
| ·重组菌的筛选 | 第16-17页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第17页 |
| ·重组蛋白表达条件优化设计 | 第17-18页 |
| ·SDS-聚丙烯凝胶电泳分析诱导时间过程及表达量 | 第18-20页 |
| ·Antheprot 蛋白质分析 | 第20页 |
| ·BandScan 分析目的蛋白表达量 | 第20-21页 |
| ·结果与分析 | 第21-27页 |
| ·Antheprot 蛋白分子量 | 第21页 |
| ·重组质粒转化大肠杆菌 BL-21 | 第21页 |
| ·PCR 扩增结果 | 第21-22页 |
| ·重组蛋白表达结果与 SDS-聚丙烯凝胶电泳分析 | 第22-24页 |
| ·重组蛋白最佳表达条件 | 第24-27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 3 蝎昆虫毒素的毒力 | 第28-40页 |
| ·试验材料与设备 | 第28页 |
| ·试验主要材料 | 第28页 |
| ·试验试剂 | 第28页 |
| ·供试昆虫 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-30页 |
| ·目的蛋白的大量表达 | 第28页 |
| ·目的蛋白的裂解 | 第28-29页 |
| ·毒力测定 | 第29页 |
| ·试验数据分析 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-40页 |
| ·对分月扇舟蛾幼虫的毒力 | 第30-33页 |
| ·榆紫叶甲的毒力测定 | 第33-36页 |
| ·落叶松毛虫幼虫毒力测定 | 第36-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 附录 | 第46-48页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
