摘要 | 第1-13页 |
Abstract | 第13-17页 |
第一章 文献综述 | 第17-47页 |
·棉花基因工程与基因转化研究进展 | 第17-39页 |
·棉花的遗传转化方法 | 第17-25页 |
·农杆菌介导法 | 第18-19页 |
·基因枪法 | 第19-20页 |
·花粉管通道法 | 第20-24页 |
·子房注射法 | 第21-22页 |
·真空渗透转化法 | 第22-23页 |
·柱头滴加法 | 第23-24页 |
·农杆枪法 | 第24页 |
·低能离子束介导的遗传转化 | 第24-25页 |
·棉花遗传转化的主要成就 | 第25-28页 |
·抗虫基因工程 | 第25页 |
·抗病基因工程 | 第25-27页 |
·抗除草剂基因工程 | 第27-28页 |
·纤维品种基因工程 | 第28页 |
·抗非生物逆境基因工程 | 第28页 |
·棉花抗除草剂基因工程及其应用 | 第28-34页 |
·棉花主要除草剂及其除草机理 | 第29-31页 |
·草甘膦 | 第29-30页 |
·草丁膦 | 第30页 |
·溴苯腈 | 第30页 |
·2,4-D | 第30页 |
·阿特拉津 | 第30-31页 |
·磺胺脲类除草剂和咪唑啉酮除草剂 | 第31页 |
·棉花抗除草剂基因的转化 | 第31-33页 |
·抗草甘膦棉花基因工程 | 第31-32页 |
·抗草丁膦棉花基因工程 | 第32页 |
·抗2,4-D棉花基因工程 | 第32-33页 |
·抗溴苯腈棉花基因工程 | 第33页 |
·抗其它类型除草剂棉花基因工程 | 第33页 |
·抗除草剂转基因棉花的应用 | 第33-34页 |
·转基因棉花外源基因的遗传与表达 | 第34-38页 |
·外源基因的整合特征 | 第34-35页 |
·基因沉默 | 第35-37页 |
·基因沉默的分类 | 第35-36页 |
·基因沉默的机制 | 第36-37页 |
·转基因棉花的遗传稳定性与外源基因表达 | 第37-38页 |
·棉花基因转化存在的问题 | 第38-39页 |
·棉花耐盐性机理和遗传改良研究进展 | 第39-46页 |
·棉花的耐盐性 | 第39-40页 |
·棉花的耐盐机理 | 第40-43页 |
·植株体内离子分布与平衡 | 第40-41页 |
·活性氧清除系统与酶活性 | 第41-42页 |
·渗透调节作用 | 第42-43页 |
·无机渗透调节机制 | 第42页 |
·有机渗透调节机制 | 第42-43页 |
·棉花耐盐品种的改良 | 第43-46页 |
·杂交育种 | 第43页 |
·远缘杂交 | 第43页 |
·体细胞突变体筛选 | 第43-44页 |
·分子育种与基因工程 | 第44-46页 |
·本论文研究内容及目的意义 | 第46-47页 |
第二章 棉花转基因方法的改良及其转化效率效果的研究 | 第47-75页 |
·材料和方法 | 第48-58页 |
·农杆菌菌株和受体材料 | 第48页 |
·生化试剂 | 第48-49页 |
·培养基 | 第49-50页 |
·细菌培养基 | 第49页 |
·植物培养基 | 第49-50页 |
·转化方法 | 第50-54页 |
·农杆菌培养和质粒DNA提取 | 第50-52页 |
·子房注射质粒DNA(方法Ⅰ) | 第52页 |
·花粉粒农杆菌转染法(方法Ⅱ) | 第52-53页 |
·花粉萌发培养基 | 第52页 |
·转化方法 | 第52-53页 |
·农杆菌点滴柱头法(方法Ⅲ) | 第53页 |
·茎尖分生组织农杆菌介导法(方法Ⅳ) | 第53-54页 |
·茎尖分生组织制备 | 第53页 |
·农杆菌与茎尖分生组织共培养 | 第53页 |
·转化植株的筛选 | 第53-54页 |
·转化植株再生 | 第54页 |
·转基因棉苗的筛选和鉴定 | 第54页 |
·PCR检测 | 第54-56页 |
·棉花DNA的快速微量提取 | 第54-55页 |
·PCR扩增 | 第55-56页 |
·Southern杂交检测 | 第56-57页 |
·用于Southern杂交的高质量DNA提取 | 第56页 |
·Southern杂交方法 | 第56-57页 |
·农杆菌残留检测 | 第57页 |
·转基因植株农艺性状与抗性遗传 | 第57-58页 |
·结果与分析 | 第58-70页 |
·Basta涂抹鉴定的可靠性评价 | 第58-61页 |
·Basta最佳使用浓度的筛选 | 第58-59页 |
·PCR验证 | 第59-60页 |
·Southern验证 | 第60-61页 |
·农杆菌残留检测 | 第61页 |
·四种转化方法的改良效果研究 | 第61-67页 |
·子房注射法的改良效果 | 第61-62页 |
·花粉粒农杆菌转染法及其转化效果 | 第62-64页 |
·农杆菌点滴柱头法及其转化效果 | 第64-65页 |
·茎尖分生组织农杆菌介导法及其效果 | 第65-66页 |
·不同转化方法的效率比较 | 第66-67页 |
·转基因植株抗Basta性状的遗传分析 | 第67-69页 |
·转Bar基因棉花农艺性状和纤维品质分析 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-75页 |
第三章 棉花BADH和AtNHX1基因的遗传转化及其耐盐性研究 | 第75-103页 |
·材料与方法 | 第77-83页 |
·受体棉花品种 | 第77页 |
·菌株和载体质粒 | 第77-78页 |
·相关试剂 | 第78页 |
·试验方法 | 第78-79页 |
·大肠杆菌质粒DNA的大量制备 | 第78-79页 |
·基因转化方法 | 第79页 |
·转基因棉花的初步筛选 | 第79-80页 |
·转BADH棉花植株的卡那霉素筛选 | 第79页 |
·转AtNHX1和BADH基因棉花的耐盐性筛选 | 第79-80页 |
·转基因棉花的分子检测 | 第80-82页 |
·PCR检测 | 第80-81页 |
·转化植株的Southern杂交 | 第81-82页 |
·转基因棉花外源基因遗传分析 | 第82页 |
·转基因棉花耐盐性及其农艺性状鉴定 | 第82-83页 |
·结果与分析 | 第83-99页 |
·BADH和AtNHX1基因子房注射效果 | 第83-84页 |
·转基因棉花植株的筛选与鉴定 | 第84-91页 |
·卡那霉素抗性筛选 | 第84-86页 |
·耐NaCl筛选 | 第86页 |
·耐盐性筛选 | 第86-87页 |
·PCR扩增和筛选 | 第87-89页 |
·Southern杂交检测 | 第89-91页 |
·转BADH和AtNHX1基因棉花的耐盐性鉴定 | 第91-92页 |
·转BADH基因棉花的外源基因遗传分析 | 第92-95页 |
·转BADH基因棉花各世代的外源基因分离情况 | 第92-93页 |
·转BADH基因棉花外源基因遗传分析 | 第93-95页 |
·转BADH和AtNHX1基因棉花的农艺性状和纤维品质 | 第95-99页 |
·转基因植株T_0代调查结果 | 第95-97页 |
·转基因植株T_1代的田间农艺性状和纤维品质调查结果 | 第97-99页 |
·讨论 | 第99-103页 |
第四章 转Bar基因种质系在杂交棉纯度控制中的利用 | 第103-122页 |
·材料与方法 | 第104-106页 |
·试验材料 | 第104-105页 |
·方法 | 第105-106页 |
·结果与分析 | 第106-119页 |
·抗除草剂杂交组合的杂种优势表现 | 第106-114页 |
·田间抗性鉴定除草剂浓度筛选 | 第114-115页 |
·转Bar基因棉花在杂交棉纯度鉴定和纯度控制中的应用 | 第115-116页 |
·不同来源的杂交棉种子纯度鉴定 | 第116-117页 |
·种子纯度与产量表现 | 第117-118页 |
·棉种纯度与纤维品质表现 | 第118-119页 |
·讨论 | 第119-122页 |
·利用抗除草剂基因进行田间控制杂交棉纯度 | 第119-120页 |
·转Bar基因对F_1代杂种群体性状和杂种优势的影响 | 第120-121页 |
·转Bar基因作物的安全性问题 | 第121-122页 |
第五章 全文小结 | 第122-127页 |
1.农杆菌感染花粉粒转化技术的建立 | 第122页 |
2.四种不同棉花外源基因转化方法的比较 | 第122-123页 |
3.抗除草剂转Bar基因棉花种质系的创造 | 第123页 |
4.转Bar基因棉花的抗Basta遗传分析 | 第123页 |
5.转Bar基因棉花的生物学表达特性分析 | 第123-124页 |
6.转BADH基因和转AtNHX1基因耐盐棉花种材料的创造 | 第124页 |
7.转BADH基因棉花的T_1和T_2代标记基因的遗传分析 | 第124页 |
8.转BADH基因和转AtNHX1棉花的生物学表达特性分析 | 第124-125页 |
9.抗除草剂转和抗虫转基因杂交棉组合的杂种优势分析 | 第125页 |
10.转Bar基因棉花种质系在杂交棉纯度控制中的利用 | 第125-126页 |
11.本研究需要进一步改进的地方 | 第126-127页 |
参考文献 | 第127-142页 |
缩略词表 | 第142-143页 |