| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 PCD的发现 | 第12-13页 |
| 1.2 PCD的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.2.1 动物细胞中的PCD | 第13页 |
| 1.2.2 植物细胞中的PCD | 第13-14页 |
| 1.2.3 PCD的特征 | 第14-15页 |
| 1.3 植物光合系统中细胞色素c与质体蓝素PCs | 第15-16页 |
| 1.3.1 细胞色素c(Cytc) | 第15页 |
| 1.3.2 质体蓝素(PCs) | 第15-16页 |
| 1.4 研究的目的意义和主要研究内容 | 第16-19页 |
| 1.4.1 研究目的意义 | 第16-17页 |
| 1.4.2 主要研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 稳定表达载体和诱导表达载体的构建 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 宿主菌和质粒载体 | 第19-20页 |
| 2.2 实验试剂、仪器和工具 | 第20-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-32页 |
| 2.3.1 获得目的基因 | 第22-25页 |
| 2.3.2 将目的基因构建在pMD~(TM)18-T Vector上 | 第25-28页 |
| 2.3.3 将目的基因构建在pB003和pTA7002上 | 第28-32页 |
| 2.4 研究结果与讨论 | 第32-34页 |
| 2.4.1 PC1、PC2、Cytc6和GFP蛋白基因的搜索 | 第32页 |
| 2.4.2 植物总RNA提取分析评估 | 第32-33页 |
| 2.4.3 构建载体过程中的所有核酸鉴定结果 | 第33-34页 |
| 2.5 本章小结 | 第34-36页 |
| 第三章 获得转基因植物材料 | 第36-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第36页 |
| 3.1.2 宿主菌 | 第36页 |
| 3.2 实验试剂、仪器和工具 | 第36-41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-45页 |
| 3.3.1 将构建成功的载体转化至根瘤农杆菌 | 第41页 |
| 3.3.2 浸染拟南芥植株 | 第41-42页 |
| 3.3.3 筛选转基因植株 | 第42-43页 |
| 3.3.4 转基因植株DNA水平鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.5 转基因植株蛋白水平(Western blotting)鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.6 激光共聚焦对GFP融合蛋白的鉴定 | 第45页 |
| 3.4 研究结果与讨论 | 第45-53页 |
| 3.4.1 转化至GV3101后PCR检测 | 第45-46页 |
| 3.4.2 转基因植株筛选结果 | 第46-53页 |
| 3.5 本章小结 | 第53-55页 |
| 第四章 Cytc6突变体种子的鉴定及抗体制备 | 第55-68页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第55页 |
| 4.1.2 动物材料 | 第55页 |
| 4.1.3 宿主菌和质粒载体 | 第55-56页 |
| 4.2 实验试剂、仪器和工具 | 第56-58页 |
| 4.3 实验方法 | 第58-64页 |
| 4.3.1 Cytc6突变体种子的鉴定 | 第58-60页 |
| 4.3.2 Cytc6抗体的制备 | 第60-64页 |
| 4.4 研究结果与讨论 | 第64-66页 |
| 4.4.1 杂合T-DNA插入植株的DNA水平鉴定结果 | 第64-65页 |
| 4.4.2 纯合T-DNA插入植株的RNA水平鉴定结果 | 第65-66页 |
| 4.4.3 SDA-PAGE检测蛋白纯度 | 第66页 |
| 4.5 本章小结 | 第66-68页 |
| 第五章 鉴定转基因植物的表型 | 第68-76页 |
| 5.1 实验材料 | 第68页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第68页 |
| 5.2 实验试剂、仪器和工具 | 第68-69页 |
| 5.3 实验方法 | 第69-70页 |
| 5.3.1 用水杨酸处理拟南芥叶片 | 第69页 |
| 5.3.2 播种19种转基因植株的种子 | 第69-70页 |
| 5.4 研究结果与讨论 | 第70-74页 |
| 5.4.1 水杨酸处理拟南芥叶片表型记录 | 第70-71页 |
| 5.4.2 稳定型表达植株的表型统计结果 | 第71-72页 |
| 5.4.3 用地塞米松处理拟南芥叶片 | 第72-74页 |
| 5.5 本章小结 | 第74-76页 |
| 结论 | 第76-79页 |
| 1 主要研究成果 | 第76-77页 |
| 1.1 稳定型表达载体和诱导型表达载体的构建 | 第76页 |
| 1.2 转基因植株的获得以及表型的观察 | 第76-77页 |
| 1.3 Cytc6 T-DNA插入突变体种子的鉴定 | 第77页 |
| 1.4 Cytc6抗体的制备 | 第77页 |
| 1.5 水杨酸SA对col和突变体pete1、pete2中单线态氧的验证 | 第77页 |
| 1.6 DEX诱导pTA7002相关转基因植株 | 第77页 |
| 2 下一步研究计划 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 附录一 感受态细胞的制备 | 第83-85页 |
| 1. DH5A感受态细胞的制备 | 第83页 |
| 2. GV3101感受态细胞的制备 | 第83-84页 |
| 3. BL-21感受态细胞的制备 | 第84-85页 |
| 附录二 引物设计 | 第85-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
