中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
研究论文 | 第12-46页 |
第一章 转生长激素中华倒刺鲃的构建和导入检测 | 第12-34页 |
引言 | 第12-13页 |
1. 材料与方法 | 第13-24页 |
·材料和试剂 | 第13-14页 |
·实验材料 | 第13页 |
·基因材料 | 第13页 |
·主要药品与试剂 | 第13页 |
·主要实验仪器 | 第13-14页 |
·实验方法 | 第14-24页 |
·质粒的提取及纯化 | 第14-15页 |
·质粒检测 | 第15-16页 |
·质粒的检测 | 第15-16页 |
·凝胶电泳 | 第16页 |
·质粒大量酶切线性化 | 第16-17页 |
·中华倒刺鲃性产物的采集、基因导入及鱼苗培育 | 第17-19页 |
·实验鱼性产物的采集 | 第17-18页 |
·精子在保存液中与重组质粒pFV2cfGHc保温及受精作用 | 第18页 |
·转基因中华倒刺鲃鱼苗、鱼种的培育 | 第18-19页 |
·转基因中华倒刺鲃的导入检测 | 第19-24页 |
·鱼基因组总 DNA提取方法的比较 | 第19-23页 |
·使用组织基因组 DNA抽提实际盒提取组织基因组 DNA | 第19-20页 |
·使用血液基因组 DNA抽提试剂盒提取血液基因组 DNA | 第20-21页 |
·组织基因组 DNA的手工提取 | 第21-22页 |
·血液基因组 DNA的手工提取 | 第22-23页 |
·基因组 DNA的质量分析 | 第23页 |
·电泳分析 | 第23页 |
·紫外检测 | 第23页 |
·引物的设计与合成 | 第23页 |
·PCR反应体系及循环程序设置 | 第23-24页 |
·生长指标测定 | 第24页 |
2. 结果与分析 | 第24-31页 |
·质粒的提取与检测 | 第24-25页 |
·重组质粒pFV2cfGHc酶切验证 | 第24-25页 |
·重组质粒pFV2cfGHc PCR反应检测 | 第25页 |
·鱼基因组总DNA的提取 | 第25-26页 |
·PCR检测结果 | 第26-27页 |
·转基因中华倒刺鲃的基因导入率统计 | 第27页 |
·转基因中华倒刺鲃的生长指标测定 | 第27-31页 |
3. 讨论 | 第31-34页 |
·鱼类基因组 DNA提取方法的选择 | 第31页 |
·精子载体法—一种基因转移常用的方法 | 第31-33页 |
·精子载体法的基本原理 | 第31-32页 |
·精子载体法的优缺点 | 第32页 |
·本实验的研究结果 | 第32-33页 |
·生长指标测定结果分析 | 第33-34页 |
第二章 转生长激素中华倒刺鲃的外源基因表达检测 | 第34-46页 |
引言 | 第34-35页 |
1. 材料与方法 | 第35-41页 |
·实验材料 | 第35页 |
·主要的实验材料和试剂 | 第35页 |
·主要的实验仪器 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-41页 |
·脑组织中总 RNA提取 | 第35-38页 |
·玻璃器皿及塑料制品的处理 | 第35-36页 |
·试剂 | 第36-37页 |
·异硫氰酸胍法提取脑组织总RNA | 第37页 |
·TRI REAGENT试剂盒提取脑组织总RNA | 第37-38页 |
·浓度和纯度检测 | 第38页 |
·血液中总 RNA的提取 | 第38-40页 |
·试剂 | 第39页 |
·淋巴细胞提取 | 第39页 |
·血液总RNA的提取 | 第39-40页 |
·浓度和纯度检测 | 第40页 |
·RT-PCR引物的设计 | 第40页 |
·cDNA的合成 | 第40-41页 |
·PCR反应 | 第41页 |
2. 实验结果与分析 | 第41-43页 |
·总 RNA提取质量分析 | 第41-43页 |
·RT-PCR的扩增结果 | 第43页 |
3. 讨论 | 第43-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
在校期间论文发表情况 | 第50-52页 |
文献综述 | 第52-78页 |
转基因鱼的研究进展及其展望 | 第52-75页 |
参考文献 | 第75-78页 |