| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 插图和附表清单 | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| ·HIV病毒简介 | 第12-14页 |
| ·HIV基因组 | 第12页 |
| ·HIV的生活周期 | 第12-14页 |
| ·治疗艾滋病的药物 | 第14-16页 |
| ·核苷类逆转录酶抑制剂 | 第14-15页 |
| ·非核苷类逆转录酶抑制剂 | 第15页 |
| ·蛋白酶抑制剂 | 第15页 |
| ·整合酶抑制剂 | 第15-16页 |
| ·融合抑制剂和趋化因子共受体阻断剂 | 第16页 |
| ·预防HIV性传播的多糖类杀微生物剂 | 第16-17页 |
| ·HIV假病毒应用于抗HIV药物的筛选 | 第17-23页 |
| ·HIV假病毒的构建方法 | 第17-19页 |
| ·HIV-1假病毒感染细胞系统的建立 | 第19-20页 |
| ·HIV-1假病毒感染细胞系统的应用 | 第20-22页 |
| ·应用HIV假病毒的优势及局限性 | 第22-23页 |
| ·本课题的研究内容及意义 | 第23-26页 |
| ·研究意义 | 第23-25页 |
| ·研究内容 | 第25-26页 |
| 第二章 HIV假病毒构建 | 第26-45页 |
| ·材料与方法 | 第26-36页 |
| ·材料 | 第26-28页 |
| ·大肠杆菌TOPO 10感受态制备 | 第28页 |
| ·质粒转化大肠杆菌 | 第28-29页 |
| ·质粒的小量提取 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶回收 | 第30页 |
| ·将ENV基因克隆到pcDNA~(TM)3.1 D载体上 | 第30-32页 |
| ·质粒的大量提取 | 第32-33页 |
| ·DNA浓度的测定 | 第33页 |
| ·细胞培养 | 第33-34页 |
| ·利用Lipofectamine 2000进行转染 | 第34页 |
| ·荧光素酶基因表达的检测 | 第34-35页 |
| ·HIV假病毒的获得 | 第35页 |
| ·假病毒感染活性的测定 | 第35-36页 |
| ·结果 | 第36-42页 |
| ·HIV ENV基因片段获得 | 第36页 |
| ·pcDNA~(TM)3.1-ENV真核表达质粒的构建与鉴定 | 第36-40页 |
| ·HIV ENV测序结果及序列分析 | 第40-41页 |
| ·转染结果和转染后基因表达 | 第41-42页 |
| ·假病毒感染活性测定 | 第42页 |
| ·小结 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 基于8PR技术的抗HIV药物筛选及分析方法的建立 | 第45-62页 |
| ·SPR技术的作用原理 | 第45-47页 |
| ·材料与方法 | 第47-53页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器设备 | 第47-48页 |
| ·rgp120 MN固定到CM5芯片上的最适pH值确定 | 第48-49页 |
| ·将gp120 MN固定到CM5芯片上 | 第49-50页 |
| ·rgp120 MN芯片表面再生条件的确定 | 第50-51页 |
| ·样品与gp120 MN的结合分析 | 第51-52页 |
| ·样品与gp120 MN结合的动力学/亲和分析 | 第52-53页 |
| ·结果 | 第53-60页 |
| ·rgp120 MN固定到CM5芯片上的最适pH值确定 | 第53-54页 |
| ·rgp120 MN分子在CM5芯片上的固定 | 第54-55页 |
| ·芯片表面再生条件的确定 | 第55-56页 |
| ·样品与gp120 MN的结合 | 第56-58页 |
| ·样品与rgp120 MN结合的动力学/亲和分析 | 第58-60页 |
| ·小结 | 第60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 第四章 应用ELISA法建立抗HIV药物初步筛选方法 | 第62-78页 |
| ·实验原理 | 第62页 |
| ·材料与方法 | 第62-64页 |
| ·主要试剂 | 第62页 |
| ·主要设备 | 第62-63页 |
| ·实剂及样品准备 | 第63页 |
| ·样品检测实验步骤 | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-75页 |
| ·吸光度测定值 | 第64-66页 |
| ·实验组A中数据处理 | 第66-69页 |
| ·实验组B中数据处理 | 第69-72页 |
| ·不同样品、浓度对吸光度观测值的方差分析 | 第72-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| 第五章 结论 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-85页 |
| 附录A 攻读硕士期间发表论文目录 | 第85-86页 |
| 附录B HIV ENV基因序列 | 第86-91页 |
