| 缩略语表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-36页 |
| 1 小球藻研究概况 | 第11-17页 |
| ·小球藻的分类和形态结构 | 第11-12页 |
| ·小球藻属的分子生物学研究 | 第12-17页 |
| ·小球藻属的应用研究 | 第17页 |
| 2 嗜冷微生物研究进展 | 第17-34页 |
| ·嗜冷生物的多样性 | 第17-18页 |
| ·嗜冷生物的有关定义 | 第18-20页 |
| ·嗜冷生物对寒冷环境的适应机理 | 第20-33页 |
| ·嗜冷微生物的应用 | 第33-34页 |
| 3 本研究的目的和总体设计 | 第34-36页 |
| 第二章抑制性差减文库的构建及差异表达基因的筛选 | 第36-61页 |
| 1 材料与方法 | 第37-49页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| ·试剂和酶 | 第37-38页 |
| ·藻株和培养条件 | 第38页 |
| ·总RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·mRNA 的分离 | 第39页 |
| ·差减cDNA 文库构建 | 第39-45页 |
| ·差减cDNA 克隆的筛选 | 第45-47页 |
| ·阳性克隆cDNA 片段测序及序列分析 | 第47页 |
| ·Northern 杂交检验差异表达基因 | 第47-49页 |
| 2 结果与分析 | 第49-58页 |
| ·总RNA 的提取 | 第49-50页 |
| ·mRNA 的分离 | 第50页 |
| ·Driver cDNA 和Tester cDNA 的制备 | 第50页 |
| ·4℃和20℃小球藻南极株NJ-7 双向差减cDNA 文库的构建 | 第50-52页 |
| ·差减cDNA 文库的差减效率检测 | 第52-53页 |
| ·差减cDNA 克隆的筛选 | 第53-55页 |
| ·阳性克隆cDNA 片段测序及序列分析 | 第55-56页 |
| ·差异表达基因的Northern 杂交检测 | 第56-58页 |
| 3 讨论 | 第58-61页 |
| 第三章 几个已知功能基因全长cDNA 及基因组DNA 序列的分离与特征 | 第61-83页 |
| 1 材料与方法 | 第61-65页 |
| ·藻株和培养条件 | 第61页 |
| ·总RNA 的提取和mRNA 的分离 | 第61页 |
| ·cDNA 模板合成 | 第61-62页 |
| ·引物设计 | 第62-63页 |
| ·RACE 反应 | 第63-64页 |
| ·PCR 产物的回收、克隆与测序 | 第64页 |
| ·序列分析 | 第64页 |
| ·从Cosmid 基因组文库中钓取全长基因序列 | 第64页 |
| ·分子进化树的构建 | 第64-65页 |
| ·小球藻南极株NJ-7 和温带株UTEX-259 放氧活性测定 | 第65页 |
| ·比较小球藻南极株NJ-7 和温带株UTEX-259 中基因的表达模式. | 第65页 |
| 2 结果 | 第65-80页 |
| ·差异表达基因片段的RACE 扩增结果 | 第65-66页 |
| ·NJ7hiC6 与NJ7hiC12 cDNA 序列及分析 | 第66-69页 |
| ·NJ7thi 基因全长cDNA 序列及分析 | 第69-71页 |
| ·NJ7hsp 基因全长cDNA 序列及分析 | 第71-74页 |
| ·NJ7L10A 的全长cDNA 序列及分析 | 第74-76页 |
| ·几个新基因全长cDNA 序列的获得 | 第76-77页 |
| ·从Cosmid 文库中筛选全长基因 | 第77-78页 |
| ·小球藻南极株和温带株的放氧活性 | 第78-79页 |
| ·几个基因在小球藻南极株和温带株中的表达模式 | 第79-80页 |
| 3 讨论 | 第80-83页 |
| 第四章 两个抗冻蛋白基因在莱茵衣藻中的表达 | 第83-102页 |
| 1 材料和方法 | 第84-89页 |
| ·藻株和培养条件 | 第84页 |
| ·质粒与菌株 | 第84页 |
| ·工具酶和分子生物学试剂 | 第84页 |
| ·莱茵衣藻DNA 的提取 | 第84-85页 |
| ·启动子的克隆 | 第85页 |
| ·NJ7hiC6 和NJ7hiC12 全长基因的克隆 | 第85-86页 |
| ·转基因载体的构建 | 第86页 |
| ·莱茵衣藻遗传转化 | 第86-87页 |
| ·转基因衣藻的PCR 检测 | 第87页 |
| ·NJ7hiC6 与NJ7hiC12 蛋白抗血清的制备 | 第87-88页 |
| ·莱茵衣藻总蛋白的提取 | 第88-89页 |
| ·Western blot 检测衣藻转化子 | 第89页 |
| 2 结果 | 第89-99页 |
| ·转基因载体的构建 | 第89-95页 |
| ·转化子的获得 | 第95页 |
| ·转基因衣藻的PCR 鉴定 | 第95-96页 |
| ·转基因衣藻的Western blot 鉴定 | 第96-99页 |
| 3 讨论 | 第99-102页 |
| 参考文献 | 第102-124页 |
| 附录 | 第124-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
