前言 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
英文摘要 | 第8-10页 |
第一章 综述-脂肪酸去饱和酶研究进展 | 第10-25页 |
1 脂肪酸和多不饱和脂肪酸的命名、分类及生理功能 | 第10-11页 |
2 多不饱和脂肪酸的生物合成 | 第11-12页 |
3 脂肪酸去饱和酶 | 第12-18页 |
4 微藻脂肪酸去饱和酶及其基因表达的生态调控 | 第18-23页 |
5 微藻脂肪酸去饱和酶基因的克隆与转移 | 第23-24页 |
6 微藻培养生产PUFAs展望 | 第24-25页 |
第二章 小新月菱形藻△5脂肪酸去饱和酶的基因克隆 | 第25-39页 |
1 小新月菱形藻的分类地位、形态特征、材料来源及培养 | 第25-26页 |
2 小新月菱形藻△5脂肪酸去饱和酶的基因克隆 | 第26-39页 |
·简并PCR及阳性克隆的筛选鉴定 | 第27-33页 |
·试剂与仪器 | 第27-28页 |
·基因组DNA的制备 | 第28页 |
·简并引物的设计及简并PCR | 第28-29页 |
·目的条带的回收 | 第29-30页 |
·T-A连接 | 第30-32页 |
·转化 | 第32-33页 |
·阳性克隆的筛选鉴定 | 第33页 |
·阳性克隆的菌株保存及测序 | 第33页 |
·反向PCR及阳性克隆的筛选鉴定 | 第33-35页 |
·酶切基因组 | 第33页 |
·酶切产物自连 | 第33-34页 |
·特异引物的设计及反向PCR | 第34-35页 |
·片段回收、连接及转化 | 第35页 |
·阳性克隆的筛选鉴定 | 第35页 |
·阳性克隆的菌株保存及测序 | 第35页 |
·结果 | 第35-39页 |
·基因组DNA的制备 | 第35-36页 |
·载体pBS的制备 | 第36页 |
·简并PCR | 第36页 |
·简并PCR阳性克隆的筛选与鉴定 | 第36页 |
·简并PCR阳性克隆的测序结果 | 第36-37页 |
·反向PCR | 第37页 |
·反向PCR阳性克隆的筛选与鉴定 | 第37-38页 |
·反向PCR阳性克隆的测序结果 | 第38-39页 |
第三章 三角褐指藻△5脂肪酸去饱和酶的基因克隆 | 第39-45页 |
1 三角褐指藻的分类地位、形态特征、材料来源及培养 | 第39-40页 |
2 三角褐指藻△5脂肪酸去饱和酶的基因克隆 | 第40-45页 |
·简并PCR及阳性克隆的筛选鉴定 | 第40页 |
·反向PCR及阳性克隆的筛选鉴定 | 第40-42页 |
·结果 | 第42-45页 |
第四章 两株硅藻△5脂肪酸去饱和酶的序列分析 | 第45-60页 |
1 小新月菱形藻△5脂肪酸去饱和酶基因、蛋白序列分析 | 第45-50页 |
·基因序列分析 | 第45-47页 |
·蛋白序列分析 | 第47-50页 |
2 三角褐指藻△5脂肪酸去饱和酶基因、蛋白序列分析 | 第50-52页 |
·基因序列分析 | 第50-51页 |
·蛋白序列分析 | 第51-52页 |
3 两株硅藻之间及与其它生物的△5脂肪酸去饱和酶序列比较 | 第52-59页 |
·两株硅藻之间的基因、蛋白序列比较 | 第52-56页 |
·小新月菱形藻与其它生物的△5脂肪酸去饱和酶蛋白序列比较 | 第56-59页 |
4 小结与工作展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-70页 |
附录 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-78页 |