| 第一章 贝类免疫学研究的现状和趋势 | 第1-28页 |
| 一、 概述 | 第14-15页 |
| 二、 贝类的免疫系统:结构和功能 | 第15-22页 |
| 1 贝类血细胞的形态结构 | 第15-16页 |
| 2 贝类血细胞的吞噬作用 | 第16-19页 |
| ·吞噬和杀伤机制 | 第16-18页 |
| ·贝类血细胞的包囊作用 | 第18-19页 |
| 3 贝类血淋巴中的免疫活性因子 | 第19页 |
| 4 贝类免疫反应的调节和控制 | 第19-20页 |
| 5 贝类对异物的识别 | 第20-22页 |
| ·调理作用 | 第20-21页 |
| ·血细胞表面受体 | 第21-22页 |
| 6 识别的机理 | 第22页 |
| 三、 小结和展望 | 第22-28页 |
| 第二章 栉孔扇贝血细胞形态学研究 | 第28-48页 |
| 1 引言 | 第29-30页 |
| 2 材料和方法 | 第30-32页 |
| ·动物和血细胞收集 | 第30-31页 |
| ·细胞计数和测量 | 第31页 |
| ·伸展特性观察 | 第31页 |
| ·透射电子显微镜观察 | 第31页 |
| ·酵母刺激 | 第31-32页 |
| ·流式细胞术分析 | 第32页 |
| 3 结果 | 第32-35页 |
| ·细胞计数和测量 | 第32页 |
| ·伸展特性观察 | 第32-33页 |
| ·透射电镜 | 第33-34页 |
| ·静态血细胞 | 第33-34页 |
| ·酵母刺激的血细胞 | 第34页 |
| ·流式细胞术 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-48页 |
| 第三章 栉孔扇α2-巨球蛋白的活性检测和基因克隆 | 第48-113页 |
| 一、 α2-巨球蛋白研究进展 | 第48-62页 |
| 1 α2M分子的结构与作用机理 | 第49-51页 |
| 2 分子内硫酯键及其在抑制反应中的作用 | 第51-53页 |
| 3 诱饵区 | 第53页 |
| 4 α2M-蛋白酶复合物的清除 | 第53-54页 |
| 5 α2M与补体因子的关系 | 第54-55页 |
| 6 α2M与细胞因子的结合 | 第55-56页 |
| 7 α2M的分离纯化和基因克隆 | 第56-62页 |
| 二、 栉孔扇贝和皱纹盘鲍α2-巨球蛋白活性研究 | 第62-70页 |
| 1 材料和方法 | 第63-64页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·试剂 | 第63页 |
| ·仪器 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63-64页 |
| ·血浆样品的制备 | 第63-64页 |
| ·α2M活性检测 | 第64页 |
| 2 结果 | 第64-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| 三、 栉孔扇贝α2-巨球蛋白基因的分子克隆 | 第70-113页 |
| 1 引言 | 第70-72页 |
| 2 材料和方法 | 第72-79页 |
| ·动物 | 第72页 |
| ·总RNA抽提和mRNA纯化 | 第72-73页 |
| ·cDNA第一链合成及α2M受体结合区片段的克隆 | 第73页 |
| ·栉孔扇贝α2M基因诱饵区的克隆 | 第73-74页 |
| ·栉孔扇贝a2M基因的5’末端克隆Ⅰ | 第74-75页 |
| ·双链cDNA合成 | 第74页 |
| ·接头添加 | 第74页 |
| ·栉孔扇贝a2M基因5’末端片段的PCR扩增 | 第74-75页 |
| ·栉孔扇贝a2M基因5’末端克隆Ⅱ | 第75-76页 |
| ·反转录制备cDNA | 第75页 |
| ·添加polyA Tail | 第75页 |
| ·polyA Tail cDNA互补链的合成和PCR扩增 | 第75-76页 |
| ·栉孔扇贝α2M基因3’末端克隆 | 第76-77页 |
| ·克隆、测序和序列的生物信息学分析 | 第77-78页 |
| ·栉孔扇贝α2M在不同组织的表达分析 | 第78-79页 |
| ·组织RNA抽提 | 第78-79页 |
| ·表达检测扩增引物的设计 | 第79页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第79页 |
| 3 实验结果 | 第79-105页 |
| ·栉孔扇贝α2M受体结合区片段的的克隆 | 第79-80页 |
| ·栉孔扇贝α2M诱饵区片段的克隆 | 第80-84页 |
| ·栉孔扇贝α2M5’末端克隆Ⅰ | 第84-85页 |
| ·栉孔扇贝α2M5’末端克隆Ⅱ | 第85-88页 |
| ·栉孔扇贝α2M3’末端克隆 | 第88-90页 |
| ·栉孔扇贝α2M基因全长及生物信息学分析 | 第90-104页 |
| ·栉孔扇贝α2M基因在不同组织的表达分析 | 第104-105页 |
| 4 讨论 | 第105-113页 |
| ·技术路线 | 第105-106页 |
| ·栉孔扇贝α2M的结构 | 第106-107页 |
| ·α2M的分子进化 | 第107-108页 |
| ·α2M的组织表达 | 第108-113页 |
| 第四章 抑制消减杂交法筛选栉孔扇贝抗病相关基因 | 第113-129页 |
| 1 引言 | 第113-116页 |
| 2 材料方法 | 第116-121页 |
| ·动物处理 | 第116页 |
| ·RNA抽提和mRNA纯化 | 第116-117页 |
| ·Tester和Driver的制备 | 第117-118页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第117页 |
| ·RsaI酶切 | 第117页 |
| ·接头连接 | 第117-118页 |
| ·连接效率检验 | 第118页 |
| ·消减杂交 | 第118页 |
| ·抑制性PCR | 第118-119页 |
| ·消减效率分析 | 第118页 |
| ·PCR扩增 | 第118-119页 |
| ·文库构建和筛选 | 第119页 |
| ·杂交分析 | 第119-120页 |
| ·测序和生物信息学分析 | 第120-121页 |
| 3 结果 | 第121-124页 |
| 4 讨论 | 第124-129页 |
| 第五章 栉孔扇贝β肌动蛋白基因的克隆 | 第129-143页 |
| 1 引言 | 第129-130页 |
| 2 材料和方法 | 第130-134页 |
| ·动物 | 第131页 |
| ·总RNA抽提和mRNA纯化 | 第131页 |
| ·cDNA第一链合成和RT-PCR | 第131-132页 |
| ·肌动蛋白基因3’末端克隆 | 第132页 |
| ·双链cDNA合成及5’末端克隆 | 第132-133页 |
| ·克隆和测序 | 第133-134页 |
| 3 结果和讨论 | 第134-143页 |
| 致谢 | 第143页 |