摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略词 | 第10-11页 |
文中所用特殊标识符列表 | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-23页 |
·植物源、流、库的关系 | 第12页 |
·植物体内蔗糖的代谢与运输 | 第12-16页 |
·合成代谢 | 第13页 |
·蔗糖的分解代谢 | 第13-14页 |
·植物体内蔗糖的运输 | 第14-16页 |
·植物蔗糖转运蛋白的研究进展 | 第16-22页 |
·植物蔗糖转运蛋白基因的克隆 | 第16-17页 |
·植物蔗糖转运蛋白的分类 | 第17-18页 |
·植物蔗糖转运蛋白的的预测结构 | 第18页 |
·植物蔗糖转运蛋白的表达模式及功能 | 第18-22页 |
·双子叶植物SUT的表达模式及功能 | 第18-19页 |
·单子叶植物SUT的表达模式及功能 | 第19-22页 |
·本研究的立题思想 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-32页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·供试水稻品种 | 第23页 |
·菌株和质粒 | 第23-24页 |
·主要试剂和仪器 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
·实验方法 | 第24-32页 |
·农杆菌介导法转化水稻 | 第24-26页 |
·培养基 | 第24-25页 |
·胚性愈伤组织的诱导与继代 | 第25页 |
·愈伤组织的预培养 | 第25页 |
·农杆菌的培养及处理 | 第25页 |
·共培养 | 第25页 |
·洗除农杆菌 | 第25页 |
·愈伤组织的筛选 | 第25-26页 |
·抗性愈伤组织的继代与植株的再生 | 第26页 |
·抗性愈伤率和转化绿苗率的计算 | 第26页 |
·转基因水稻的PCR检测 | 第26-27页 |
·水稻叶片基因组DNA的提取 | 第26页 |
·PCR扩增引物序列 | 第26-27页 |
·PCR检测 | 第27页 |
·PCR产物回收与序列测定 | 第27页 |
·转基因水稻自交后代(T_1)的遗传分析 | 第27-28页 |
·蔗糖的提取和测定 | 第28页 |
·蔗糖的提取: | 第28页 |
·蔗糖的测定(6ml反应体系) | 第28页 |
·转入目的基因的表达检测 | 第28-31页 |
·水稻取样 | 第28-29页 |
·水稻籽粒总RNA的提取 | 第29页 |
·残余DNA的消除 | 第29-30页 |
·第一链cDNA的合成 | 第30页 |
·半定量RT-PCR检测 | 第30-31页 |
·籽粒蔗糖合成酶(SS)活性的测定 | 第31页 |
·酶液的提取(操作均置于4℃条件下) | 第31页 |
·蔗糖合成酶活性的恻定: | 第31页 |
·转基因水稻后代产量和品质分析 | 第31-32页 |
·转基因纯和株系的经济产量考种 | 第31页 |
·稻米直链淀粉含量的测定 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-43页 |
·农杆菌介导法获得水稻转化再生植株 | 第32页 |
·转化植株的分子检测 | 第32-34页 |
·转OsSUT2基因植株的分子检测 | 第32-33页 |
·转OsSUT2基因植株的PCR鉴定 | 第32-33页 |
·转OsSUT2基因植株的序列比对鉴定 | 第33页 |
·转OsSUT5基因植株的分子检测 | 第33-34页 |
·转OsSUT5基因植株的PCR检测 | 第33页 |
·转OsSUT5基因植株的序列比对鉴定 | 第33-34页 |
·部分T_2代转基因纯和株系目的基因转录水平的检测 | 第34-36页 |
·转OsSUT2基因部分T_2代纯和株系目的基因转录水平的检测 | 第34页 |
·转OsSUT5基因部分T_2代纯和株系目的基因转录水平的检测 | 第34-36页 |
·转基因后代的遗传分析 | 第36-37页 |
·转OsSUT2基因植株后代(T_1代)的遗传分析 | 第36-37页 |
·转OsSUT5基因植株后代(T_1代)的遗传分析 | 第37页 |
·部分T_2代转基因纯和株系源叶的蔗糖含量 | 第37-39页 |
·转OsSUT2基因T_2代纯和株系源叶蔗糖含量 | 第37-38页 |
·转OsSUT5基因T_2代纯和株系源叶蔗糖含量 | 第38-39页 |
·部分T_2代转基因纯和株系蔗糖合成酶(SS)活性的变化 | 第39页 |
·部分T_2代转基因纯和株系产量和品质相关性状的表现 | 第39-43页 |
·部分转基因纯和株系T_2代结实率的表现 | 第39-40页 |
·部分转基因纯和株系T_2代千粒重的表现 | 第40-41页 |
·部分转基因纯和株系T_2代直链淀粉含量的表现 | 第41-43页 |
4 讨论 | 第43-47页 |
·通过提高SUT表达的途径增加植物生产能力的研究 | 第43页 |
·水稻蔗糖转运蛋白OsSUT2的功能分析 | 第43-44页 |
·水稻蔗糖转运蛋白OsSUT5的功能分析 | 第44-45页 |
·调控水稻“流”策略 | 第45页 |
·后续工作及展望 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-53页 |
附录 | 第53-60页 |
附录1:已分离出cDNA的植物蔗糖转运蛋白统计 | 第53-55页 |
附录2:本研究所用基本培养基配方 | 第55-57页 |
附录3:转基因水稻的潮霉素抗性测定实验 | 第57-58页 |
附录4:实验数据统计 | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |