摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
1 海水鱼类主要弧菌毒力相关基因的研究进展 | 第13-21页 |
·鳗弧菌主要毒力相关基因 | 第13-16页 |
·哈维氏弧菌和费氏弧菌的毒力相关基因 | 第16-17页 |
·副溶血弧菌和溶藻胶弧菌的毒力相关基因 | 第17页 |
·灿烂弧菌的毒力相关基因 | 第17-18页 |
参考文献 | 第18-21页 |
2 基因芯片在细菌鉴定和致病力检测上的应用 | 第21-26页 |
·传统检测方法 | 第21页 |
·基因芯片检测技术 | 第21-24页 |
·基因芯片在细菌鉴定上的应用 | 第22-23页 |
·基因芯片在细菌毒力基因检测上的应用 | 第23-24页 |
参考文献 | 第24-26页 |
3 海水病原弧菌拮抗菌的筛选和鉴定 | 第26-41页 |
·材料与方法 | 第26-30页 |
·材料 | 第26页 |
·拮抗菌的初筛 | 第26-27页 |
·弧菌拮抗菌的复筛 | 第27页 |
·拮抗菌溶血性试验 | 第27页 |
·拮抗菌急性毒性感染试验 | 第27-28页 |
·革兰氏染色 | 第28页 |
·生理生化测定 | 第28-29页 |
·拮抗菌的165 rRNA 序列测定 | 第29页 |
·细菌总DNA 的提取 | 第29-30页 |
·结果 | 第30-37页 |
·初筛结果 | 第30页 |
·复筛结果 | 第30-31页 |
·溶血性试验结果 | 第31页 |
·急性感染试验结果 | 第31页 |
·革兰氏染色结果 | 第31页 |
·生理生化试验结果 | 第31-33页 |
·菌落PCR 电泳结果 | 第33页 |
·系统发育分析 | 第33-34页 |
·16S rRNA 的系统发育树的构建 | 第34-35页 |
·PCR 检测减毒鳗弧菌的毒力相关基因 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-41页 |
4 鱼类主要病原弧菌的毒力基因检测膜芯片的设计和验证 | 第41-61页 |
·寡核苷酸探针和引物的设计 | 第41-48页 |
·文章的检索 | 第41页 |
·序列的检索 | 第41-42页 |
·毒力基因的同源性比对 | 第42-44页 |
·165 rRNA 的同源性比对 | 第44-45页 |
·序列的取舍与加工 | 第45页 |
·探针和引物的设计 | 第45-48页 |
·材料与方法 | 第48-52页 |
·菌株 | 第48页 |
·膜芯片的制备 | 第48-49页 |
·细菌总DNA 的提取 | 第49页 |
·从病鱼样品中提取总DNA | 第49-50页 |
·目的序列地高辛标记的PCR 扩增 | 第50页 |
·标记产物的纯化和定量 | 第50-51页 |
·杂交和检测 | 第51-52页 |
·杂交时间优化 | 第52页 |
·芯片灵敏度试验 | 第52页 |
·样品的毒力基因检测 | 第52页 |
·结果 | 第52-58页 |
·用基因特异性引物同步PCR 扩增地高辛标记的目的序列 | 第52-53页 |
·地高辛标记的产量 | 第53-54页 |
·芯片用于六种弧菌的鉴别 | 第54-56页 |
·芯片用于六种弧菌的毒力基因的检测 | 第56-57页 |
·芯片用于弧菌检测的灵敏度 | 第57-58页 |
·芯片杂交时间优化结果 | 第58页 |
·芯片用于病原检测的结果 | 第58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
小结 | 第61-62页 |
附录 | 第62-65页 |
致谢 | 第65-66页 |