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海水鱼类主要弧菌鉴定和毒力基因检测的膜芯片技术

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-13页
1 海水鱼类主要弧菌毒力相关基因的研究进展第13-21页
   ·鳗弧菌主要毒力相关基因第13-16页
   ·哈维氏弧菌和费氏弧菌的毒力相关基因第16-17页
   ·副溶血弧菌和溶藻胶弧菌的毒力相关基因第17页
   ·灿烂弧菌的毒力相关基因第17-18页
 参考文献第18-21页
2 基因芯片在细菌鉴定和致病力检测上的应用第21-26页
   ·传统检测方法第21页
   ·基因芯片检测技术第21-24页
     ·基因芯片在细菌鉴定上的应用第22-23页
     ·基因芯片在细菌毒力基因检测上的应用第23-24页
 参考文献第24-26页
3 海水病原弧菌拮抗菌的筛选和鉴定第26-41页
   ·材料与方法第26-30页
     ·材料第26页
     ·拮抗菌的初筛第26-27页
     ·弧菌拮抗菌的复筛第27页
     ·拮抗菌溶血性试验第27页
     ·拮抗菌急性毒性感染试验第27-28页
     ·革兰氏染色第28页
     ·生理生化测定第28-29页
     ·拮抗菌的165 rRNA 序列测定第29页
     ·细菌总DNA 的提取第29-30页
   ·结果第30-37页
     ·初筛结果第30页
     ·复筛结果第30-31页
     ·溶血性试验结果第31页
     ·急性感染试验结果第31页
     ·革兰氏染色结果第31页
     ·生理生化试验结果第31-33页
     ·菌落PCR 电泳结果第33页
     ·系统发育分析第33-34页
     ·16S rRNA 的系统发育树的构建第34-35页
     ·PCR 检测减毒鳗弧菌的毒力相关基因第35-37页
   ·讨论第37-38页
 参考文献第38-41页
4 鱼类主要病原弧菌的毒力基因检测膜芯片的设计和验证第41-61页
   ·寡核苷酸探针和引物的设计第41-48页
     ·文章的检索第41页
     ·序列的检索第41-42页
     ·毒力基因的同源性比对第42-44页
     ·165 rRNA 的同源性比对第44-45页
     ·序列的取舍与加工第45页
     ·探针和引物的设计第45-48页
   ·材料与方法第48-52页
     ·菌株第48页
     ·膜芯片的制备第48-49页
     ·细菌总DNA 的提取第49页
     ·从病鱼样品中提取总DNA第49-50页
     ·目的序列地高辛标记的PCR 扩增第50页
     ·标记产物的纯化和定量第50-51页
     ·杂交和检测第51-52页
     ·杂交时间优化第52页
     ·芯片灵敏度试验第52页
     ·样品的毒力基因检测第52页
   ·结果第52-58页
     ·用基因特异性引物同步PCR 扩增地高辛标记的目的序列第52-53页
     ·地高辛标记的产量第53-54页
     ·芯片用于六种弧菌的鉴别第54-56页
     ·芯片用于六种弧菌的毒力基因的检测第56-57页
     ·芯片用于弧菌检测的灵敏度第57-58页
     ·芯片杂交时间优化结果第58页
     ·芯片用于病原检测的结果第58页
   ·讨论第58-59页
 参考文献第59-61页
小结第61-62页
附录第62-65页
致谢第65-66页

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