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蛙虹彩病毒RGV一个膜蛋白基因的鉴定

中文摘要第1-4页
英文摘要第4-8页
第一章 文献综述第8-21页
   ·虹彩病毒的特性和分类第8-10页
   ·蛙虹彩病毒的复制第10-13页
     ·病毒的吸附、进入和脱壳第10-11页
     ·病毒DNA的复制第11页
     ·病毒的转录及翻译第11-12页
     ·病毒的装配与释放第12-13页
   ·蛙虹彩病毒与宿主细胞的相互作用第13-14页
   ·病毒蛋白的特性第14-15页
   ·病毒膜蛋白的特性及功能第15-16页
   ·病毒膜蛋白的体外表达第16-17页
   ·本研究的背景及研究目的第17-18页
 实验材料第18-21页
第二章 蛙虹彩病毒RGV9506 MMP 基因的克隆及序列分析第21-30页
   ·方法第21-23页
     ·MMP 基因的克隆及序列分析第21页
     ·PCR 片断的回收与载体连接第21-22页
     ·转化感受态细胞第22页
     ·阳性克隆的筛选及MMP 基因的序列测定第22页
     ·序列同源性、多序列比对分析及遗传进化树的绘制第22-23页
   ·结果第23-29页
     ·RGV9506 MMP 基因的扩增第23-24页
     ·MMP 序列及翻译第24-25页
     ·蛋白同源性及多重序列比对结果第25-27页
     ·跨膜结构域的预测第27-28页
     ·系统进化树分析结果第28-29页
   ·讨论第29-30页
第三章 蛙虹彩病毒RGV9506 MMP 基因的特征分析第30-47页
   ·方法第30-37页
     ·原核表达载体的构建第30-32页
       ·PCR扩增MMP基因第30页
       ·酶切第30页
       ·连接第30-31页
       ·质粒的提取第31-32页
     ·MMP 原核表达及鉴定第32页
     ·抗血清的制备第32-33页
       ·蛋白制备第32页
       ·蛋白纯化第32-33页
       ·免疫第33页
     ·Western blot 分析第33-34页
     ·RGV MMP蛋白在细胞内分布的检测第34页
     ·Western blot分析病毒MMP蛋白第34-35页
       ·病毒纯化第34-35页
       ·Western blot分析第35页
     ·RT-PCR检测MMP基因及Western blot分析第35-36页
       ·RNA 的提取第35页
       ·RT-PCR 扩增MMP基因第35-36页
       ·Western blot 分析第36页
     ·药物抑制蛋白合成和病毒DNA 复制的实验第36页
     ·真核表达分析第36-37页
       ·重组真核表达质粒的构建第36-37页
       ·重组真核表达质粒在FHM 细胞中的表达第37页
   ·结果第37-46页
     ·PCR 扩增MMP 基因第37页
     ·构建的原核重组质粒第37-39页
     ·诱导表达结果第39页
     ·Western blot 分析结果第39页
     ·MMP蛋白在细胞内分布的检测第39-41页
     ·Western blot分析病毒MMP蛋白第41页
     ·MMP 基因时序表达的RT-PCR 和Western Blot 分析第41页
     ·药物抑制蛋白合成和病毒DNA 复制的实验第41-44页
     ·真核表达分析第44-46页
       ·PCR 扩增MMP 基因第44页
       ·构建的真核重组质粒第44-45页
       ·MMP 基因在FHM 细胞中的表达第45-46页
   ·讨论第46-47页
小结第47-48页
参考文献第48-53页
致谢第53页

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