1.文献综述 | 第1-43页 |
·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第14页 |
·稻瘟病菌的侵染循环 | 第14-17页 |
·孢子萌发 | 第14-15页 |
·附着胞的分化和成熟 | 第15-16页 |
·侵入栓形成和侵入 | 第16页 |
·侵入后的菌丝分化与扩展 | 第16页 |
·产孢与再侵染 | 第16-17页 |
·稻瘟病菌的重要功能基因 | 第17-41页 |
·参与产孢过程的基因 | 第17-18页 |
·附着胞分化相关基因 | 第18-26页 |
·附着胞的成熟与膨压形成过程中的功能基因 | 第26-29页 |
·侵入栓形成及侵入相关基因 | 第29-30页 |
·侵入后菌丝分化及扩展相关的基因 | 第30-31页 |
·其它致病性相关基因 | 第31-34页 |
·基因表达的调控 | 第34-41页 |
·稻瘟病菌基因组草图的绘制及数据库的开发利用 | 第41页 |
·本研究的目的、内容和意义 | 第41-43页 |
2.材料与方法 | 第43-60页 |
·MGTA1基因的确定与序列比对 | 第43页 |
·菌株、培养基及培养条件 | 第43-46页 |
·稻瘟病菌菌株、培养基及培养条件 | 第43-45页 |
·细菌菌株、培养基及培养条件 | 第45-46页 |
·DNA相关操作 | 第46-56页 |
·基因组DNA提取 | 第46-47页 |
·常规PCR、长片段PCR(>5kb)与RT-PCR | 第47-49页 |
·PCR产物的克隆 | 第49页 |
·序列测定 | 第49页 |
·DNA克隆程序 | 第49-53页 |
·Southern杂交 | 第53-56页 |
·MGTA1基因的GFP表达分析 | 第56页 |
·融合载体的构建 | 第56页 |
·稻瘟病菌eGFP转化子的荧光观察 | 第56页 |
·MGTA1基因敲除及突变子功能分析 | 第56-60页 |
·基因置换载体MGTA1::HPH的构建 | 第56页 |
·互补载体的构建 | 第56页 |
·稻瘟病菌原生质体的制备与转化 | 第56-58页 |
·侵入相关的形态学观察 | 第58-60页 |
3.结果与分析 | 第60-94页 |
·MGTA1基因的分离和克隆 | 第60-62页 |
·MGTA1基因的确定 | 第60-61页 |
·MGTA1基因组序列的克隆与序列测定 | 第61页 |
·MGTA1基因cDNA片段的克隆与序列测定 | 第61-62页 |
·MGTA1基因的序列与分析 | 第62-67页 |
·MGTA1基因的序列 | 第62-64页 |
·MGTA1基因的同源基因 | 第64-67页 |
·MGTA1基因在不同稻瘟病菌菌株基因组中的拷贝数 | 第67-68页 |
·MGTA1基因的时空表达及亚细胞定位 | 第68-75页 |
·融合载体MGTA1(p)::eGFP::HPH的构建 | 第68-70页 |
·MGTA1(p)::eGFP::HPH转化子的荧光表达 | 第70-71页 |
·融合载体MGTA1::eGFP::HPH的构建 | 第71-74页 |
·MGTA1::eGFP::HPH转化子的荧光表达 | 第74页 |
·MGTA1基因的RT-PCR检测 | 第74-75页 |
·MGTA1基因敲除载体的构建及目标置换过程 | 第75-76页 |
·MGTA1基因敲除载体MGTA1::HPH的构建 | 第75-76页 |
·MGTA1基因的目标置换过程 | 第76页 |
·两次敲除转化及⊿MGTA1突变子的获得 | 第76-81页 |
·第一次敲除转化与⊿MGTA1突变子的获得 | 第76-80页 |
·再次敲除转化及突变子的获得 | 第80-81页 |
·MGTA1基因敲除的频率 | 第81页 |
·⊿MGTA1突变子的表型(phenotypes)分析 | 第81-92页 |
·⊿MGTA1突变子的菌落形态与生长速度 | 第81-83页 |
·⊿MGTA1突变子的产孢量 | 第83-85页 |
·⊿MGTA1突变子的分生孢子萌发、附着胞形成 | 第85-87页 |
·⊿MGTA1突变子对洋葱表皮的穿透作用 | 第87页 |
·⊿MGTA1突变子对大麦和水稻的致病性 | 第87-90页 |
·⊿MGTA1突变子有性世代的产生 | 第90-91页 |
·⊿MGTA1突变子对纤维素的利用 | 第91-92页 |
·A17与A37的表型 | 第92页 |
·突变子互补载体的构建及转化 | 第92-93页 |
·突变子的MGTA1基因3’下游序列 | 第93-94页 |
4.讨论 | 第94-101页 |
5.小结 | 第101-103页 |
6.参考文献 | 第103-117页 |