| 摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-10页 |
| 第一部分：AA005诱导细胞死亡机制的研究 | 第10-42页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| 一、引言 | 第11-26页 |
| 1. 化学生物学或化学遗传学(chemical biology or chemical genetics) | 第11-14页 |
| ·正向化学遗传学(forward chemical genetics) | 第12-14页 |
| ·反向化学遗传学(reverse chemical genetics) | 第14页 |
| 2. 细胞死亡(cell death) | 第14-22页 |
| ·细胞凋亡(apoptosis)及其调控机制 | 第15-17页 |
| ·细胞坏死(necrosis) | 第17页 |
| ·Necroptosis (Caspase 被抑制的一种坏死机制) | 第17-18页 |
| ·细胞自噬(autophagy) | 第18-20页 |
| ·细胞周期、细胞死亡和细胞癌变的关系 | 第20-22页 |
| 3. 番荔枝内酯化合物及其衍生物AA005 | 第22-26页 |
| ·番荔枝内酯的结构特征 | 第22页 |
| ·生理活性 | 第22-24页 |
| ·作用机制 | 第24页 |
| ·AA005 | 第24-26页 |
| 二、材料与方法 | 第26-30页 |
| 1. 实验材料与试剂 | 第26页 |
| 2. AA005 的合成过程 | 第26页 |
| 3. Sub-G1 期DNA 检测 | 第26-27页 |
| 4. MTT 检测 | 第27页 |
| 5. M30-PI 双染实验 | 第27页 |
| 6. 构建失活的p53 稳定细胞株AER | 第27页 |
| 7. SDS-PAGE 和Western 印迹分析 | 第27-28页 |
| 8. 用DAPI 染色检测细胞的通透性 | 第28页 |
| 9. JC-1 检测细胞内线粒体膜电势差(△ψm)的变化 | 第28页 |
| 10. 对AGS 细胞的氧消耗水平的检测 | 第28-29页 |
| 11. 线粒体的还原型NADH 水平的检测 | 第29-30页 |
| 三、实验结果 | 第30-40页 |
| 1. AA005 细胞毒性的检测 | 第30-31页 |
| 2. AA005 对细胞膜的通透性和线粒体膜电位的改变的检测 | 第31-33页 |
| 3. AA005 诱导的细胞死亡 | 第33-35页 |
| 4. AA005 对AGS 细胞氧消耗的抑制 | 第35-37页 |
| 5. AA005 在胞外系统中对线粒体电子呼吸链的抑制 | 第37-40页 |
| 四、结论与讨论 | 第40-42页 |
| 1. AA005 诱导的细胞死亡主要是细胞坏死，部分为p53 不依赖的细胞凋亡 | 第40页 |
| 2. AA005 通过抑制线粒体电子呼吸链复合物 I 诱导细胞死亡 | 第40-42页 |
| 第二部分：AA005选择性杀死癌细胞的分子机制的研究 | 第42-98页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| 一、引言 | 第43-52页 |
| 1. 药物的运输(drug transport) | 第44-46页 |
| ·被动运输(passive transport) | 第44-45页 |
| ·主动运输(active transport) | 第45页 |
| ·内吞作用与外排作用(endocytosis 与exocytosis) | 第45-46页 |
| 2. 药物运输蛋白(drug transporter) | 第46-48页 |
| ·有机阴离子转运多肽(organic anion-transporting polypeptide, OATP) | 第46页 |
| ·有机阳离子转运多肽(organic cation transporters, OCT) | 第46-47页 |
| ·癌的多药耐药抗性(MDR)和P-糖蛋白(p-glycoprotein) | 第47-48页 |
| 3. 葡萄糖转运受体(glucose transporter)的运输特性及其与癌症的关系 | 第48-52页 |
| 二、材料与方法 | 第52-59页 |
| 1. 实验材料与试剂 | 第52-53页 |
| 2. 细胞活性检测 | 第53页 |
| 3. 体内检测AA005 的抗肿瘤活性 | 第53页 |
| 4. SDS-PAGE 和Western 印迹分析 | 第53页 |
| 5. glut4 及caveolin-1 基因表达的抑制 | 第53-55页 |
| 6. 亚细胞组分分离 | 第55-56页 |
| ·质膜膜苔实验(plasma membrane lawn assay) | 第55-56页 |
| ·差速离心结合密度梯度离心分离细胞膜组分 | 第56页 |
| 7. 荧光检测进入细胞的AA005-fluorecein 的量 | 第56-57页 |
| 8. 细胞内的AA005 的质谱定量分析 | 第57-59页 |
| 三、实验结果 | 第59-91页 |
| 1. AA005 选择性杀死癌性细胞的活性 | 第59-63页 |
| 2. AA005 体内选择性杀肿瘤的活性 | 第63-66页 |
| 3. 更多AA005 进入癌性细胞 | 第66-70页 |
| 4. 葡萄糖对AA005 运输的影响 | 第70-75页 |
| 5. Na~+-葡萄糖共转运受体抑制剂根皮苷(phlorizin)对AA005 效应的影响.. | 第75-78页 |
| 6. PI(3)K/Akt 信号通路依赖的AA005 抗癌细胞活性 | 第78-81页 |
| 7. GLUT4 参与AA005 的选择性杀死癌性细胞的活性 | 第81-86页 |
| 8. GLUT4 的定位及caveolae 在AA005 选择性杀死癌性细胞的作用 | 第86-91页 |
| 四、结论与讨论 | 第91-98页 |
| 1. 葡萄糖运输蛋白GLUT4 参与AA005 选择性诱导癌细胞死亡 | 第91-92页 |
| 2. 葡萄糖竞争性抑制GLUT4 介导的AA005 运输模型 | 第92-95页 |
| 3. 癌性细胞和非癌性细胞对AA005 运输能力差别导致其效应差别 | 第95-96页 |
| 4. 癌细胞与正常细胞间能量代谢的差别在癌症诊断中的应用及对癌症治疗的提示 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-108页 |
| 附录 | 第108-128页 |
| 1. AA005 的合成过程 | 第108-115页 |
| 2. EB 选择性诱导癌性细胞死亡 | 第115-121页 |
| 3. Cytochrome c 的释放及Bax 的移位不一定诱导细胞走向凋亡 | 第121-128页 |
| 已发表及待发表文章目录 | 第128-129页 |
| 致谢 | 第129-130页 |
