| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-30页 |
| ·转基因生物的安全性 | 第12-13页 |
| ·转基因生物 | 第12页 |
| ·转基因生物的安全管理现状 | 第12-13页 |
| ·转基因作物现状 | 第13-14页 |
| ·转基因玉米研究进展 | 第14-15页 |
| ·抗虫转基因玉米 | 第14页 |
| ·转基因玉米中的外源基因 | 第14-15页 |
| ·转基因作物的检测 | 第15-23页 |
| ·核酸检测方法 | 第15-20页 |
| ·定性PCR | 第15-16页 |
| ·定量PCR | 第16-18页 |
| ·多重PCR | 第18-19页 |
| ·巢式PCR 和半巢式PCR | 第19页 |
| ·基因芯片技术 | 第19-20页 |
| ·蛋白质检测方法 | 第20-22页 |
| ·ELISA | 第20-21页 |
| ·侧流试纸条检测(Lateral Flow strip) | 第21页 |
| ·Western 杂交 | 第21-22页 |
| ·其它检测方法 | 第22-23页 |
| ·色谱法 | 第22页 |
| ·近红外光谱法 | 第22页 |
| ·生物传感器法 | 第22页 |
| ·微装置系统 | 第22-23页 |
| ·纳米转基因检测技术 | 第23页 |
| ·Southern Blot 法 | 第23页 |
| ·荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization) | 第23页 |
| ·几种商品化的转基因玉米质粒图谱信息平台的构建 | 第23-24页 |
| ·转基因植物中侧翼序列获得方法的研究 | 第24-28页 |
| ·热不对称交错PCR(TAIL-PCR ) | 第24-26页 |
| ·反向PCR(I-PCR) | 第26页 |
| ·捕获PCR(Capture PCR) | 第26页 |
| ·T 接头PCR (T-linker PCR) | 第26-28页 |
| ·标准物质的研制 | 第28-30页 |
| ·标准物质简介 | 第28页 |
| ·质粒标准分子 | 第28-30页 |
| ·质粒标准分子研制方法 | 第28-29页 |
| ·质粒标准分子的作用 | 第29-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-52页 |
| ·材料 | 第30-34页 |
| ·转基因材料 | 第30页 |
| ·非转基因材料 | 第30页 |
| ·酶和生化试剂 | 第30-31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·实验室所配置试剂 | 第31-33页 |
| ·玉米叶片基因组提取液 | 第32页 |
| ·玉米种子基因组提取液 | 第32-33页 |
| ·主要仪器 | 第33-34页 |
| ·方法 | 第34-52页 |
| ·提取玉米叶片组织基因组的方法 | 第34-37页 |
| ·方法一 | 第34页 |
| ·方法二 | 第34-35页 |
| ·方法三 | 第35页 |
| ·方法四 | 第35页 |
| ·方法五 | 第35-36页 |
| ·方法六 | 第36页 |
| ·方法七 | 第36-37页 |
| ·方法八 | 第37页 |
| ·提取玉米种子基因组的方法 | 第37-40页 |
| ·方法一 | 第37-38页 |
| ·方法二 | 第38页 |
| ·方法三 | 第38-39页 |
| ·方法四 | 第39页 |
| ·方法五 | 第39-40页 |
| ·重组质粒的转化 | 第40页 |
| ·MON810 转基因元件的检测 | 第40-41页 |
| ·SS Ⅱb 基因的检测 | 第40-41页 |
| ·CaMV35S启动子的检测 | 第41页 |
| ·hsp70 基因的检测 | 第41页 |
| ·cry1Ab 基因的检测 | 第41页 |
| ·扩增MON810 5′侧翼序列 | 第41-43页 |
| ·Tail-PCR 获得MON810 5′侧翼序列 | 第41-42页 |
| ·反向PCR（I-PCR）获得MON810 5′侧翼序列 | 第42-43页 |
| ·构建适于MON810 检测的标准质粒 | 第43-49页 |
| ·扩增小片段 | 第44页 |
| ·重叠延伸mt-mp35S 片段与mhsp-mcry1Ab 片段 | 第44-47页 |
| ·重叠延伸mt-mp35S-mhsp-mcry1Ab 大片段 | 第47-48页 |
| ·重叠延伸的mt-mp35S-mhsp-mcry1Ab 大片段转化宿主菌 | 第48页 |
| ·玉米内标基因连接重组载体 | 第48-49页 |
| ·以标准质粒为阳性标准品检测MON810 | 第49-50页 |
| ·检测cry1Ab | 第49-50页 |
| ·检测MON810 转化事件 | 第50页 |
| ·荧光定量 PCR 检测 | 第50-52页 |
| ·稀释标准质粒 | 第50页 |
| ·鉴定检测极限（LOD）和定量极限（LOQ） | 第50页 |
| ·建立标准曲线和重复性分析 | 第50页 |
| ·校正系数的确定 | 第50-51页 |
| ·定量实际样品 | 第51-52页 |
| 3 结果和分析 | 第52-69页 |
| ·玉米叶片组织基因组的提取及质量鉴定结果 | 第52-54页 |
| ·玉米种子基因组的提取及质量鉴定结果 | 第54-57页 |
| ·MON810 转基因元件检测结果 | 第57-58页 |
| ·获得MON810 的左边界序列 | 第58-60页 |
| ·Tail-PCR 的方法获得侧翼序列 | 第58-59页 |
| ·反向PCR（I-PCR）的方法获得侧翼序列 | 第59-60页 |
| ·MON810 标准质粒的构建结果 | 第60-63页 |
| ·以标准质粒为阳性标准品对 MON810 定性检测结果 | 第63-64页 |
| ·荧光定量检测 | 第64-69页 |
| ·检测极限和定量极限的鉴定结果 | 第64-65页 |
| ·标准曲线的建立 | 第65-68页 |
| ·实际样品的检测结果 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-73页 |
| 5 结论 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
