| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-41页 |
| ·引言 | 第13-15页 |
| ·细菌视紫红质(BR)和古紫质4蛋白(AR4) | 第15-21页 |
| ·细菌视紫红质的质子泵机理 | 第21-27页 |
| ·细菌视紫红质的技术应用 | 第27-32页 |
| ·本论文的研究背景和主要内容 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-41页 |
| 第二章 古紫质4蛋白的光循环与质子泵 | 第41-72页 |
| ·前言 | 第41-44页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·古紫质4蛋白和细菌视紫红质蛋白的提取 | 第44页 |
| ·膜蛋白质子泵的测定 | 第44页 |
| ·动力学光谱仪测定膜蛋白光循环中的瞬态吸收变化 | 第44-45页 |
| ·膜蛋白吸收光谱的测定 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-56页 |
| ·古紫质4蛋白的质子泵行为 | 第45-48页 |
| ·古紫质4蛋白的吸收光谱 | 第48-49页 |
| ·古紫质4蛋白紫膜向蓝膜的转变 | 第49-51页 |
| ·古紫质4蛋白的光循环 | 第51-52页 |
| ·古紫质4蛋白光循环中的M产物形成的pH依赖性 | 第52-53页 |
| ·古紫质4蛋白光循环中的O产物形成与衰减的pH依赖性 | 第53-55页 |
| ·古紫质4蛋白光循环中的O产物与质子提取和释放的关系 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-62页 |
| ·古紫质4蛋白光循环中质子提取与释放的顺序 | 第56页 |
| ·古紫质4蛋白的质子慢释放机理 | 第56-58页 |
| ·古紫质4蛋白中可能导致其质子释放弱偶联机理的氨基酸残基 | 第58-60页 |
| ·古紫质4蛋白中质子释放基团在光循环中的作用 | 第60-61页 |
| ·古紫质4蛋白中质子泵过程的几个关键步骤总结 | 第61-62页 |
| ·小结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 第三章 脂与蛋白的相互作用对古紫质4质子泵功能的影响 | 第72-92页 |
| ·前言 | 第72-73页 |
| ·材料与方法 | 第73-75页 |
| ·古紫质4蛋白和细菌视紫红质蛋白的提取 | 第74页 |
| ·Triton X-100和Octyl glucoside溶解膜蛋白 | 第74页 |
| ·膜蛋白的离心分离 | 第74页 |
| ·膜蛋白吸收光谱和圆二色谱的测定 | 第74页 |
| ·动力学光谱仪测定膜蛋白的光循环和质子泵 | 第74页 |
| ·Biobeads去除蛋白溶液中的Triton X-100 | 第74-75页 |
| ·结果 | 第75-84页 |
| ·古紫质4与细菌视紫红质蛋白吸收光谱和圆二色谱的比较 | 第75-77页 |
| ·去垢剂对两种膜蛋白光循环中质子提取和释放顺序的影响 | 第77-78页 |
| ·Triton X-100对古紫质4蛋白M产物、吸收光谱和圆二色谱的影响 | 第78-81页 |
| ·古紫质4蛋白的聚集体和单体具有相反的质子提取与释放顺序 | 第81-82页 |
| ·去除Triton X-100后古紫质4蛋白质子提取与释放顺序的恢复 | 第82-84页 |
| ·讨论 | 第84-86页 |
| ·AR4单体中Asp85和质子释放基团之间的偶联力得以恢复 | 第84页 |
| ·古紫质4与细菌视紫红质蛋白脂环境的差别 | 第84-85页 |
| ·脂与蛋白的相互作用决定了古紫质4蛋白质子释放的弱偶联机理 | 第85-86页 |
| ·小结与展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-92页 |
| 第四章 重组古紫质4与野生古紫质4及细菌视紫红质性质的比较 | 第92-116页 |
| ·前言 | 第93-94页 |
| ·材料与方法 | 第94-96页 |
| ·基因工程所用材料 | 第94页 |
| ·BR基因的启动子区域和AR4基因开放读码框的PCR扩增 | 第94-95页 |
| ·AR4基因的序列测定 | 第95页 |
| ·AR4基因的克隆和表达 | 第95页 |
| ·膜蛋白的可见吸收光谱的pH滴定 | 第95页 |
| ·膜蛋白光循环和质子泵的pH滴定 | 第95-96页 |
| ·结果 | 第96-106页 |
| ·AR4蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳图案 | 第96页 |
| ·转基因AR4&BR与野生AR4&BR吸收光谱和质子泵行为的比较 | 第96-98页 |
| ·转基因AR4质子泵的pH滴定 | 第98-99页 |
| ·转基因AR4可见吸收光谱的pH滴定 | 第99-103页 |
| ·转基因AR4光循环中M产物和O产物的pH滴定 | 第103-106页 |
| ·讨论 | 第106-109页 |
| ·AR4基因在嗜盐菌株L33中的转化和表达 | 第106页 |
| ·转基因AR4与BR蛋白性质的差异 | 第106-109页 |
| ·转基因AR4与野生AR4蛋白性质的差异 | 第109页 |
| ·小结与展望 | 第109-111页 |
| 参考文献 | 第111-116页 |
| 第五章 基因工程定点突变的古紫质和细菌视紫红质的功能研究 | 第116-133页 |
| ·前言 | 第116-118页 |
| ·材料与方法 | 第118-120页 |
| ·野生BR&AR4蛋白的获取 | 第118页 |
| ·D96N突变和D96V突变的BR蛋白的获取 | 第118-119页 |
| ·D212G突变的AR4蛋白的获取 | 第119页 |
| ·膜蛋白质谱的测定 | 第119页 |
| ·膜蛋白吸收光谱和暗适应速率的测定 | 第119-120页 |
| ·膜蛋白光循环和质子泵的测定 | 第120页 |
| ·结果 | 第120-127页 |
| ·D96V突变的BR蛋白的质谱图 | 第120-121页 |
| ·D96V突变的BR蛋白的吸收光谱及光适应向暗适应的转变 | 第121-122页 |
| ·D96V突变的BR蛋白的光循环和质子泵 | 第122-123页 |
| ·D96V突变的BR蛋白光循环中M产物寿命的pH滴定 | 第123-124页 |
| ·D212G突变的AR4蛋白光循环中质子提取和释放顺序 | 第124-125页 |
| ·D212G突变的AR4蛋白紫膜向蓝膜的转变 | 第125-127页 |
| ·讨论 | 第127-129页 |
| ·D96V突变优化了BR蛋白作为光信息存储和处理材料的功能 | 第127-128页 |
| ·D96V突变的BR蛋白光循环中M产物衰减的分析 | 第128页 |
| ·D212G突变使AR4蛋白恢复了"正常"的质子提取和释放顺序 | 第128-129页 |
| ·小结与展望 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-133页 |
| 第六章 细菌视紫红质和古紫质4蛋白功能材料的制备和研究 | 第133-151页 |
| ·前言 | 第133-135页 |
| ·BR蛋白/PVA复合膜的制备及功能研究 | 第135-137页 |
| ·一种具有光学响应的古紫质聚合物复合膜及其制备方法 | 第137-141页 |
| ·一种基因突变的古紫质4蛋白以及与聚合物的复合膜和相关制备方法 | 第141-144页 |
| ·BR蛋白/两亲性温敏性水凝胶复合材料的制备和功能研究 | 第144-146页 |
| ·小结与展望 | 第146-148页 |
| 参考文献 | 第148-151页 |
| 第七章 总结与展望 | 第151-154页 |
| ·本论文的主要结论、主要成果及意义 | 第151-152页 |
| ·本论文的创新之处 | 第152-153页 |
| ·本论文工作的延续和展望 | 第153-154页 |
| 附录一 嗜盐菌的培养和膜蛋白的提取 | 第154-158页 |
| 附录二 动力学光谱仪的工作原理及使用方法 | 第158-160页 |
| 附录三 二十种氨基酸分类表 | 第160-162页 |
| 附录四 AR4与BR的氨基酸序列比较 | 第162-164页 |
| 个人简历 | 第164-166页 |
| Resume | 第166-168页 |
| 论文发表与专利申请 | 第168-170页 |
| 致谢 | 第170-172页 |
