一. 前言 | 第1-20页 |
1.盐分对植物的伤害 | 第10页 |
2.植物耐盐机制 | 第10-17页 |
3.耐盐基因筛选的主要策略 | 第17-20页 |
二. 材料与方法 | 第20-29页 |
(一) 实验材料 | 第20-22页 |
1.植物材料 | 第20页 |
2.菌株和载体 | 第20页 |
3.主要仪器设备 | 第20页 |
4.主要试剂 | 第20-21页 |
5.缓冲液及主要试剂配制 | 第21-22页 |
(二) 实验方法 | 第22-29页 |
1.耐盐重组菌株的筛选及鉴定 | 第22-26页 |
2.蛋白质样品的SDS-PAGE | 第26-27页 |
3.蛋白质样品的质谱分析 | 第27-28页 |
4.菌株在胁迫培养基中生长曲线的测定 | 第28-29页 |
三. 结果与分析 | 第29-50页 |
(一) 大豆未成熟种子cDNA文库的筛选及候选耐盐重组菌株的鉴定 | 第29-32页 |
1.以噬粒形式存在的大豆cDNA文库的制备 | 第29页 |
2.大豆未成熟种子cDNA文库的筛选 | 第29-30页 |
3.候选耐盐重组菌株的鉴定 | 第30-32页 |
(二) 测序结果及分析 | 第32-41页 |
1.重组质粒pBK-GmA3基因序列及分析 | 第32-37页 |
2.重组质粒pBK-GmA5基因序列及分析 | 第37-41页 |
(三) 耐盐重组菌在几种高盐培养基中的生长状况 | 第41-50页 |
1.重组菌XLOLR/pBK-GmA3在不同盐培养基中的生长状况 | 第42-44页 |
2.GmA5基因亚克隆的构建及其在不同胁迫条件下的生长状况 | 第44-50页 |
四. 讨论 | 第50-56页 |
1.利用外源基因在大肠杆菌中功能性表达筛选耐盐相关基因策略是可行的 | 第50-52页 |
2.外源基因在改善重组菌对高盐适应性中的作用 | 第52页 |
3.蛋白质序列中的KH保守区的耐盐功能分析 | 第52-54页 |
4.蛋白质序列中BURP区的耐盐功能分析 | 第54-56页 |
五. 结论 | 第56-57页 |
1.构建了耐盐基因的筛选体系 | 第56页 |
2. 大豆GmA3基因的筛选和鉴定 | 第56页 |
3. 大豆GmA5基因的筛选和鉴定 | 第56-57页 |
六. 参考文献 | 第57-67页 |
七. 致谢 | 第67页 |