| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 绪言 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-17页 |
| 1. ARs 在心血管中的分布、信号转导机制与介导的效应 | 第12-14页 |
| ·α_1-肾上腺素受体 | 第12-13页 |
| ·α_2-肾上腺素受体 | 第13-14页 |
| ·β-肾上腺素受体 | 第14页 |
| 2. 感染性休克时 AR 的变化及可能机制 | 第14-16页 |
| ·α_1-肾上腺素受体 | 第14-15页 |
| ·α_2-肾上腺素受体 | 第15页 |
| ·β-肾上腺素受体 | 第15-16页 |
| 3.结束语 | 第16-17页 |
| 第一章 抗氧化剂有效抑制细菌内毒素性休克大鼠α_1-肾上腺素受体基因表达下调 | 第17-41页 |
| 材料和方法 | 第17-24页 |
| 1.材料 | 第17-19页 |
| ·实验动物 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要试剂配制 | 第18-19页 |
| 2.实验方法 | 第19-23页 |
| ·制备感染性休克大鼠模型 | 第19页 |
| ·实验动物分组及标本采集与准备 | 第19页 |
| ·组织总RNA提取: | 第19-21页 |
| ·总RNA提取过程 | 第20页 |
| ·RNA 的完整性检测:采用水平式琼脂糖凝胶电泳 | 第20-21页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第21-23页 |
| ·逆转录(20 μl 反应体系) | 第21页 |
| ·PCR 引物 | 第21-22页 |
| ·引物的配制 | 第22页 |
| ·聚合酶链反应(PCR) | 第22-23页 |
| ·PCR产物电泳— | 第23页 |
| ·PCR 产物测序 | 第23页 |
| 3.数据处理和统计学分析 | 第23-24页 |
| 结 果 | 第24-39页 |
| 1.RNA 完整性检测 | 第24页 |
| 2.各组大鼠α_1-ARs mRNA的表达状 | 第24页 |
| 3.感染性休克时大鼠α_1-ARs mRNA的表达状况 | 第24页 |
| 4.抗氧化剂治疗感染性休克后大鼠α_1-ARs mRNA的表达状况 | 第24-37页 |
| 5 PCR 产物测序 | 第37-39页 |
| 讨 论 | 第39-41页 |
| 第二章 一氧化氮及其衍生物导致血管平滑肌细胞α_1-肾上腺素受体基因表达下调 | 第41-53页 |
| 材料和方法 | 第41-47页 |
| 1 材料 | 第41-44页 |
| ·主要仪器设备 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·主要试剂配制 | 第42-44页 |
| ·高糖 DMEM 培养基 | 第42页 |
| ·新生小牛血清 | 第42页 |
| ·Hanks 液 | 第42-43页 |
| ·D-Hanks 液: | 第43页 |
| ·PBS 溶液: | 第43页 |
| ·胰蛋白酶(1:125): | 第43页 |
| ·0.5 mg/ml 多聚赖氨酸 | 第43页 |
| ·0.1%DEPC 水(无 Rnase 水) | 第43-44页 |
| ·5×TBE 缓冲液 | 第44页 |
| ·6×上样缓冲液: | 第44页 |
| 2 实验方法 | 第44-46页 |
| ·大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC)的培养 | 第44-45页 |
| ·生长基质包被培养瓶 | 第44页 |
| ·组织块帖壁法大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)的原代培养 | 第44-45页 |
| ·对平滑肌细胞的干预 | 第45页 |
| ·总 RNA 提取 | 第45-46页 |
| ·总RNA提取过程 | 第45-46页 |
| ·RNA 的完整性检测 | 第46页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR): | 第46页 |
| 3 数据处理和统计学分析 | 第46-47页 |
| 结 果 | 第47-52页 |
| 1 血管平滑肌细胞的鉴定 | 第47-48页 |
| ·光镜下所见 | 第47-48页 |
| ·电镜下所见 | 第48页 |
| 2. 各组大鼠血管平滑肌细胞α1-ARs mRNA的表达 | 第48-52页 |
| ·正常对照组 | 第48页 |
| ·炎性细胞因子组 | 第48-49页 |
| ·L-NAME 组 | 第49页 |
| ·MLT 组 | 第49页 |
| ·SNP 组 | 第49页 |
| ·Tyr 组 | 第49页 |
| ·3-NT 组 | 第49-52页 |
| 讨 论 | 第52-53页 |
| 第三章 抗氧化剂抑制细菌内毒素性休克大鼠诱导型一氧化氮合酶的基因表达 | 第53-68页 |
| 材料和方法 | 第53-59页 |
| 1. 材料 | 第53-55页 |
| ·实验动物 | 第53页 |
| ·主要仪器设备 | 第53页 |
| ·主要试剂 | 第53-54页 |
| ·主要试剂配制 | 第54-55页 |
| ·3%苦味酸 | 第54页 |
| ·2%戊巴比妥钠 | 第54页 |
| ·0.1%DEPC 水(无 Rnase 水) | 第54页 |
| ·10×TBE 缓冲浓缩液 | 第54页 |
| ·6×上样缓冲液 | 第54-55页 |
| ·50 %冰醋酸 | 第55页 |
| 2. 实验方法 | 第55-58页 |
| ·制备感染性休克大鼠模型 | 第55页 |
| ·实验动物分组及标本采集与准备 | 第55-57页 |
| ·实验动物分组同第一章。 | 第55页 |
| ·标本采集与准备: | 第55页 |
| ·组织总RNA提取 | 第55页 |
| ·逆转录聚合酶链反应(RT-PCR) | 第55-56页 |
| ·血浆丙二醛(MDA)浓度检测 | 第56-57页 |
| ·血浆 NO 浓度测定 | 第57-58页 |
| ·NO 检测试剂盒: | 第57页 |
| ·原理: | 第57页 |
| ·试剂盒组成: | 第57页 |
| ·检测步骤 | 第57-58页 |
| ·计算公式: | 第58页 |
| 3 数据处理和统计学分析 | 第58-59页 |
| 结 果 | 第59-66页 |
| 1.正常大鼠 iNOS mRNA 的表达状况 | 第59页 |
| 2.感染性休克时大鼠 iNOS mRNA 的表达状况 | 第59页 |
| 3.抗氧化剂治疗感染性休克后大鼠 iNOS mRNA 的表达的影响 | 第59页 |
| 4.各组大鼠血浆 MDA 和 NO 的浓度 | 第59-65页 |
| 5.PCR产物测序 | 第65-66页 |
| 讨 论 | 第66-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
