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人谷胱甘肽S-转移酶通过调节MEKK1活性抑制MEKK1介导的HEK293细胞凋亡的相关研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-8页
第一部分 文献综述第8-25页
 引言第9页
 第一章 细胞凋亡的相关研究进展第9-18页
  1.细胞凋亡的一般概念第9-10页
     ·细胞凋亡与细胞程序性死亡(PCD)第9页
     ·细胞凋亡与坏死的区别第9-10页
  2.细胞凋亡的生物学特征及其基因调控第10-16页
     ·细胞凋亡的生物学特征第10-11页
     ·细胞凋亡的过程及机理第11-14页
     ·Caspase的效应机制第14-15页
     ·细胞凋亡的调节第15-16页
  3.细胞凋亡的检测第16-18页
 第二章 谷胱甘肽S-转移酶研究进展第18-20页
  1.谷胱甘肽S-转移酶(GST)第18页
  2.谷胱甘肽S-转移酶P(GSTP)第18-19页
  3.谷胱甘肽S-转移酶与信号通路第19-20页
 第三章 丝裂原活化蛋白激酶信号通路研究进展第20-25页
  1.丝裂原活化蛋白激酶信号通路第20-21页
  2.MEKK1及其在细胞凋亡通路中的作用第21-25页
     ·MEKK1在anokis下的调节作用:第22-23页
     ·GCKs对MEKK1的调节第23-24页
     ·MEKK1与TRAFs的结合和激活第24-25页
第二部分 实验研究第25-61页
 第四章 GSTP1抑制MEKK1引发的凋亡的相关研究第26-42页
  摘要第26-27页
  1 实验材料第27-28页
   ·质粒和细胞第27页
   ·主要试剂和耗材第27-28页
   ·主要实验仪器第28页
  2.实验方法第28-35页
   ·细胞培养与基因转染第28页
   ·Western印迹分析第28-29页
     ·吖啶橙/溴乙锭检测细胞凋亡第29-30页
     ·细胞活力分析实验(MTT法)第30页
     ·ΔMEKK1活性缺失突变体的构建第30-35页
  3.实验结果第35-40页
   ·GSTP1对外源过表达ΔMEKK1所引发的凋亡的保护第35-37页
   ·GSTP1以内源性MEKK1所介导的凋亡的保护第37-40页
  4.讨论第40-42页
 第五章 GSTP1抑制MEKK1引发凋亡的机制的相关研究第42-52页
  摘要第42-43页
  1.实验材料第43-44页
     ·质粒和细胞第43页
     ·主要试剂和耗材第43页
     ·主要实验仪器第43-44页
  2.实验方法第44-47页
   ·细胞培养与基因转染第44页
   ·Western印迹分析第44-45页
   ·体外激酶活性分析(In vitro kinase assay)第45页
   ·GSTP1蛋白和MKK7(KR)蛋白的原核诱导、表达、纯化第45-47页
  3.实验结果第47-49页
     ·胞内过表达GSTP1抑制ΔMEKK1活性第47页
   ·体外表达纯化的GSTP1抑制ΔMEKK1活性第47-48页
   ·胞内过表达GSTP1抑制ΔMEKK1下游激酶活性第48-49页
  4.讨论第49-52页
 第六章 GSTP1酶活与抑制MEKK1活性的相关性研究第52-61页
  摘要第52-53页
  1.实验材料第53-54页
     ·质粒和细胞第53页
     ·主要试剂和耗材第53-54页
     ·主要实验仪器第54页
  2.实验方法第54-56页
     ·细胞培养与基因转染第54页
     ·Western印迹分析第54-55页
     ·GSTP1各种活性突变体的构建第55页
     ·GSTP1各种活性突变体的表达检测第55页
     ·GSTP1各种活性突变体的活性测定第55-56页
  3.实验结果第56-59页
     ·GSTP1各种活性突变体的酶活第56-57页
     ·GSTP1酶活与抑制MEKK1活性的关系第57-59页
  4.讨论第59-61页
第三部分 全文结论第61-62页
全文结论第62-63页
参考文献第63-68页
符号、缩略语注释表第68-69页
附录第69-70页
致谢第70页

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