| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 引言 | 第9-43页 |
| 第一节 藻胆蛋白研究进展 | 第10-24页 |
| 1 藻胆蛋白的结构 | 第11-14页 |
| 2 藻胆蛋白分子的进化 | 第14-16页 |
| 3 藻胆蛋白的应用研究 | 第16-21页 |
| ·作为天然色素 | 第16-17页 |
| ·作为饲料 | 第17页 |
| ·作为荧光探针 | 第17-18页 |
| ·作为药品或保健品 | 第18-21页 |
| 4 藻胆蛋白生物活性的分子机制研究 | 第21-22页 |
| 5 藻胆蛋白的基因工程 | 第22-24页 |
| 第二节 巴斯德毕赤酵母表达系统的研究进展 | 第24-33页 |
| 1 受体菌株 | 第25-26页 |
| 2 表达载体 | 第26-29页 |
| ·常见的表达载体 | 第26-29页 |
| ·载体元件的发展 | 第29页 |
| 3 外源蛋白在毕赤酵母中的表达 | 第29-33页 |
| ·表达的一般步骤 | 第29-30页 |
| ·重组蛋白的分泌表达 | 第30页 |
| ·重组蛋白的翻译后加工修饰 | 第30页 |
| ·影响酵母表达的因素 | 第30-33页 |
| 第三节 T 细胞表位预测研究进展 | 第33-41页 |
| 1 免疫学的基本概念 | 第34-35页 |
| 2 T 细胞表位预测 | 第35-41页 |
| ·T 细胞表位预测的分子基础 | 第36-37页 |
| ·细胞毒性 T 淋巴细胞抗原表位的预测 | 第37-38页 |
| ·辅助性 T 细胞抗原表位的预测 | 第38-41页 |
| 第四节 本论文工作研究的目标、意义及总体路线 | 第41-43页 |
| 1 新型重组别藻蓝蛋白亚基表达载体的构建及表达 | 第41-42页 |
| 2 基因工程菌株的摇瓶培养及发酵罐高密度发酵 | 第42页 |
| 3 纯化方法及质控标准的探索 | 第42页 |
| 4 生物活性的研究 | 第42页 |
| 5 作用机理的初步研究 | 第42-43页 |
| 第二章 重组别藻蓝蛋白基因在毕赤酵母中的表达 | 第43-67页 |
| 1 材料与方法 | 第43-57页 |
| ·载体及菌株 | 第43页 |
| ·生化试剂 | 第43-44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·毕赤酵母表达载体pPIC6αA/APC 的构建 | 第44-50页 |
| ·别藻蓝蛋白基因在毕赤酵母中的融合表达 | 第50-54页 |
| ·重组 APC 的免疫原性检测 | 第54-56页 |
| ·重组 APC 表达条件的优化——LaCl_3 对毕赤酵母表达 YAPC 的影响 | 第56-57页 |
| 2 结果 | 第57-65页 |
| ·毕赤酵母表达载体pPIC6αA/APC 的构建 | 第57页 |
| ·别藻蓝蛋白基因在毕赤酵母中的融合表达 | 第57-62页 |
| ·YAPC 的免疫原性检测 | 第62-63页 |
| ·LaCl_3 对YAPC 在毕赤酵母中表达的影响 | 第63-65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 4 小结 | 第66-67页 |
| 第三章 新型重组别藻蓝蛋白亚基的表达﹑纯化及性质研究 | 第67-83页 |
| 第一节 重组别藻蓝蛋白亚基基因在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第67-75页 |
| 1 材料与方法 | 第67-71页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·实验方法 | 第68-71页 |
| 2 结果与讨论 | 第71-75页 |
| ·重组质粒的构建及核苷酸序列测定 | 第71-72页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第72-75页 |
| 3 小结 | 第75页 |
| 第二节 新型重组别藻蓝蛋白亚基及重组麦芽糖结合蛋白的性质研究 | 第75-83页 |
| 1 材料与方法 | 第76-78页 |
| ·高效液相层析色谱（HPLC） | 第76页 |
| ·重组蛋白的最大吸收波长测定 | 第76页 |
| ·免疫印迹(Western blotting)分析 | 第76页 |
| ·重组蛋白抗氧化活性的测定 | 第76-78页 |
| 2 结果与讨论 | 第78-82页 |
| ·HPLC 检测 | 第78页 |
| ·最大吸收波长的测定 | 第78-80页 |
| ·免疫原性检测 | 第80页 |
| ·目的蛋白抗氧化活性的测定 | 第80-82页 |
| 3 小结 | 第82-83页 |
| 第四章 重组别藻蓝蛋白基因在大肠杆菌中的表达﹑纯化及生物活性的初步研究 | 第83-101页 |
| 第一节 重组别藻蓝蛋白基因在大肠杆菌中的表达﹑纯化及性质研究 | 第83-92页 |
| 1 材料与方法 | 第83-86页 |
| ·材料 | 第83-84页 |
| ·实验方法 | 第84-86页 |
| 2 结果与讨论 | 第86-92页 |
| ·重组质粒的构建及核苷酸序列测定 | 第86页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第86-88页 |
| ·HPLC 检测 | 第88-90页 |
| ·最大吸收波长的测定 | 第90-92页 |
| ·免疫原性检测 | 第92页 |
| 3 小结 | 第92页 |
| 第二节 重组别藻蓝蛋白(HAPC)生物活性的初步研究 | 第92-101页 |
| 1 材料与方法 | 第93-95页 |
| ·药物 | 第93页 |
| ·动物和瘤株 | 第93页 |
| ·抗氧化活性测定——邻二氮菲—Fe~(2+)氧化法 | 第93-94页 |
| ·HAPC 对正常小鼠化疗致白细胞数下降的对抗作用 | 第94页 |
| ·HAPC 对荷瘤小鼠的升白、抑瘤作用 | 第94-95页 |
| ·其他方法 | 第95页 |
| 2 结果 | 第95-99页 |
| ·HAPC 抗氧化活性的测定 | 第95页 |
| ·HAPC 对正常小鼠化疗致白细胞数下降的对抗作用 | 第95-97页 |
| ·HAPC 对荷瘤小鼠化疗致白细胞(WBC)数下降的对抗作用 | 第97-99页 |
| 3 讨论 | 第99-100页 |
| 4 小结 | 第100-101页 |
| 第五章 重组别藻蓝蛋白的抗原表位预测 | 第101-126页 |
| 1 材料与方法 | 第101-103页 |
| ·靶抗原 | 第101页 |
| ·CTL 表位预测 | 第101-102页 |
| ·打分矩阵法（Quantitative Matrices） | 第102页 |
| ·B 细胞表位预测 | 第102-103页 |
| 2 结果 | 第103-123页 |
| ·MHC-I 类 T 细胞表位的预测 | 第103-113页 |
| ·MHC-II 类T 细胞表位的预测 | 第113-118页 |
| ·B 细胞表位的预测 | 第118-123页 |
| 3 讨论 | 第123-125页 |
| 4 小结 | 第125-126页 |
| 结论 | 第126-127页 |
| 使用仪器 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-140页 |
| 发表及已接收文章目录 | 第140-141页 |
| 致谢 | 第141页 |
