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致猪水肿病大肠杆菌二重PCR检测方法及三价灭活菌苗研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词(Abbreviation)第11-12页
1. 文献综述第12-21页
   ·猪水肿病病原第12-15页
     ·猪水肿病病原的发现第12页
     ·致猪水肿病大肠杆菌的特征第12页
     ·致猪水肿病大肠杆菌的毒力因子第12-15页
   ·猪水肿病流行病学第15页
   ·猪水肿病发病机理及影响因素第15-17页
     ·免疫能力第15-16页
     ·营养水平第16页
     ·遗传抗性第16-17页
   ·临床症状及剖检病变第17页
   ·猪水肿病的诊断第17-18页
     ·病原菌的分离与检测第17-18页
     ·免疫学检测第18页
   ·猪水肿病的药物治疗第18页
   ·猪水肿病的免疫预防第18-21页
     ·传统疫苗第18-19页
     ·亚单位疫苗第19页
     ·基因工程疫苗第19-21页
2. 目的和意义第21-22页
3. 材料与方法第22-32页
   ·材料第22-23页
     ·病料来源第22页
     ·细菌菌种和待检菌株第22页
     ·对照血清和O抗原定型血清第22页
     ·主要试剂及溶液配置第22-23页
     ·主要实验器材第23页
     ·试验动物第23页
   ·方法第23-32页
     ·病原菌的分离、鉴定第23-24页
     ·PCR检测方法的建立第24-25页
     ·PCR检测方法的应用第25页
     ·致猪水肿病大肠杆菌血清型鉴定及药敏试验第25-26页
     ·致猪水肿病大肠杆菌培养特性的研究第26-27页
     ·动物感染试验及疫苗菌株筛选第27-28页
     ·猪水肿病灭活菌苗菌种的研究第28-29页
     ·猪水肿病灭活疫苗的实验室制备第29-30页
     ·猪水肿病灭活菌苗的安全性试验第30页
     ·猪水肿病灭活菌苗免疫效力检验第30-31页
     ·病理切片的制作与观察第31页
     ·猪水肿病灭活菌苗免疫期及抗体消长第31-32页
4. 结果与分析第32-49页
   ·致病性大肠杆菌的分离鉴定结果第32页
   ·PCR检测方法的建立及应用第32-35页
     ·热裂解法与菌液直接扩增法的比较第32页
     ·单一PCR方法与二重PCR方法的优化第32-34页
     ·PCR反应的特异性和灵敏性第34-35页
     ·在鉴别诊断中的应用第35页
   ·致猪水肿病大肠杆菌血清分型及药敏试验第35-37页
     ·致猪水肿病大肠杆菌的血清型鉴定第35页
     ·致猪水肿病大肠杆菌药敏试验结果第35-37页
   ·致猪水肿病大肠杆菌培养特性的研究第37-41页
     ·致猪水肿病大肠杆菌培养基第37-38页
     ·致猪水肿病大肠杆菌生长曲线第38-40页
     ·致猪水肿病大肠杆菌的菌种保存第40页
     ·致猪水肿病大肠杆菌在不同溶液中的存活时间第40-41页
   ·致猪水肿病大肠杆菌动物毒力试验及疫苗菌株的筛选第41-43页
     ·SPF级昆明小鼠感染试验第41页
     ·疫苗候选菌株的筛选第41-42页
     ·仔猪感染试验第42-43页
   ·灭活菌苗菌种的研究第43-45页
     ·菌种的纯粹性检验第43页
     ·基础菌种的培养、生化鉴定、毒力基因和血清学特性第43页
     ·菌种毒力稳定性测定第43-44页
     ·菌种免疫原性稳定性测定第44-45页
   ·猪水肿病灭活菌苗安全性试验第45-47页
     ·SPF级昆明小鼠接种的安全性第45页
     ·断奶仔猪接种的安全性第45-46页
     ·哺乳仔猪一次单剂量接种的安全性第46页
     ·哺乳仔猪一次超剂量接种的安全性第46-47页
   ·灭活菌苗效力检验、免疫期及抗体消长规律测定试验第47-49页
     ·仔猪二免后14日后攻毒试验第47页
     ·不同试验组猪在攻毒后的病理学观察第47-48页
     ·灭活疫苗免疫期及抗体消长测定第48-49页
5. 讨论与结论第49-53页
   ·讨论第49-51页
     ·致猪水肿病大肠杆菌二重PCR检测方法第49页
     ·致猪水肿病大肠杆菌分离鉴定和药敏试验第49-50页
     ·猪水肿病灭活疫苗的研究第50-51页
   ·结论第51-53页
参考文献第53-59页
附录1第59-61页
附录2第61-62页
致谢第62页

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