| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要(Abstract) | 第8-11页 |
| 第一节 文献综述 | 第11-30页 |
| 1. 病毒特征和其基因组结构 | 第12-15页 |
| ·病毒的分类 | 第12页 |
| ·形态学特征 | 第12-13页 |
| ·NLVs病毒的理化特性 | 第13页 |
| ·基因组结构和分类 | 第13-15页 |
| ·基因组的遗传和变异 | 第15页 |
| ·病毒的繁殖 | 第15页 |
| 2. 病毒的致病机制和临床症状 | 第15-17页 |
| ·致病机制 | 第15-16页 |
| ·临床症状 | 第16页 |
| ·发病率 | 第16-17页 |
| 3. 传播途径 | 第17-19页 |
| 4. 诺瓦克病毒性腹泻的预防与控制 | 第19-20页 |
| 5. NLVs的检测分析方法 | 第20-27页 |
| ·电镜法 | 第20-21页 |
| ·直接电镜法 | 第20页 |
| ·免疫电镜法 | 第20-21页 |
| ·固相免疫电镜法 | 第21页 |
| ·免疫吸附凝集试验(IAHA) | 第21页 |
| ·放射免疫试验(RIA) | 第21页 |
| ·酶联免疫试验(ELISA) | 第21-22页 |
| ·Western杂交法 | 第22页 |
| ·RT-PCR法 | 第22-25页 |
| ·病毒的分离方法 | 第22-23页 |
| ·核酸提取方法 | 第23页 |
| ·引物的选择 | 第23-25页 |
| ·核酸杂交法 | 第25页 |
| ·荧光定量PCR | 第25-27页 |
| ·SYBR荧光染料 | 第26页 |
| ·Taqman技术 | 第26-27页 |
| ·序列特异性核酸体外扩增技术 | 第27页 |
| 6. 论文的研究目的和研究方法 | 第27-30页 |
| 第二节 RT-PCR法检测太平洋牡蛎中的诺瓦克样病毒和病毒RNA聚合酶区部分序列的分析 | 第30-44页 |
| ·材料与方法 | 第30-34页 |
| ·材料 | 第30-31页 |
| ·牡蛎的处理及病毒核酸的提取 | 第31-32页 |
| ·核酸扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR产物纯化、克隆及测序 | 第33-34页 |
| ·PCR产物纯化、克隆及测序 | 第34页 |
| ·感受细胞的制备 | 第34页 |
| ·PCR产物的纯化及克隆 | 第34页 |
| ·试验结果 | 第34-40页 |
| ·扩增诺瓦克样病毒RNA聚合酶区基因片段的引物的选择 | 第34-36页 |
| ·重组质粒的测序结果和序列分析 | 第36-40页 |
| ·粪便分离株和牡蛎分离株的序列比对和系统树分析 | 第36-37页 |
| ·与其他病毒分离株RNA聚合酶区序列的比对和系统树分析 | 第37-40页 |
| ·讨论 | 第40-44页 |
| 第三节 寡核苷酸斑点杂交法对RT-PCR结果的验证 | 第44-52页 |
| ·材料与方法 | 第44-47页 |
| ·材料 | 第44-45页 |
| ·试验样品的编号 | 第45页 |
| ·试剂的配制方法 | 第45-46页 |
| ·寡聚核苷酸杂交探针的设计 | 第46页 |
| ·寡核苷酸探针杂交试验 | 第46-47页 |
| ·灵敏度试验 | 第47页 |
| ·实验结果 | 第47-48页 |
| ·质粒及RT-PCR产物的杂交结果 | 第47-48页 |
| ·灵敏度试验 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-52页 |
| 第四节 Taqman荧光定量PCR对NLVs分离株的检测 | 第52-61页 |
| ·材料与方法 | 第52-54页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·试验方法 | 第53-54页 |
| ·核酸的提取 | 第53页 |
| ·引物与探针的设计 | 第53-54页 |
| ·TaqmanPCR反应体系 | 第54页 |
| ·试验结果 | 第54-59页 |
| ·对NLVsGⅡ病毒核酸RNA的real-time PCR | 第54-56页 |
| ·NLVsGⅠ和NLVsGⅡ的荧光定量标准曲线的建立 | 第56-58页 |
| ·其他样品结果(NLVsGⅡ) | 第58-59页 |
| ·与常规PCR检测限的比较(NLVsGⅡ) | 第59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 总结 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
