| 中文摘要 | 第1-12页 |
| 英文摘要 | 第12-14页 |
| 1 引言 | 第14-36页 |
| ·猪流感的发生与流行概况 | 第14-15页 |
| ·猪流感病毒的种间传播及其公共卫生学意义 | 第15-16页 |
| ·猪流感病毒概况 | 第16页 |
| ·流感病毒HA的作用 | 第16-20页 |
| ·HA与病毒的致病力 | 第16-18页 |
| ·HA在基因工程疫苗研究中的作用 | 第18-19页 |
| ·基于流感病毒HA的基因工程疫苗的研究进展 | 第19-20页 |
| ·猪流感疫苗的研究进展 | 第20-24页 |
| ·全病毒灭活疫苗 | 第20-21页 |
| ·亚单位疫苗 | 第21-22页 |
| ·病毒活载体疫苗 | 第22-23页 |
| ·DNA疫苗 | 第23页 |
| ·猪流感疫苗小结 | 第23-24页 |
| ·增强DNA疫苗免疫效果的研究策略 | 第24-28页 |
| ·DNA疫苗的发现及其特点 | 第24页 |
| ·DNA疫苗可能的作用机制 | 第24-25页 |
| ·优化DNA疫苗的接种方法和途径 | 第25-26页 |
| ·CpG-ODN佐剂 | 第26页 |
| ·合理使用细胞因子佐剂 | 第26-27页 |
| ·抗原靶向APC的分子佐剂 | 第27-28页 |
| ·泛素佐剂 | 第28页 |
| ·VP22在DNA疫苗中的应用 | 第28页 |
| ·分子佐剂C3d的研究进展 | 第28-32页 |
| ·C3d的分子结构 | 第29页 |
| ·C3d的受体CR2 | 第29页 |
| ·C3d分子对免疫应答的增强作用 | 第29-30页 |
| ·C3d分子对免疫应答的抑制作用 | 第30页 |
| ·C3d分子佐剂可能的作用机制 | 第30-32页 |
| ·C3d分子小结 | 第32页 |
| ·Prime-boost免疫策略研究进展 | 第32-34页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第34-36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-45页 |
| ·毒株、细胞和阳性血清 | 第36页 |
| ·质粒和受体卤 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·主要溶液的配制 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR扩增小鼠和猪补体C3d基因 | 第38-39页 |
| ·融合表达HA与C3d3真核表达载体的构建 | 第39页 |
| ·质粒DNA的大量制备与纯化 | 第39-41页 |
| ·Western blot检测重组蛋白在293T细胞中的表达 | 第41页 |
| ·BALB/c小鼠的免疫和攻毒试验 | 第41-43页 |
| ·终点稀释ELISA检测抗HA的抗体水平 | 第43页 |
| ·硫氰酸盐洗脱法检测抗体亲和力 | 第43页 |
| ·血凝抑制试验和微量中和试验 | 第43页 |
| ·淋巴细胞增殖试验 | 第43页 |
| ·细胞因子的检测 | 第43-44页 |
| ·攻毒后小鼠肺脏中病毒的分离 | 第44页 |
| ·攻毒后小鼠主要脏器的病毒粒子检测及病理学观察 | 第44页 |
| ·间接免疫荧光试验检测病毒在组织中的分布 | 第44页 |
| ·统计学分析 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-62页 |
| ·小鼠和猪补体C3d基因的扩增 | 第45-46页 |
| ·表达不同形式HA的重组质粒的构建与鉴定 | 第46-47页 |
| ·Western blot检测HA的体外表达 | 第47页 |
| ·质粒DNA三次免疫对小鼠的免疫效力评价 | 第47-56页 |
| ·终点稀释ELISA检测免疫小鼠的血清抗体 | 第47-48页 |
| ·抗体亲和力的检测 | 第48页 |
| ·血凝抑制试验和中和试验结果 | 第48-50页 |
| ·淋巴细胞增殖试验结果 | 第50-51页 |
| ·细胞因子IL-4和IFN-γ检测结果 | 第51-52页 |
| ·攻毒后不同时间病毒分离结果 | 第52页 |
| ·IFA检测病毒在脏器中的分布 | 第52-53页 |
| ·主要脏器的病理学观察 | 第53-56页 |
| ·质粒DNA初免rPRV-HA加强免疫对小鼠的免疫效力评价 | 第56-62页 |
| ·终点稀释ELISA检测免疫小鼠的血清抗体 | 第56-57页 |
| ·血凝抑制试验和中和试验检测抗体 | 第57-58页 |
| ·细胞因子IL-4和IFN-γ检测结果 | 第58-59页 |
| ·攻毒后不同时间病毒分离结果 | 第59页 |
| ·IFA检测病毒在脏器中的分布 | 第59页 |
| ·主要脏器的病理学观察 | 第59-62页 |
| 4 讨论 | 第62-66页 |
| ·猪流感基因工程疫苗的研究 | 第62页 |
| ·流感病毒HA的表达型对免疫应答的影响 | 第62-63页 |
| ·流感病毒异源免疫(HSI)的研究 | 第63-64页 |
| ·C3d作为分子佐剂的作用机制 | 第64页 |
| ·小鼠动物模型评价猪源C3d(sC3d)的免疫增强作用 | 第64页 |
| ·Prime-boost免疫策略的应用 | 第64-65页 |
| ·评价流感疫苗的小鼠动物模型 | 第65-66页 |
| 5 结论 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-83页 |
| 附录 | 第83-87页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第87页 |
