摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
前言 | 第11-12页 |
1. 研究现状及立题依据 | 第12-31页 |
·立题意义与立体背景 | 第12-27页 |
·中药材活性成分含量变异研究现状 | 第12-14页 |
·基因与活性成分含量变异的相关性研究现状 | 第14-16页 |
·药用植物基因多态性的研究方法 | 第16-17页 |
·药用植物基因多态性研究现状 | 第17-21页 |
·基因表达研究方法及现状 | 第21-23页 |
·甘草酸的生合成及其关键酶基因研究现状 | 第23-27页 |
·研究内容、研究目标、技术路线和拟解决的关键问题 | 第27-31页 |
·研究内容 | 第27-28页 |
·研究目标和拟解决的关键问题 | 第28-29页 |
·技术路线 | 第29-31页 |
2. ITS序列多态性和甘草酸形成的相关性研究 | 第31-49页 |
·材料、试剂和仪器 | 第31-33页 |
·实验材料 | 第31-32页 |
·常规试剂及其配制 | 第32页 |
·DNA提取、检测、ITS序列扩增相关试剂 | 第32页 |
·主要仪器和设备 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33-36页 |
·基因组DNA的提取和纯化 | 第33-34页 |
·DNA的检测 | 第34页 |
·PCR扩增反应体系及其优化 | 第34页 |
·引物设计 | 第34-35页 |
·PCR产物的回收、纯化 | 第35页 |
·序列测定 | 第35-36页 |
·序列排列和分析 | 第36页 |
·实验结果 | 第36-42页 |
·总DNA的质量 | 第36-37页 |
·优化的PCR反应条件 | 第37-39页 |
·PCR产物的纯化 | 第39页 |
·甘草属植物的ITS序列 | 第39-42页 |
·分析与讨论 | 第42-48页 |
·ITS序列特征 | 第42-44页 |
·ITS序列多态性和甘草酸形成的关系 | 第44-45页 |
·5.85 rRNA序列多态性和甘草酸形成的关系 | 第45-46页 |
·甘草酸组内ITS序列多态性分析 | 第46-47页 |
·蜜腺甘草、黄甘草可做为药用甘草使用 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
3 Β-香树酯醇合成酶基因多态性与甘草酸形成相关性研究 | 第49-61页 |
·材料和方法 | 第49-50页 |
·实验材料、试剂和仪器 | 第49-50页 |
·实验方法 | 第50页 |
·引物设计 | 第50页 |
·实验结果 | 第50-54页 |
·DNA质量 | 第50页 |
·PCR扩增反应体系的优化 | 第50-52页 |
·PCR扩增程序的优化 | 第52-53页 |
·测序结果 | 第53-54页 |
·讨论与分析 | 第54-59页 |
·β-香树酯醇合成酶基因序列特征分析 | 第54-56页 |
·β-香树酯醇合成酶基因多态性和甘草酸形成的相关性 | 第56页 |
·β-香树酯醇合成酶基因多态性和甘草酸积累的相关性 | 第56-57页 |
·β-香树酯醇合成酶氨基酸序列特征 | 第57-58页 |
·β-香树酯醇合成酶氨基酸序列多态性和甘草酸形成的相关性 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-61页 |
4 ITS序列和甘草酸积累的相关性研究 | 第61-72页 |
·不同种群(产地)甘草中甘草酸含量研究 | 第61-65页 |
·材料、试剂、标准品和仪器 | 第61-62页 |
·实验方法 | 第62-65页 |
·实验结果 | 第65页 |
·不同种群(甘草)的ITS序列分析 | 第65-69页 |
·材料、试剂和仪器 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-67页 |
·实验结果 | 第67-69页 |
·分析与讨论 | 第69-71页 |
·非特异条带产生的原因及去除 | 第69-70页 |
·ITS序列和甘草酸含量变化的关系 | 第70-71页 |
·小结 | 第71-72页 |
5 Β-香树酯醇合成酶基因多态性和甘草酸积累的相关性研究 | 第72-94页 |
·材料与方法 | 第72-73页 |
·实验材料 | 第72-73页 |
·实验方法 | 第73页 |
·实验结果 | 第73-76页 |
·DNA质量 | 第73-74页 |
·优化的PCR条件 | 第74页 |
·β-香树酯醇合成酶基因测序结果 | 第74-76页 |
·分析与讨论 | 第76-92页 |
·β-香树酯醇合成酶基因特征分析 | 第76-80页 |
·β-香树酯醇合成酶基因多态性及聚类 | 第80-81页 |
·β-香树酯醇合成酶基因多态性和地理来源的相关性 | 第81-82页 |
·β-香树酯醇合成酶基因多态性和传统甘草药材分类的相关性 | 第82-83页 |
·β-香树酯醇合成酶基因型和甘草酸积累的相关性 | 第83-85页 |
·β-香树酯醇合成酶的氨基酸序列差异分析 | 第85-92页 |
·小结 | 第92-94页 |
6 Β-香树酯醇合成酶基因表达和甘草酸积累的相关性研究 | 第94-112页 |
·甘草不同部位中甘草酸含量分析 | 第94-99页 |
·材料和方法 | 第94-97页 |
·实验结果 | 第97-99页 |
·小结 | 第99页 |
·甘草不同部位Β-香树酯醇合成酶基因表达分析 | 第99-110页 |
·材料和方法 | 第99-100页 |
·实验方法 | 第100-106页 |
·分析与讨论 | 第106-110页 |
·小结 | 第110-112页 |
7 结论与讨论 | 第112-117页 |
·甘草酸形成和基因的相关性 | 第112-113页 |
·ITS序列多态性与甘草酸形成的相关性 | 第112-113页 |
·β-香树酯醇合成酶基因多态性与甘草酸形成的相关性 | 第113页 |
·甘草酸积累与基因的相关性 | 第113-115页 |
·甘草酸积累和ITS序列多态性的相关性 | 第113-114页 |
·甘草酸积累和β-香树酯醇关键酶基因多态性的相关性 | 第114-115页 |
·甘草酸积累和基因表达的相关性 | 第115页 |
·创新与展望 | 第115-117页 |
参考文献 | 第117-122页 |
致谢 | 第122-123页 |
个人简历 | 第123页 |