中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRAC | 第4-6页 |
目录 | 第6-10页 |
英文缩写表 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-26页 |
1 冬虫夏草的概述 | 第11-13页 |
·虫草属真菌的研究历史 | 第11页 |
·虫草属真菌的种类资源 | 第11-12页 |
·冬虫夏草的生物学特性 | 第12-13页 |
2 冬虫夏草有性型人工培育技术 | 第13-14页 |
·冬虫夏草人工培育现状 | 第13-14页 |
·半人工栽培 | 第14页 |
3 冬虫夏草无性型的研究概况 | 第14-19页 |
·无性型的培养 | 第14-15页 |
·已发表的冬虫夏草的无性型的名称 | 第15-17页 |
·无性型的鉴定 | 第17-19页 |
4.冬虫夏草药抗肿瘤作用 | 第19-22页 |
·在体外 | 第19-20页 |
·在体内 | 第20页 |
·抗肿瘤机制 | 第20-22页 |
5 冬虫夏草有效成分 | 第22-25页 |
·虫草多糖 | 第22-23页 |
·蛋白和氨基酸 | 第23页 |
·糖醇、甾醇类 | 第23页 |
·脂肪和脂肪酸 | 第23-24页 |
·抗菌活性物质 | 第24页 |
·虫草素和生物碱 | 第24页 |
·微量元素 | 第24页 |
·新型免疫抑制剂 | 第24-25页 |
·其他成分 | 第25页 |
小结 | 第25-26页 |
第二章 冬虫夏草无性型的培养 | 第26-41页 |
引言 | 第26页 |
1 材料与方法 | 第26-28页 |
·分离培养 | 第26-27页 |
·菌丝结构的观察 | 第27-28页 |
·子囊孢子和菌丝体感染幼虫实验 | 第28页 |
2 结果 | 第28-37页 |
·虫草菌生长观察 | 第28页 |
·菌丝显微结构 | 第28-31页 |
·温度对菌丝生长的影响 | 第31页 |
·通气对菌丝生长和结构的影响 | 第31页 |
·pH值对菌丝生长的影响 | 第31-32页 |
·荧光显微镜下观察 | 第32页 |
·摇菌时间对菌丝重的影响 | 第32-33页 |
·不同氮源对菌丝生长的影响 | 第33页 |
·不同碳源对菌丝生长的影响 | 第33-34页 |
·子囊孢子和菌丝感染幼虫实验结果 | 第34-35页 |
·免疫组化染色 | 第35-37页 |
3 讨论 | 第37-40页 |
·冬虫夏草无性型的分离及生长特性 | 第37-38页 |
·选择碳氮源、控制摇菌时间提高菌丝产量 | 第38-39页 |
·人工诱导僵虫 | 第39页 |
·菌丝免疫组化染色特性 | 第39-40页 |
小结 | 第40-41页 |
第三章 冬虫夏草无性型的鉴定 | 第41-57页 |
引言 | 第41-42页 |
1 材料和方法 | 第42-47页 |
·主要仪器 | 第42页 |
·主要试剂 | 第42-43页 |
·溶液的配制 | 第43页 |
·研究材料和来源 | 第43页 |
·真菌DNA的提取(按EZNA FungalDNAKit方法) | 第43-45页 |
·真菌基因组DNA琼脂糖凝胶电泳分析 | 第45页 |
·引物设计与合成 | 第45-46页 |
·PCR反应 | 第46页 |
·PCR产物琼脂糖凝胶电泳分析 | 第46页 |
·PCR产物的回收纯化 | 第46-47页 |
·序列测定和数据的处理 | 第47页 |
2 结果与分析 | 第47-50页 |
·总DNA的提取 | 第47页 |
·特定区域的PCR扩增结果 | 第47-48页 |
·序列测定结果 | 第48页 |
·序列排列和数据处理分析 | 第48-50页 |
3 讨论 | 第50-51页 |
·冬虫夏草无性型的分子鉴别 | 第50-51页 |
·不同产地冬虫夏草遗传多样性分析 | 第51页 |
小结 | 第51-57页 |
第四章 冬虫夏草甘露醇的测定 | 第57-70页 |
引言 | 第57页 |
1 材料与方法 | 第57-60页 |
·冬虫夏草甘露醇的提取 | 第57-58页 |
·比色法测定甘露醇 | 第58-59页 |
·氧化还原滴定法(容量法) | 第59-60页 |
·样品甘露醇比色法测定 | 第60页 |
2 结果 | 第60-68页 |
·比色法 | 第60-61页 |
·容量法 | 第61-63页 |
·比色法和容量法测定甘露醇含量的比较 | 第63页 |
·振荡培养对菌液和菌丝体甘露醇含量的影响(比色法) | 第63-67页 |
·不同氮源对甘露醇含量的影响(比色法) | 第67-68页 |
3 讨论 | 第68-69页 |
·不同虫草和冬虫夏草不部分甘露醇含量有差异 | 第68页 |
·容量法与比色法的比较 | 第68-69页 |
·振荡培养对甘露醇含量的影响 | 第69页 |
·氮源对甘露醇含量的影响 | 第69页 |
小结 | 第69-70页 |
第五章 冬虫夏草多糖的提取 | 第70-80页 |
引言 | 第70页 |
1 材料和方法 | 第70-72页 |
·溶液的配制 | 第70-71页 |
·多糖的提取 | 第71页 |
·多糖的测定(硫酸-苯酚法) | 第71-72页 |
2 结果 | 第72-78页 |
·供试液吸收曲线 | 第72-73页 |
·葡聚糖线性范围 | 第73页 |
·葡萄糖线性范围 | 第73-74页 |
·冬虫夏草和菌丝体多糖的含量 | 第74-75页 |
·不同处理多糖的影响 | 第75页 |
·振荡培养对菌丝多糖的影响 | 第75-77页 |
·氮源对菌丝多糖影响 | 第77-78页 |
3 讨论 | 第78-79页 |
·冬虫夏草和菌丝多糖含量 | 第78页 |
·不同处理对多糖含量的影响 | 第78-79页 |
·摇菌抑制菌丝多糖产生 | 第79页 |
·氮源对菌丝多糖影响 | 第79页 |
小结 | 第79-80页 |
第六章 冬虫夏草菌丝体对SP2/0细胞凋亡的作用 | 第80-101页 |
引言 | 第80-81页 |
1.材料和方法 | 第81-87页 |
·材料 | 第81-83页 |
·方法 | 第83-87页 |
2.结果 | 第87-98页 |
·冬虫夏草对瘤细胞的形态影响 | 第87-89页 |
·冬虫夏草对瘤细胞增殖影响 | 第89-90页 |
·总DNA电泳 | 第90-91页 |
·冬虫夏草对肿瘤细胞周期的影响 | 第91-92页 |
·冬虫夏草对肿瘤细胞凋亡的影响 | 第92-95页 |
·总RNA提取 | 第95-96页 |
·cDNA制备RT-PCP扩增 | 第96页 |
·实时荧光定量PCR反应结果 | 第96-98页 |
3 讨论 | 第98-100页 |
·冬虫夏草菌丝水提液和多糖对肿瘤细胞抑制作用 | 第98-99页 |
·冬虫夏草菌丝水提液和多糖诱导肿瘤细胞凋亡 | 第99页 |
·冬虫夏草菌丝水提液和多糖对肿瘤细胞p53基因表达作用 | 第99-100页 |
小结 | 第100-101页 |
结论 | 第101-102页 |
创新 | 第102-103页 |
参考文献 | 第103-112页 |
附录 | 第112-119页 |
致谢 | 第119-120页 |
个人简介 | 第120页 |