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酵母ALD4、克氏肺炎杆菌dhaB和dhaT的克隆及表达

中文摘要第1-3页
ABSTRACT第3-7页
第一章 文献综述第7-21页
   ·3-羟基丙酸(3-HP)和1,3-丙二醇(1,3-PD)简介第7-14页
     ·3-羟基丙酸(3-HP)第7-11页
     ·1,3-丙二醇第11-14页
   ·甘油脱水酶、醛脱氢酶和1,3-丙二醇氧化还原酶第14-19页
     ·甘油脱水酶第14-18页
     ·醛脱氢酶第18-19页
     ·1,3-丙二醇氧化还原酶第19页
   ·本课题的研究目的及其内容第19-20页
     ·本课题的研究目的第19页
     ·本课题的研究内容第19-20页
   ·技术路线第20-21页
第二章 实验材料与方法第21-37页
   ·实验材料第21-27页
     ·菌株与质粒第21-22页
     ·主要试剂第22-23页
     ·主要设备及仪器第23-24页
     ·培养基的配制第24页
     ·质粒提取所需溶液的配制第24-25页
     ·蛋白质浓度测定用试剂第25页
     ·酶活测定用试剂的配制第25-26页
     ·SDS-PAGE所需试剂的配制第26-27页
   ·实验方法第27-37页
     ·菌体培养第27-28页
     ·考马斯亮蓝G-250 染色测定蛋白质浓度第28-29页
     ·SDS—聚丙烯酰氨凝胶电泳第29-30页
     ·甘油脱水酶酶活测定第30-31页
     ·1,3-丙二醇氧化还原酶酶活测定第31-32页
     ·醛脱氢酶酶活测定第32页
     ·PCR反应第32-34页
     ·酶切反应第34页
     ·DNA琼脂糖凝胶电泳第34-35页
     ·琼脂糖凝胶电泳中DNA片段的回收第35页
     ·核酸的乙醇沉淀纯化、回收第35页
     ·连接反应第35页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第35页
     ·大肠杆菌感受态细胞转化与转化子的筛选第35页
     ·SDS-碱裂解法提取大肠杆菌质粒第35-37页
第三章 实验结果与讨论第37-48页
   ·甘油脱水酶基因的克隆及表达第37-40页
     ·dhaB基因的克隆第37-38页
     ·dhaB基因的表达第38-40页
   ·1,3-丙二醇氧化还原酶基因的克隆及表达第40-43页
     ·dhaT-orfX基因的克隆第40-42页
     ·dhaT-orfX基因的表达第42-43页
   ·醛脱氢酶基因(ALD4)的克隆及表达第43-46页
     ·ALD4 基因的克隆第43-45页
     ·醛脱氢酶基因(ALD4)的表达第45-46页
   ·酶活水平与文献值的比较及分析第46-48页
第四章 结论与展望第48-50页
   ·结论第48-49页
     ·甘油脱水酶及其基因第48页
     ·1,3-丙二醇氧化还原酶及其基因第48页
     ·醛脱氢酶及其基因第48页
     ·酶活水平第48-49页
   ·展望第49-50页
参考文献第50-56页
附录1:文中涉及到的重组质粒图谱第56-58页
附录2:标准曲线第58-59页
附录3:pBAD30-ALD4 测序结果第59-60页
附录4:pET-28a(+)-dhaT-orfX测序结果第60-61页
附录5:pET-28a(+)-dhaB测序结果第61-64页
发表论文和科研情况说明第64-65页
致谢第65页

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