中文摘要 | 第1-4页 |
英文摘要 | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-21页 |
·虹彩病毒的特性和分类 | 第8-10页 |
·蛙虹彩病毒的复制 | 第10-13页 |
·病毒的吸附、进入和脱壳 | 第10-11页 |
·病毒DNA的复制 | 第11页 |
·病毒的转录及翻译 | 第11-12页 |
·病毒的装配与释放 | 第12-13页 |
·蛙虹彩病毒与宿主细胞的相互作用 | 第13-14页 |
·病毒蛋白的特性 | 第14-15页 |
·病毒膜蛋白的特性及功能 | 第15-16页 |
·病毒膜蛋白的体外表达 | 第16-17页 |
·本研究的背景及研究目的 | 第17-18页 |
实验材料 | 第18-21页 |
第二章 蛙虹彩病毒RGV9506 MMP 基因的克隆及序列分析 | 第21-30页 |
·方法 | 第21-23页 |
·MMP 基因的克隆及序列分析 | 第21页 |
·PCR 片断的回收与载体连接 | 第21-22页 |
·转化感受态细胞 | 第22页 |
·阳性克隆的筛选及MMP 基因的序列测定 | 第22页 |
·序列同源性、多序列比对分析及遗传进化树的绘制 | 第22-23页 |
·结果 | 第23-29页 |
·RGV9506 MMP 基因的扩增 | 第23-24页 |
·MMP 序列及翻译 | 第24-25页 |
·蛋白同源性及多重序列比对结果 | 第25-27页 |
·跨膜结构域的预测 | 第27-28页 |
·系统进化树分析结果 | 第28-29页 |
·讨论 | 第29-30页 |
第三章 蛙虹彩病毒RGV9506 MMP 基因的特征分析 | 第30-47页 |
·方法 | 第30-37页 |
·原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
·PCR扩增MMP基因 | 第30页 |
·酶切 | 第30页 |
·连接 | 第30-31页 |
·质粒的提取 | 第31-32页 |
·MMP 原核表达及鉴定 | 第32页 |
·抗血清的制备 | 第32-33页 |
·蛋白制备 | 第32页 |
·蛋白纯化 | 第32-33页 |
·免疫 | 第33页 |
·Western blot 分析 | 第33-34页 |
·RGV MMP蛋白在细胞内分布的检测 | 第34页 |
·Western blot分析病毒MMP蛋白 | 第34-35页 |
·病毒纯化 | 第34-35页 |
·Western blot分析 | 第35页 |
·RT-PCR检测MMP基因及Western blot分析 | 第35-36页 |
·RNA 的提取 | 第35页 |
·RT-PCR 扩增MMP基因 | 第35-36页 |
·Western blot 分析 | 第36页 |
·药物抑制蛋白合成和病毒DNA 复制的实验 | 第36页 |
·真核表达分析 | 第36-37页 |
·重组真核表达质粒的构建 | 第36-37页 |
·重组真核表达质粒在FHM 细胞中的表达 | 第37页 |
·结果 | 第37-46页 |
·PCR 扩增MMP 基因 | 第37页 |
·构建的原核重组质粒 | 第37-39页 |
·诱导表达结果 | 第39页 |
·Western blot 分析结果 | 第39页 |
·MMP蛋白在细胞内分布的检测 | 第39-41页 |
·Western blot分析病毒MMP蛋白 | 第41页 |
·MMP 基因时序表达的RT-PCR 和Western Blot 分析 | 第41页 |
·药物抑制蛋白合成和病毒DNA 复制的实验 | 第41-44页 |
·真核表达分析 | 第44-46页 |
·PCR 扩增MMP 基因 | 第44页 |
·构建的真核重组质粒 | 第44-45页 |
·MMP 基因在FHM 细胞中的表达 | 第45-46页 |
·讨论 | 第46-47页 |
小结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
致谢 | 第53页 |