| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| ·呼肠孤病毒的研究现状 | 第12-17页 |
| ·呼肠孤病毒科简介 | 第12页 |
| ·禽呼肠孤病毒简介 | 第12-15页 |
| ·番鸭呼肠孤病毒的研究现状 | 第15-17页 |
| ·免疫酶技术的研究进展 | 第17-22页 |
| ·发展史 | 第17-18页 |
| ·免疫酶技术的分类 | 第18-19页 |
| ·免疫酶技术的原理 | 第19页 |
| ·酶结合物研究进展 | 第19-21页 |
| ·酶免疫技术的应用 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·病毒 | 第23页 |
| ·实验动物 | 第23页 |
| ·血清 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·溶液配制 | 第24-25页 |
| ·引物 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-35页 |
| ·病毒的增殖及RNA的提取 | 第27页 |
| ·病毒RNA反转录合成cDNA | 第27页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第27-28页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第28页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第28-30页 |
| ·序列分析 | 第30-31页 |
| ·sC基因的原核表达 | 第31-32页 |
| ·表达产物s C蛋白的生物学活性检测 | 第32页 |
| ·sC重组蛋白的提取及纯化 | 第32-33页 |
| ·蛋白浓度的测定及保存 | 第33页 |
| ·纯化蛋白的检测 | 第33页 |
| ·间接ELISA操作程序 | 第33-34页 |
| ·sC-ELISA检测方法的初步建立 | 第34页 |
| ·sC-ELISA敏感性试验 | 第34页 |
| ·sC-ELISA特异性试验 | 第34页 |
| ·sC-ELISA的应用 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-48页 |
| ·RT-PCR扩增及鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·S组基因RT-PCR扩增结果 | 第35页 |
| ·用于原核表达的sC基因RT-PCR扩增及鉴定结果 | 第35-36页 |
| ·s A/s B/s NS/s C编码基因序列分析 | 第36-41页 |
| ·DRV和其它正呼肠孤病毒的系统进化关系 | 第41-42页 |
| ·表达载体的构建及鉴定结果 | 第42-43页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE和Western Blotting分析 | 第43页 |
| ·纯化蛋白的SDS-PAGE及Western-blotting检测 | 第43-44页 |
| ·sC-ELISA检测方法的初步建立结果 | 第44-46页 |
| ·最适封闭液及封闭时间的确定 | 第44-45页 |
| ·抗原最佳包被浓度的确定 | 第45页 |
| ·最佳血清稀释度及工作时间的确定 | 第45-46页 |
| ·酶标二抗最佳作用时间的确定 | 第46页 |
| ·间接ELISA最佳显色时间的确定 | 第46页 |
| ·sC-ELISA敏感性试验结果 | 第46-47页 |
| ·间接ELISA特异性试验结果 | 第47页 |
| ·sC-ELISA的应用结果 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
