| 第一章 前言 | 第1-17页 |
| ·植物病原菌-野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xcc)的概述 | 第8-9页 |
| ·Xcc的分类地位 | 第8页 |
| ·Xcc的形态和特征 | 第8-9页 |
| ·Xcc的生理和生化特征 | 第9页 |
| ·Xcc的危害 | 第9页 |
| ·Xcc基因组的分析 | 第9页 |
| ·胞外多糖研究进展 | 第9-16页 |
| ·胞外多糖的结构 | 第10页 |
| ·胞外多糖的理化性能 | 第10-11页 |
| ·胞外多糖的应用 | 第11-12页 |
| ·胞外多糖生物合成途径及调控 | 第12-15页 |
| ·EPS与致病性的关系 | 第15-16页 |
| ·本工作的目的和意义 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第17页 |
| ·细菌培养基 | 第17-18页 |
| ·菌株培养条件及保存 | 第18-19页 |
| ·抗菌素及其贮存、使用浓度 | 第19页 |
| ·常用溶液与缓冲液 | 第19-20页 |
| ·DNA的凝胶电泳 | 第20-21页 |
| ·细菌总DNA的提取 | 第21页 |
| ·Xcc总DNA的快速提取 | 第21页 |
| ·Xcc总DNA的大量提取 | 第21页 |
| ·质粒的提取 | 第21-22页 |
| ·DNA酶切 | 第22页 |
| ·DNA的连接 | 第22-23页 |
| ·DNA的电脉冲转化 | 第23页 |
| ·试剂盒回收DNA片段 | 第23页 |
| ·PCR扩增DNA片段 | 第23-24页 |
| ·PCR引物的设计 | 第23-24页 |
| ·PCR反应 | 第24页 |
| ·三亲本接合 | 第24-25页 |
| ·同源单交换 | 第25-26页 |
| ·重组质粒pK18mob的验证，以及整合突变的极性判断 | 第26页 |
| ·目标基因定点插入突变体的验证 | 第26页 |
| ·胞外多糖的检测 | 第26-27页 |
| ·胞外酶的检测 | 第27页 |
| ·胞外蛋白酶的检测 | 第27页 |
| ·胞外淀粉酶的检测 | 第27页 |
| ·胞外纤维素酶的检测 | 第27页 |
| ·突变体的功能互补 | 第27-28页 |
| ·致病性试验 | 第28页 |
| ·细菌在寄主中的生长繁殖的测定 | 第28页 |
| ·细菌在培养基中的生长繁殖曲线的绘制 | 第28-29页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第29-48页 |
| ·EPS缺陷突变体的筛选 | 第29页 |
| ·XC0877插入突变体Tn5gusA5的插入位置 | 第29-32页 |
| ·XC0877的生物信息学分析 | 第32-36页 |
| ·XC0877基因的基本特征 | 第32-34页 |
| ·XC0877基因演绎的蛋白质的亲水性／疏水性分析 | 第34页 |
| ·XC0877基因演绎的蛋白质的跨膜区域分析 | 第34-35页 |
| ·XC0877基因演绎的蛋白质功能域分析 | 第35-36页 |
| ·XC0877基因编码产物的推测 | 第36页 |
| ·XC0877定点整合突变体的构建 | 第36-40页 |
| ·用于同源单交换的重组质粒的构建 | 第36-37页 |
| ·用聚合酶链式反应(PCR)方法扩增目标ORF内的DNA片段并回收 | 第37-38页 |
| ·扩增片段与pK18mob连接 | 第38-39页 |
| ·同源单交换整合突变体的获得 | 第39-40页 |
| ·整合突变体胞外多糖的检测 | 第40-41页 |
| ·整合突变体胞外多糖的平板检测 | 第40-41页 |
| ·整合突变体胞外多糖的产量检测 | 第41页 |
| ·XC0877基因突变体的致病性研究 | 第41-43页 |
| ·剪叶接种 | 第41-42页 |
| ·细菌在寄主中的生长繁殖 | 第42-43页 |
| ·XC0877基因突变体的生长繁殖 | 第43-44页 |
| ·突变体0877胞外酶的平板检测 | 第44-45页 |
| ·构建重组质粒pLA0877及互补突变体0877nk | 第45-48页 |
| ·扩增XC0877野生型基因 | 第45-46页 |
| ·重组质粒pLA0877的获得 | 第46页 |
| ·反式互补子877nk／PLA0877的获得及表型检测 | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-51页 |
| ·Xcc 8004突变体库中与胞外多糖合成相关突变体的筛选 | 第48页 |
| ·XC0877突变体分析 | 第48页 |
| ·XC0877编码产物的基本特征 | 第48-49页 |
| ·XC0877可能参与的EPS生物合成途径 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录: 实验中用到的仪器 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
